I-89
Strokovni prispevek/Professional article
RASTNE LASTNOSTI CIRKULIRAJOČIH
KRVOTVORNIH MATIČNIH CELIC PRI KRONIČNI
LEDVIČNI ODPOVEDI
PROLIFERATION OF CIRCULATING HEMATOPOIETIC STEM CELLS IN CHRONIC RENAL
FAILURE
Marjana Glaser
Oddelek za hematologijo in hematološko onkologijo, Interna klinika, Učna bolnišnica Maribor, Ljubljanska 5, 2000 Maribor
Prispelo 2004-02-13, sprejeto 2004-03-16; ZDRAV VESTN 2004; 73: Suppl. I: 89–92
Key words: chronic renal failure; uremia; circulating stem
cells; BFU E; CFU GM; CFU GEMM; anemia
Abstract – Background. The cause of anemia in chronic re-
nal failure seems to be multifactorial. The aim of our investi-
gation was to verify the hypothesis that the causes of anemia
are at a higher stem cell level. Therefore, beside peripheral
blood BFU E which require erythropoietin, we cultivated pe-
ripheral blood stem cells which do not require it – CFU GM
and CFU GEMM.
Patients and methods. Peripheral blood BFU E, CFU GM and
CFU GEMM were studied in 65 uremic patients who were
placed on maintenance hemodialysis three times weekly. All
were anemic. In regard to creatinine concentration they
were divided into Group 1 with creatinine concentration
< 900 µmol/L (24 pts) and Group 2 with creatinine concentra-
tion > 900 µmol/L (41 pts).
Hematopoietic colony-forming cells from blood were assayed
in a methylcellulose culture with growth factor addition.
Results. The growth of colonies BFU E and CFU GM was signi-
ficant inhibited in whole group of patients, growth of CFU
GEMM was significantly inhibited in the Group 2. A positive
correlation of the CFU GM and BFU E, CFU GEMM and BFU E
and CFU GM and CFU GEMM colonies was found in the
whole group of patients. There was a negative correlation
between the growth of the CFU GEMM, CFU GM and BFU E
colonies and the urea concentration in the entire group of
patients. In Group 1 a negative correlation was found
between the growth of the BFU E and CFU GM colonies and
creatinine concentration. In the Group 2 a negative correla-
tion between growth of the BFU E and CFU GM and urea
concentration was found.
Conclusions. According to our study, erythropoetin concen-
tration, although normal, is still too low with regard to the
grade of anemia. In patients the number of stem cell colonies
was decreased significantly, correlating with the severity of
uremia. This confirms the hypothesis that disturbed hemato-
poiesis in uremia is affected by additional factors and that
their influence in uremia is permanent.
Ključne besede: kronična ledvična odpoved; uremija; cir-
kulirajoče matične celice; CFU GEMM; CFU GM; BFU E; ane-
mija
Izvleček – Izhodišča. Anemija pri kronični ledvični odpove-
di najverjetneje nastane zaradi več dejavnikov. Namen naše
raziskave je bil potrditi hipotezo, da so vzroki za nastanek
anemije na višji ravni matičnih celic. Poleg BFU E, ki potre-
bujejo za rast eritropoetin, smo iz periferne krvi še kultivirali
matične celice, ki eritropoetinov za rast ne potrebujejo: CFU
GM in CFU GEMM.
Bolniki in metode. BFU E, CFU GM in CFU GEMM iz periferne
krvi smo raziskovali pri 65 bolnikih z uremijo, ki so se zdravili
s hemodializo trikrat tedensko. Vsi bolniki so imeli anemijo.
Da bi ugotovili vpliv uremije na rast kultur celic, smo bolnike
razdelili v dve skupini: skupino bolnikov s kreatininom
< 900 µmol/L (24 bolnikov) in skupino s kreatininom > 900
µmol/L (41 bolnikov).
Hematopoetske matične celice smo kultivirali na metilcelulo-
zi z dodatkom rastnih dejavnikov.
Rezultati. Rast kolonij BFU E in CFU GM je bila statistično
značilno inhibirana v celotni skupini bolnikov in rast CFU
GEMM statistično značilno inhibirana pri bolnikih v skupini
s keratininom > 900 µmol/L. Pozitivna korelacija med rastjo
kolonij CFU GM in BFU E, CFU GEMM in BFU E in CFU GM in
CFU GEMM je bila ugotovljena v celotni skupini bolnikov, v
isti skupini pa tudi negativna korelacija med rastjo kolonij
CFU GEMM, CFU GM in BFU E in koncentracijo sečnine. V
skupini 1 je bila ugotovljena negativna korelacija med rastjo
kolonij BFU E in CFU GM in koncentracijo kreatinina, v sku-
pini 2 pa negativna korelacija med rastjo kolonij BFU E in
CFU GM ter koncentracijo sečnine.
Zaključki. Glede na naše ugotovitve zaključujemo, da je kon-
centracija eritropoetina, čeprav v mejah normale, prenizka
glede na stopnjo anemije. Pri bolnikih smo ugotovili signifi-
kantno zmanjšano rast kolonij matičnih celic, ki so korelirale
s stopnjo uremije. To potrjuje našo hipotezo, da je hemato-
poeza zavrta zaradi različnih dejavnikov.
ZDRAV VESTN 2004; 73: I-89–92
I-90 ZDRAV VESTN 2004; 73: SUPPL I
Uvod
Značilnost primitivnih krvotvornih matičnih celic (KMC) je, da
lahko zapustijo kostni mozeg in krožijo po krvi. Pri zdravih
najdemo v krvi KMC (PB KMC), ki na poltrdih gojiščih tvorijo
kolonije usmerjenih matičnih celic (enot) za granulocite-eri-
trocite-monocite-megakariocite (colony forming unit granu-
locyte-erythrocyte-monocyte-megakariocyte – CFU GEMM),
za granulocite in monocite (colony forming unit granulocyte-
monocyte – CFU GM) ter kolonije usmerjenih matičnih celic
(»bursts«) za eritrocite (burst forming unit erythroid – BFU E),
ki so primitivnejše kot njihove soimenjakinje iz kostnega mo-
zga (1). Skupna značilnost teh celic je, da potrebujejo za rast
številne rastne hormone, predvsem pa interlevkin 3 (IL 3) (2).
Med hematološkimi spremembami kronične ledvične odpo-
vedi (KLO) je najočitnejša normocitna, normohromna anemi-
ja in velika nagnjenost k okužbam. Mehanizem nastanka ane-
mije ni dokončno razjasnjen, vendar je njen glavni vzrok sora-
zmerno pomanjkanje eritropoetina (EPO) (3). Mnogo raziskav
je bilo posvečenih vplivu uremičnih toksinov, kot sta poliami-
na spermin in spermidin, ki in vitro zavirata eritropoezo (4),
parathormon, ki poleg fibroze kostnega mozga poveča od-
pornost eritroblastov na EPO (5), in ribonukleaza, za katero so
dokazali, da in vitro zavira rast CFU E (6). Med redkejšimi he-
matološkimi spremembami opisujejo povečano število nevtro-
filcev, čeprav njihovo število po stimulaciji s hidrokortizonom
pri nedializiranih in dializiranih bolnikih ne naraste (7).
Zadnja leta se za zdravljenje anemije pri KLO uporablja re-
kombinantni humani EPO (rhu EPO). Odmerki, potrebni za
zdravljenje ledvične anemije pri bolnikih, niso enaki in se ne
ujemajo s stopnjo anemije (8).
Prav tako še ni popolnoma jasno, ali niso oziroma v koliki meri
so vpleteni v patogenezo anemije še drugi mehanizmi in siste-
mi, predvsem monocitno makrofagni sistem, ki ima vlogo he-
matopoetske strome in izloča faktorje, ki stimulirajo kolonije
(CFU) (9).
Da bi preverili vpliv hematopoetske strome na rast primitiv-
nejših matičnih celic, je bil cilj raziskave proučiti klonogeno in
proliferacijsko sposobnost primitivnejših matičnih celic iz pe-
riferne krvi (PB) : BFU E, CFU GM in CFU GEMM.
Bolniki in metode
Bolniki
V raziskavo smo vključili 65 bolnikov s KLO in normocitno
normohromno anemijo, ki so bili zdravljeni s hemodializo tri-
krat tedensko. Starost bolnikov je bila 20 do 79 let. Bolniki 1
mesec niso prejeli transfuzije krvi niti niso bili prej zdravljeni z
rhu EPO. Pred študijo so podpisali privolitev v skladu s Helsin-
ško deklaracijo.
Razdelili smo jih v dve skupini : skupina 1 (24 bolnikov) je
imela koncentracijo kreatinina < 900 µmol/L, skupina 2 (41
bolnikov) je imela koncentracijo kreatinina > 900 µmol/L.
Poleg krvne slike in razmaza smo bolnikom določili koncen-
tracijo sečnine, kreatinina, sečne kisline, natrija, kalija, klora.
Koncentracijo plazemskega EPO smo določili z ELISA test Pre-
dicta ® Erithropoetin Kit, Genzyme Diagnostics.
Kot kontrolno skupino smo testirali 30 zdravih prostovoljcev v
starosti 20 do 76 let.
Metode dela – kratkotrajna kultivacija matičnih
celic na metilcelulozi
Iz 20 ml periferne krvi, odvzete v heparinizirane epruvete
pred hemodializo, smo pripravili neadherentne mononukle-
arne celice (MNC) s centrifugiranjem preko Fikola (gostota
1,077 g/ml) (Lymphoprep ™, Nycomed Pharma AS, Oslo) pri
500 g za 30 min. Po centrifugiranju smo prelili MNC v sterilne
epruvete, v katerih je bilo 4 ml sterilnega medija RPMI
1640. Zmes smo centrifugirali dvakrat 7 min na 650 g, nakar
smo celice ponovno razredčili v 2 ml medija RPMI 1640. Kon-
centracijo MNC smo določili s pomočjo hemocitometra Bur-
ker-Turk, njihovo viabilnost pa s supravitalnim barvanjem s
tripanskim modrilom.
Koncentraciji 1 × 106 /ml MNC smo dodali 1,35 ml zmesi za
klonogeni test in vitro (MethoCult ™ H 4431, StemCell Tech-
nologies Inc, Vancouver), ki vsebuje poleg 0,9% metilceluloze
v Iscove’s MDM, 30% fetalnega bovinega seruma, 1% bovine-
ga albumina, 10–4 M 2-mercaptoethanola, 2 mM L-glutamina
še 50 ng/mL rhu SCF, 10 ng/mL rhu IL 3, 10 ng/mL rhu GM
CSF, 3 enote /mL rhu EPO. Po 0,5 ml vzorca smo v triplikatu
razlili v plastične posodice premera 15 mm (Multidish 4 Wells,
Nunclon Delta SI, Nalge Nunc International) ter jih kultivirali
14 dni pri 37 °C v vlažnem okolju s 5% CO. Prednost kultivira-
nja na metilcelulozi je, da lahko v isti posodici kultiviramo hkra-
ti kolonije BFU E, CFU GM in CFU GEMM.
Zrasle kolonije smo prešteli z invertnim mikroskopom.
Statistična analiza
Rezultati so podani kot srednja vrednost ± SE. Statistično zna-
čilnost smo ocenili s Studentovim t-testom in F-testom. Če je
bila vrednost p manjša od 0,05, je bila statistično značilna. Opra-
vili smo tudi korelacijo dveh parametrov.
Rezultati
Hematološke značilnosti bolnikov
Hematološke značilnosti bolnikov so prikazane v razpredelni-
ci 1. 
Celotna skupina bolnikov se je statistično značilno razlikovala
od kontrolne skupine zdravih oseb v vseh parametrih, razen v
številu levkocitov. Skupina 1 in 2 sta se med seboj statistično
značilno razlikovali v koncentraciji kreatinina (p < 0,001) in
sečnine (p < 0,001). Koncentracija EPO ni bila statistično raz-
lična v nobeni skupini.
Cirkulirajoče KMC in njihova korelacija
z različnimi parametri
Rast kolonij CFU GEMM je bila v celotni skupini bolnikov zmanj-
šana v primerjavi s kontrolno skupino, čeprav ne statistično
značilna. V skupini 2 je bila rast istih kolonij statistično signifi-
kantno nižja (p < 0,002) kot v skupini 1. 
Rast kolonij CFU GM je bila statistično značilno manjša (p <
0,04) v celotni skupini bolnikov v primerjavi s kontrolno skupi-
no. Med skupino 1 in skupino 2 ni bilo statistično značilno
zmanjšane razlike v rasti kolonij CFU GM, medtem ko smo
ugotovili statistično značilno zmanjšano rast te kolonije (p <
0,005) v skupini 2 v primerjavi s kontrolno skupino.
Rast kolonij BFU E je bila v celotni skupini bolnikov statistično
značilno bolj zmanjšana (p < 0,001) kot v kontrolni skupini, v
skupini 2 pa je bila rast iste kolonije statistično značilno zmanj-
šana v primerjavi z rastjo kolonij kontrolne skupine (p < 0,002).
V celotni skupini bolnikov smo ugotovili korelacijo rasti kolonij
CFU GEMM in BFU E (r = 0,552, p < 0,01) in CFU GM (r = 0,35,
p < 0,001). Rast kolonij CFU GEMM (r = 0,358, p < 0,01), CFU
GM (r = 0,319, p < 0,05) in BFU E (r = 0,239, p < 0,05) je
negativno korelirala s koncentracijo sečnine.
V skupini 1 je bila ugotovljena korelacija rasti kolonij CFU
GEMM in BFU E (r = 0,780, p < 0,001), CFU GEMM in CFU GM
(r = 0,845, p < 0,001) in CFU GM in BFU E (r = 0,845, p <
0,001). V isti skupini smo ugotovili negativno korelacijo med
rastjo kolonij BFU E (r = 0,689, p < 0,03) in CFU GM (r = 0,582,
p < 0,02) in koncentracijo kreatinina ter med rastjo kolonij
CFU GEMM in koncentracijo sečne kisline (r = 0,467, p < 0,05).
I-91
Koncentracija EPO je v skupini 1 negativno korelirala s kon-
centracijo kreatinina (r = 0,358, p < 0,02).
V skupini 2 smo ugotovili korelacijo med rastjo kolonij CFU
GM in BFU E (r = 0,78, p < 0,01), in negativno korelacijo med
rastjo kolonij BFU E (r = 0,44, p < 0,04) in CFU GM (r = 0,32, p
< 0,03) ter koncentracijo sečnine. Koncentracija EPO v tej sku-
pini je negativno korelirala s koncentracijo železa (r = 0,34, p
< 0,05).
Razpravljanje
V naši raziskavi smo analizirali PB KMC, ki so primitivnejše kot
njihove soimenjakinje v kostnem mozgu (1) na metilcelulozi,
ob dodatku rastnih hormonov, med katerimi sta bila dodana
tudi za primitivnejše celice potrebna SCF in IL 3 (10).
V celotni skupini bolnikov smo ugotovili statistično zmanjšano
rast kolonij BFU E in CFU GM, rast CFU GEMM pa je v isti
skupini pozitivno korelirala z rastjo kolonij CFU GM in BFU E.
V skupini z višjo koncentracijo kreatinina smo ugotovili stati-
stično značilno zavrto rast kolonij CFU GEMM, rast kolonij BFU
E in CFU GM pa je bila manjša, čeprav ne statistično značilna.
Med rastjo kolonij PB BFU E in CFU E in naraščanjem koncen-
tracije kreatinina smo ugotovili negativno korelacijo. Če smo
primerjali rast kolonij MKC med bolniki in kontrolno skupino,
smo v skupini 2 ugotovili značilno zmanjšano rast kolonij PB
BFU E in CFU GM ter negativno korelacijo rasti obeh kolonij s
koncentracijo sečnine.
Koncentracija EPO je bila pri celotni skupini bolnikov v nor-
malnih vrednostih, kar pa je neadekvatno z ozirom na stopnjo
anemije. Ker smo hkrati ugotovili zmanjšano rast ko-
lonij BFU E, lahko potrdimo ugotovitve drugih raz-
iskovalcev, da je zmanjšana koncentracija EPO eden
glavnih povzročiteljev nastanka anemije pri bolnikih s
KLO (11).
Število levkocitov v nobeni skupini ni bilo značilno
zmanjšano ali zvečano. Ker smo v raziskavi ugotovili
poleg manjše rasti kolonij CFU GM tudi zmanjšano
rast kolonij CFU GEMM, ki so manj zrele prednice,
lahko predpostavljamo, da je hematopoeza zavrta v
celoti oziroma na višji ravni KMC.
Za razliko od dosedanjih raziskav smo v naši raziskavi
analizirali tudi najprimitivnejše CFU GEMM, na kate-
rih rast in diferenciacijo vpliva predvsem dejavnost za
spodbujanje usmerjenih matičnih celic (burst promo-
ting activity – BPA) (12). Ugotovili smo, da je rast kolo-
nij korelirala z rastjo BFU E in CFU GM in je bila značil-
no zavrta z naraščajočo koncentracijo kreatinina.
Iz tega zaključujemo in smo potrdili hipotezo, da na
razvoj motene hematopoeze in predvsem razvoja ane-
mije v KLO vplivajo še drugi dejavniki, ki so nevezani
na izločanje EPO. Hematopoeza je inhibirana v celoti
in njena inhibicija je povezana s stopnjo uremije. Pred-
postavljamo, da je negativen učinek uremije na KMC
trajen, zaradi česar je bila rast kolonij KMC zavrta kl-
jub dodatku rastnih dejavnikov v kulturi celic.
Na podlagi naše ugotovitve lahko razložimo tudi v uvo-
du omenjeni glavni hematološki značilnosti KLO – ane-
mijo in nagnjenost h okužbam. Znano je, da pri bolni-
kih s KLO ni enotnega odmerka rhu EPO za zdravlje-
nje anemije. Odmerek tudi ne korelira s stopnjo ane-
mije. Že v predhodnih študijah so ugotovili, da se po
zdravljenju z rhu EPO število kolonij BFU E iz kostne-
ga mozga prvi teden poveča, nato pa statistično zna-
čilno zmanjša. BFU E iz prvega tedna so » pozni BFU E
», ki imajo že receptorje za EPO, medtem pa kasnejše
kolonije zrastejo le iz »zgodnjih BFU E«, ki teh recep-
torjev nimajo (8, 10), kar govori za moteno hemato-
poezo. Z enako motnjo bolniki s KLO slabše prenaša-
jo in se odzivajo na stres, predvsem pa so izredno
občutljivi na okužbe zaradi zmanjšane granulocitne rezerve
(7).
Z iskanjem vzrokov patogeneze anemije ob KLO so se ukvar-
jale sicer že številne predhodne raziskave, ki so raziskovale
predvsem vpliv uremičnih toksinov na rast kolonij CFU E ali
BFU E iz kostnega mozga (13, 14). Žal v nobeni teh študij niso
omenili priprave uporabljenega uremičnega seruma pred tem,
niso upoštevali morebitnih imunoloških vplivov in tudi upo-
rabljene koncentracije teh serumov so se razlikovale. Večina
študij, v katerih so uporabljene PB KMC, pa se nanaša na he-
matološke bolezni, medtem ko je le nekaj raziskav, v katerih
so študirali PB BFU E pri KLO (10).
Nedvomno je EPO je glavni regulacijski hormon za diferenci-
acijo zrelih eritroidnih prednic iz kostnega mozga, kot sta CFU
E in pozni BFU E (15). V naši raziskavi smo kultivirali nezrele
(zgodnje BFU E), ki še nimajo receptorjev za EPO. Za svojo
rast in razvoj potrebujejo IL 3, ki je sestavni del BPA (16). BPA
izločajo limfociti T4, katerih je pri bolnikih, zdravljenih z inter-
mitentno hemodializo, manj (17). Inhibicija je menda trajna in
korelira s stopnjo uremije (16). Na aktivacijo komplementa in
monocitov ima trajen učinek tudi sam dializni postopek (17).
Monociti izločajo ob vsakem postopku večje količine vnetnih
monokinov, predvsem IL 6 in IL 12 (17), ki prav tako prepre-
čujejo delovanje že tako zaradi uremije oslabljenih limfocitov
T (18).
Na podlagi naših podatkov in podatkov o spremenjenem imun-
skem sistemu, predvsem delovanju limfocitov T, aktivaciji kom-
plementa in vlogi monocitov pri bolnikih s KLO, menimo, da
so za spremembe, ugotovljene v naši raziskavi, odgovorni:
Razpr. 1. Hematološke značilnosti naših bolnikov s KLO.
Table 1. Blood characteristics of the patients with chronic renal failure.
Vsi bolniki Skupina 1 Skupina 2
All patients Group 1 Group 2
Število bolnikov
No. of patients
65 24 41
Število eritrocitov (× 1012 /L)
Eritrocytes
2,97 ± 0,4 2,89 ± 0,55 3,02 ± 0,41
Hemoglobin (g/L)
Hemoglobin
90,1 ± 1,4 87,2 ± 3,2 91,4 ± 4,5
Levkociti (x 109 /L)
Leukocytes
7,06 ± 3,01 6,31 ± 1,07 7,49 ± 3,8
Trombociti (× 109 /L)
Thrombocytes
192,1 ± 52,2 203,4 ± 67 185,8 ± 41,2
Kreatinin (µmo/L)
Creatine
1001,2 ± 233,7 771,75 ± 100,13 1135 ± 177,69
Urea (mmol/L)
Urea
27,09 ± 7,8 23,35 ± 6,6 29,29 ± 4,66
Sečna kislina (µmo/L)
Uric acid
441,5 ± 90 416,7 ± 76,1 456,07 ± 95,1
Natrij (mmol/L)
Natrium
137,5 ± 3,7 138,06 ± 4,27 137,22 ± 3,3
Kalij (mmol/L)
Potessium
5,5 ± 0,7 5,36 ± 0,85 5,61 ± 0,76
Kalcij (mmol/L)
Calcium
2,2 ± 0,3 2,27 ± 0,23 2,25 ± 0,35
Železo (µmo/L)
Ferrum
12,2 ± 5,5 11,66 ± 3,89 12,06 ± 5,7
Feritin (µg/L)
Ferritine
240,4 ± 234,6 300,43 ± 245,6 200 ± 102
CFU GEMM (kolonije/105 MNC)
CFU GEMM (colonies/105 MNC)
1 ± 1,7 1,62 ± 2,36 0,68 ± 1,27
CFU GM (kolonije/ 105 MNC)
CFU GM (colonies/105 MNC)
11 ± 13,7 11,33 ± 11,86 10,75 ± 14,74
BFU E (kolonije/ 105 MNC)
BFU E (colonies/105 MNC)
31 ± 21,8 36,8 ± 30,11 27,12 ± 13,82
EPO (IU/L) 16 ± 15,8 16 ± 14,6 16 ± 16,7
GLASER M. RASTNE LASTNOSTI CIRKULIRAJOČIH KRVOTVORNIH MATIČNIH CELIC PRI KRONIČNI LEDVIČNI ODPOVEDI
I-92 ZDRAV VESTN 2004; 73: SUPPL I
zmanjšano izločanje rastnih dejavnikov (citokinov), predvsem
IL 3, in povečano nastajanje vnetnih monokinov z inhibicijskim
delovanjem na hematopoezo. Nedvomno pa ima na to svoj
vpliv tudi sam postopek hemodialize.
Literatura
1. Abboud CN, Liesveld JL. Granulopoiesis and monocitopoiesis. In : Hoffman
R, Benz EJ, Jr, Shattil SJ et al. Basic principles and practice, 2 nd ed. New York,
Edinburgh, London: Churchil Livingstone 1995: 255–86.
2. Molecular biology and cytokines. In: Munker R, Hiller E, Paquette R eds.
Modern hematology. Totowa, New Jersey: Humana Press 2000: 19–34.
3. Eschbach JW, Adamson JW, Cook JD. Disorders of red blood cell production
in uremia. Arch Intern Med 1970; 126: 812–5.
4. Radtke HW, Rege AB, La Marche MB, Bartos D et al. Identification of spermi-
ne as an inhibitor of erythropoiesis in patients with chronic renal failure. J
Clin Invest 1981; 61: 1623–9.
5. Meytes D, Bogin EMA, Dukex PP, Masry G. Effect of parathyroid hormone on
erythropoiesis. J Clin Invest 1981; 67: 1263–9.
6. Eschbach JW. Hemathological problems of dialysis patients. In: Maher JF ed.
Replacement of renal function by dialysis. 3rd ed. Dordrecht, Boston, Lanca-
ster: Kluwer Academic Publishers 1989: 851–64.
7. Morra L, Ponassi G, Gurreri F, Moccia F, Caristo G et al. Alterations of
erythropoiesis in chronic uremic patients treated with intermittent hemodi-
alysis. Biomedicine & Pharmacotherapy 1987; 41: 396–9.
8. Means RT, Krantz SB. Progress in understanding the pathogenesis of the
anemia in chronic disease. Blood 1992; 80: 1639–47.
9. Williams DA. Stem cell model of hematopoiesis. In : Hoffman R, Benz EJ, Jr,
Shattil SJ et al. Basic principles and practice. 2nd ed. New York, Edinburgh,
London: Churchil Livingstone 1995: 180–92.
10. Matsuzaki Y, Mizuguchi T, Kosaka M, Saito S. Analysis of circulating hemato-
poietic progenitors in patients with chronic renal failure under hemodialy-
sis. Int J Hematol 1995; 63: 33–40.
11. De Klerk G, Wilmink JM, Rosengarten PCJ, Vet RJWM et al. Serum erythropo-
ietin titers in anemia of chronic renal failure. J Lab Clin med 1982; 100: 720–
34.
12. Pavletic Z, Labar B. Hematopoetski faktori rasta. Lijec Vjes 1990; 112: 339–46.
13. Corazza F, Bergmann P, Dratwa M, Guns M, Fondu P. Responsiveness to
recombinant erythropoietin therapy in end stage renal disease. An analysis
of the predictive value of several biological measurements, including circu-
lating erythroid progenitors. Nephrol Dial Tranplant 1992; 7: 311–7.
14. Allen DA, Breen C, Yaqoob MM, Mac Dougall IC. Inhibition of CFU E colony
formation in uremic patients with inflammatory disease: role of IFN ă and
TNF á. J Invent Med 1999; 47: 204–11.
15. Labar B. Eritrocitopoeza, biokemija i funkcija eritrocita. In: Jakšić B, Labar
B, Grgičević D eds. Hematologija i transfuziologija. Zagreb: UMENA, 1989:
23–32.
16. Morra L, Ponassi AG, Gurreri G, Moccia F, Mela GS et al. Inadequate ability of
T lymphocytes from chronic uremic subjects to stimulate the in vitro growth
of commited erythroid progenitors (BFU E). Acta Haematol 1988; 79: 187–
91.
17. Girndt M, Sester M, Sester U, Kaul H, Köhler H. Molecular aspects of T and B
cell function in uremia. Kidney Int 2001; 59: 206–11.
18.  Bier V, Debantin KM, Bosh A, Hoffman HG, Müller-Wiefe DE et al. Is interle-
ukin (IL 3) a critical haematopoietic growth factor in uremia? Proc Eur Congr
Dial Transplant 1990.