Prepoznavanje značilnih kromosomskih prireditev z reagenčnim kompletom mDx HemaVision pri bolnikih z levkemijo
Detection of specific chromosomal rearrangement in leukemia patients by mDx HemaVision kit

slovenski

2004

Chromosome Aberrations   Diagnosis   Electrophoresis, Agar Gel   Elektroforeza, agar gel   Genetics   Kromosomske aberacije   Leukemia   Leukemia, B-Cell, Acute   Leukemia, Lymphocytic, Acute   Leukemia, Myeloid, Chronic   Leukemia, T-Cell, Acute   Levkemija   Levkemija B-celična, akutna   Levkemija limfocitna, akutna   Levkemija mieloidna, kronična   Levkemija T-celična, akutna   Polimerazna, verižna reakcija   Polymerase Chain Reaction   Reagent Kits, Diagnostic   Reagentni kompleti diagnostični

Slovensko zdravniško društvo
(Obvezni izvod spletne publikacije)

Izhodišča. Reagenčni komplet mDx HemaVision je namenjen za kvalitativno ugotavljanje 28 različnih kromosomskih preureditev, značilnih za posamezne podvrste levkemij z načinom obratnega prepisovanja, hkratne in vgnezdene verižne reakcije s polimerazo. S to reakcijo lahko določimo prisotnost ali odsotnost specifičnih mRNK prepisov oziroma cDNK segmentov po obratnem prepisovanju združenih ali okvarjenih genov, ki nastanejo zaradi kromosomskih preureditev. Bolniki in metode. Uporabnost reagenčnega kompleta smo preverili v 26 vzorcih RNK bolnikov z akutno levkemijo in 7 s kronično mieloproliferativno boleznijo ter primerjali izsledke med reagenčnim kompletommDx HemaVision in usklajenim protokolom RT-PCR pri ugotavljanju značilnih prepisov mRNK t(9;22)(q34;q11), t(8;21)(q22;q22), inv16(p13;q22), t(15;17)(q21;q21) in t(4;11)(q21;q23). RNK smo pridobili iz enojedrnih celic kostnega mozga po gostotnem gradientnem centrifugiranju preko fikola in z uporabo reagenčnega kompleta High Pure RNA Isolation. Sintezo komplementarne DNK in verižno reakcijo s polimerazo smo izvedli, kot je opisano v protokolu reagenčnega kompleta ali mDx HemaVision v usklajenem protokolu RT-PCR. Pridelke PCR reakcij smo ocenjevali z agarozno gelsko elektroforezo, barvanjemgelov z etidijevim bromidom in detekcijo pod UV lučjo. Rezultati. Dobili smo 100-odstotno ujemanje izsledkov za preiskave, ki so skupne obema postopkoma. Značilen BCRABL mRNK prepis t(9;22)(q34;q11) smo dokazali pri bolniku z BALL, bolniku z bifenotipsko levkemijo in pri štirih bolnikih s KML.AHL1-ETO mRNK prepis t(8;22)(q22;q22) smo ugotovili pri dveh bolnikih z AML. Pri enem bolniku z AML z nenormalnimi eozinofilci v kostnem mozgu smo dokazali CBFbeta/ MYH11 mRNK prepis inv16(p13;q22). MLL/AF4 mRNK prepis t(4,11))(q21;q23) smo ugotovili pri deklici z B-ALL in bolniku z BALL po zdravljenju s citostatiki. (Izvleček skrajšan pri 2000 znakih).

15.05.2023