Zdrav Vestn Supl | Preskrba s tkivi na Očesni kliniki v Ljubljani I-45
IZVIrnI čLanek/OrIgInaL artIcLe
Preskrba s tkivi na Očesni kliniki v Ljubljani
eye banking at Ljubljana eye hospital
Petra Schollmayer, andreja Veselica, Špela Štunf, Vladimir Pfeifer
Izvleček
Izhodišča: Poročati o dejavnosti preskrbe s tkivi 
na Očesni kliniki v Ljubljani.
Metode: Pregled dokumentacije očesne banke 
na Očesni kliniki Univerzitetnega kliničnega 
centra Ljubljana od 1. 7. 2009 do 31. 12. 2011.
Rezultati: Na Očesni kliniki izvajamo naslednje 
postopke preskrbe s tkivi: odvzem, evalvacijo, 
shranjevanje, dodeljevanje in uporabo (presadi-
tev).
V dveh letih in pol po akreditacijskem postop-
ku smo pri 135 odvzemih pridobili 262 roženic. 
Odvzemi so potekali po vsej Sloveniji. Povprečna 
starost darovalcev je bila 53,4 let in povprečna 
starost prejemnikov 58 let. Povprečni čas od 
smrti do odvzema je pri mrtvih dajalcih znašal 
8,3 ure, povprečni čas hranjenja roženic 2,8 dni. 
V dveh letih in pol smo presadili 148 (56,5 %) 
vseh roženic. Vzroki za neprimernost donorske 
roženice za presaditev so bili: neprimeren en-
dotel (19,5 % vseh roženic), pozitivni rezultati 
seroloških testiranj (9,5 %), stromalne motnjave 
(7,2 %), obsežna okvara epitela z izrazitim ede-
mom strome (4,2 %), izrazit gerontokson (3 %) 
ter drugo (0,8 %). Indikacije za presaditev so 
bili keratokonus (26,3 %), pooperativna bulozna 
keratopatija (24,3 %), brazgotine po keratitisu 
(12,2 %) ali po poškodbah (9,5 %), zamotnitev 
presadka (9,5 %), perforirani ulkus (4,7 %), Fuch-
sova endotelna distrofija (4,7 %), druge distrofije 
roženice (4 %) ter stanje po kemični poškodbi 
(2 %).
Zaključek: Preskrba s tkivi na Očesni kliniki je 
akreditirana dejavnost z nadzorovanimi postop-
ki in dokumentacijo ter naraščajočim številom 
odvzemov in presaditev.
Abstract
Aim: To present the eye banking at the Eye Hos-
pital Ljubljana.
Methods: Review of the documentation of the 
Eye Bank at the Eye Hospital, University Medical 
Centre Ljubljana in the period from 1 July 2009 
to 31 December 2011.
Results: The Eye Bank activities at the Eye Hos-
pital Ljubljana include retrieval, evaluation, stor-
age and transplantation of corneal and scleral 
tissue, as well as of amniotic membrane. In the 
observed 30 months after the accreditation pro-
cess, 135 retrievals were performed all over the 
country, harvesting 262 corneas. Mean donor age 
was 53.4 years, mean recipient age was 58 years. 
The death-to-preservation time (DPT) in post-
mortem donors was 8.3 hours on average, while 
the storage time was 2.8 days on average. Of the 
harvested corneas, 148 (56.5 %) were transplant-
ed. The tissue was not selected for transplanta-
tion because of poor endothelium (19.5 % of all 
harvested corneas), positive serology (9.5 %), 
stromal opacities (7.2 %), extensive epithelial 
defect with stromal edema (4.2 %), significant 
arcus senilis (3 %) or other reasons (0.8 %). In-
dications for transplantation included: keratoco-
nus (26.3 %), postoperative bullous keratopathy 
(24.3 %), post-infectious scar (12.2 %), post-trau-
matic scar (9.5 %), late graft failure (9.5 %), Fuchs’ 
endothelial dystrophy (4.7 %), perforated corneal 
ulcer (4.7 %), chemical corneal injury (2 %) and 
corneal dystrophies other than Fuchs (4 %).
Conclusions: The Eye Hospital of Ljubljana has 
accredited eye banking activity with controlled 
and well-documented procedures, and an in-
creasing number of retrievals and transplanta-
tions.
Očesna klinika, 
Univerzitetni klinični 
center Ljubljana, 
Grablovičeva 46, 
Ljubljana
Korespondenca/
Correspondence:
asist. dr. Petra 
Schollmayer, dr. med.
Očesna klinika, 
Univerzitetni klinični 
center Ljubljana
grablovičeva 46, 
Ljubljana
e mail: petra.
schollmayer@gmail.com
Ključne besede:
očesna banka, roženica, 
sklera, amnijska 
membrana, presaditev
Key words:
eye banking, 
cornea, sclera, 
amniotic membrane, 
transplantation
Citirajte kot/Cite as:
Zdrav Vestn 2012;  
81: I-45–50
Prispelo: 9. feb. 2012, 
Sprejeto: 15. apr. 2012
I-46 Zdrav Vestn Supl | junij 2012 | Letnik 81
IZVIrnI čLanek/OrIgInaL artIcLe
Slika 1: Shranjevalni 
medij za roženice 
Optisol-gS.
bitev dovoljenja smo v skladu z nacionalno 
zakonodajo1-5 in smernicami Evropskega 
združenja očesnih bank (EEBA)6 izdelali 
nov, nadzorovan dokumentacijski sistem 
dejavnosti preskrbe s tkivi. Dokumentaci-
ja zajema standardne operacijske postopke 
(SOP), organizacijske predpise (OP) ter sis-
tem sledenja in histovigilance, ki omogoča 
ugotavljanje, sporočanje in zbiranje podat-
kov o hudih neželenih dogodkih ali reak-
cijah pri darovalcih ali prejemnikih tkiv ter 
njihovo epidemiološko spremljanje.
JAZMP je junija 2009 na Očesni kliniki 
opravila verifikacijski nadzorstveni pregled. 
Decembra istega leta smo prejeli dovoljenje 
za nadaljevanje opravljanja dejavnosti pre-
skrbe s tkivi. Predvideni so tudi nadaljnji 
nadzorstveni pregledi JAZMP.
Očesna banka na Očesni kliniki v Lju-
bljani je članica Evropskega združenja oče-
snih bank (European Eye Bank Association 
EEBA).
Preskrba z roženicami 
in z beločnico
Roženice in beločnico pridobivamo pri 
večorganskih odvzemih, ki potekajo po vsej 
Sloveniji ali od mrtvih darovalcev v mrtva-
šnici UKC, pri katerih se odvzame le roženi-
ca in/ali beločnica (v nadaljevanju mrtvi da-
rovalci). O možnih darovalcih nas obveščajo 
koordinatorji Slovenija-transplanta, ki glede 
na odsotnost morebitnih kontraindikacij 
darovalca označijo kot primernega za od-
vzem roženic in/ali beločnice. Koordinator 
Slovenija-transplanta tudi pridobi privolitev 
svojcev za odvzem. Starostna omejitev daro-
valcev je 1 do 75 let, tkiva pa lahko odvza-
memo do 12 ur po smrti. Ekipo za odvzem 
sestavljata zdravnik specializant oftalmolo-
gije ali specialist oftalmolog in diplomirana 
medicinska sestra ali zdravstveni tehnik. 
Zdravnik že na mestu odvzema izreže kor-
neoskleralni gumb ter ga shrani v posodici s 
shranjevalnim medijem. Roženice in beloč-
nico shranjujemo v očesni banki na Očesni 
kliniki. Roženice shranjujemo do 7 dni v hi-
potermičnem shranjevalnem mediju Opti-
sol-GS (Slika 1) ali Eusol-C pri 4 °C (±2 °C). 
Beločnico shranjujemo v 70-odstotnem 
Uvod
Na Očesni kliniki v Ljubljani že več kot 
30 let izvajamo presaditve. Ves ta čas tkiva 
sami pridobivamo in jih tudi sami shranju-
jemo. Število odvzemov tkiv in presaditev 
v zadnjih letih hitro narašča. Za uspešno 
transplantacijsko dejavnost je potrebna tako 
zadostna kot tudi kakovostna preskrba s 
tkivi ter urejen in nadzorovan dokumenta-
cijski sistem, ki omogoča sledenje tkiv ter 
beleženje in odpravo neželenih dogodkov 
in reakcij. V članku poročamo o akreditaciji 
dejavnosti preskrbe s tkivi na Očesni kliniki 
v Ljubljani in o postopkih preskrbe s tkivi. 
Ukvarjamo se s pridobivanjem treh vrst tkiv: 
roženice, beločnice in amnijske membrane. 
Dejavnost preskrbe s tkivi zajema naslednje 
postopke: odvzem tkiv, mikrobiološko testi-
ranje darovalcev, evalvacijo roženic, shranje-
vanje, dodeljevanje in uporabo (presaditev) 
tkiv.
Akreditacijski postopek
Na Očesni kliniki smo v okviru Univer-
zitetnega kliničnega centra (UKC) oktobra 
2008 zaprosili za pridobitev dovoljenja za 
nadaljevanje dejavnosti preskrbe s tkivi in 
celicami pri Javni agenciji za zdravila in me-
dicinske pripomočke (JAZMP). Za prido-
Zdrav Vestn Supl | Preskrba s tkivi na Očesni kliniki v Ljubljani I-47
IZVIrnI čLanek/OrIgInaL artIcLe
Slika 2: Spekularni 
mikroskop (HaI eyebank 
Specular Microscope 
System, HaI Laboratories, 
Inc., Lexington, Ma; 
US) za oceno endotela 
donorskih roženic.
za odvzem amnijske mebrane in vzorcev 
krvi za serološko testiranje. Z obdelavo ene 
amnijske mebrane lahko pridobimo 20–40 
presadkov, ki jih hranimo na Zavodu za 
transfuzijsko medicino (ZTM) v posebnem 
mediju na –80 °C do največ treh let.
Serološka testiranja
Da bi preprečili prenos nalezljivih bole-
zni iz darovalca na prejemnika, je potreb-
no opraviti serološke preiskave darovalčeve 
krvi. Kri odvzamemo mrtvim darovalcem 
do 24 ur po smrti. Po zakonu so obvezna 
testiranja na okužbo z virusom humane 
imunske pomanjkljivosti (HIV), z virusom 
hepatitisa B in C ter s sifilisom. Do prejetja 
rezultatov je tkivo shrajeno v t. i. karanteni.
Metode
Pregledali smo dokumentacijo očesne 
banke in zabeležili vse odvzeme in presa-
ditve roženic v obdobju dveh let in pol po 
ukrepih za pridobitev akreditacije med 1. 7. 
2009 in 31. 12. 2011. Zbrali smo podatke o 
času in kraju odvzemov, deležu večorgan-
skih odvzemov, starosti darovalcev in preje-
alkoholu, prav tako pri pri 4 °C (±2 °C), do 
največ 1 leta.
Beločnica je v primeru ustreznih sero-
loških preiskav že primerna za presaditev, 
medtem ko je roženice potrebno še pregle-
dati in oceniti, ali so primerne za presaditev 
in za katero vrsto presaditev so primerne. 
Roženice pregledamo makroskopsko, na 
špranjski svetilki ter s spekularnim mikro-
skopom (Slika 2). Makroskopsko in mikro-
skopsko ocenjujemo širino in enakomernost 
korneoskleralnega obroča, prisotnost epitel-
nih poškodb ali motnjav, transparentnost 
strome, prisotnost gerontoksona, število 
in izrazitost morebitnih stromalnih gub in 
stromalnega edema, znake endotelne dis-
trofije ali poškodb endotela. S spekularnim 
mikroskopom ocenimo še morfologijo in 
gostoto endotelnih celic, ki mora znašati vsaj 
2200 celic/mm2, da je roženica primerna za 
elektivno keratoplastiko (Slika 3, 4).
Preskrba z amnijsko membrano
Odvzem amnijske membrane poteka v 
porodnišnici po porodu s carskim rezom 1- 
do 2-krat letno. Darovalka amnijske mem-
brane pred odvzemov podpiše privolitev 
I-48 Zdrav Vestn Supl | junij 2012 | Letnik 81
IZVIrnI čLanek/OrIgInaL artIcLe
Slika 3: Slika endotela 
roženice, ki je primerna 
za presaditev (HaI 
eyebank Specular 
Microscope System, 
HaI Laboratories, Inc., 
Lexington, Ma; US).
Slika 4: cornea guttata 
– roženica ni primerna 
za presaditev: (HaI 
eyebank Specular 
Microscope System, 
HaI Laboratories, Inc., 
Lexington, Ma; US).
(54,8 %) odvzemov pa pri mrtvih daroval-
cih. Večinoma (60 %) so odvzemi potekali v 
večernih in nočnih urah med 20. uro zvečer 
in 8. uro zjutraj. Roženice smo odvzemali po 
vsej Sloveniji: v Ljubljani (121), Celju (5), Ma-
riboru (3), Murski Soboti (3), Novem mestu 
(1), na Jesenicah (1) in v Novi Gorici (1).
Povprečna starost vseh darovalcev je bila 
53,4 let (6–75 let), in sicer povprečna sta-
rost večorganskih darovalcev 48 let (6–74 
let) in mrtvih darovalcev 58 let (31–75 let). 
Povprečna starost darovalcev, katerih ro-
ženice smo tudi presadili, je znašala 50 let 
(6–75 let) in povprečna starost prejemni-
kov teh presadkov 58 let (1–88 let) (Slika 5). 
Povprečni čas od smrti darovalca do odvze-
ma roženic (DPT – angl. death to preserva-
tion time) je pri mrtvih darovalcih znašal 8,3 
ure. Pri večorganskih odvzemih so bile rože-
nice odvzete najkasneje takoj po prekinitvi 
vzdrževanja krvnega obtoka, zato je DPT v 
teh primerih enak 0 ur. Tako je povprečni 
DPT pri vseh odvzemih skupaj, pri večor-
ganskih in pri mrtvih darovalcih, znašal 4,5 
ur.
Povprečni čas hranjenja rože-
nic je bil 2,8 dni (razpon 0,5–6,5 dni). 
Povprečna gostota endotelnih celic (ECD) 
donorskih roženic je bila 2549 celic/mm2. 
Našli smo srednje močno negativno poveza-
vo med starostjo darovalca in ECD, ki je vi-
soko statistično značilna (p < 0,001; korela-
cijski koeficient r = -0,360). Z vsakim letom 
starosti darovalca je bila gostota endotelnih 
celic manjša za približno 10 celic/mm2. 
Povezave med gostoto endotelnih celic 
(ECD) in časovnim presledkom od smrti do 
odvzema (DPT) nismo zasledili (r< 0.01).
V opazovanem obdobju smo presadili 
148 (56,5 %) vseh roženic, od tega 79 % ro-
ženic večorganskih darovalcev in le 37 % 
roženic mrtvih darovalcev. Vzroki za nepri-
mernost donorskih roženic za presaditev so 
bili neprimeren endotel (19,5 % vseh rože-
nic), pozitivni rezultati seroloških testiranj 
(9,5 %), stromalne motnjave (7,2 %), obsežne 
epitelne poškodbe z izrazitim edemom stro-
me (4,2 %), izrazit gerontokson (3 %) ter dru-
go (0,8 %). Roženice mrtvih darovalcev so 
imele v primerjavi z roženicami večorgan-
skih odvzemov slabši epitel in bolj edemasto 
mnikov, času od smrti do odvzema roženic 
(DPT), času hranjenja in gostoti endotelnih 
celic (ECD). Evalvirali smo vpliv starosti da-
rovalca ter DPT na ECD. Poročamo o deležu 
presajenih roženic, o vzrokih za neprimer-
nost roženic za presaditev in o indikacijah 
za presaditev.
Rezultati
V obdobju dveh let in pol po akredita-
cijskem postopku očesne banke na Očesni 
kliniki v Ljubljani smo med 1. 7. 2009 in 31. 
12. 2011 opravili 135 odvzemov, pri katerih 
smo pridobili 262 roženic. Od tega je bilo 
61 (45,2 %) odvzemov multiorganskih, 74 
Zdrav Vestn Supl | Preskrba s tkivi na Očesni kliniki v Ljubljani I-49
IZVIrnI čLanek/OrIgInaL artIcLe
Slika 5: Prikaz povprečne 
starosti darovalcev in 
prejemnikov.
nimi nepravilnosti, epitelnimi poškodbami, 
edemom strome in gubami Descemetove 
membrane.11,12 Pri daljšem DPT je tudi težje 
evalvirati endotel, vitalnost endotelnih celic 
pa je znižana.12 Glede časa hranjenja rože-
nic po odvzemu najdemo v literaturi različ-
ne podatke o tem, ali čas hranjenja vpliva 
na propad endotelnih celic.8,13 Opažamo, 
da daljši čas hranjenja vpliva predvsem na 
stanje epitela presadka pred presaditivjo ter 
na reepitelizacijo in edem presadka po pre-
saditvi. Za potrditev teh opažanj so potrebne 
dodatne raziskave.
V naši študiji smo ugotovili manjšo go-
stoto endotelnih celic pri starejših daro-
valcih, kar ustreza naravnemu propadanju 
endotelnih celic s staranjem.14,15 Kljub pov-
prečno nižjemu številu endotelnih celic pri 
starejših darovalcih starost darovalcev z več 
ali manj kot 66 let v študiji Cornea Donor 
Study ne vpliva na 5-letno preživetje rože-
ničnega presadka.16
Delež presajenih roženic pri nas je pri-
merljiv z očesnimi bankami v srednji Evro-
pi.7,17
Zaključki
Očesna klinika Univerzitetnega klinične-
ga centra v Ljubljani je akreditirana ustano-
va za preskrbo z očesnimi tkivi. Dejavnost 
poteka po standardnih operacijskih postop-
kih z nadzorovano dokumentacijo. Preskrba 
z roženicami v naši očesni banki je v času 
po akreditacijskem postopku primerljiva z 
ostalimi očesnimi bankami članicami EEBA.
stromo z gubami Descemetove membrane, 
zato so bile redkeje primerne za presaditev.
Indikacije za presaditev so bile: kera-
tokonus (26,3 %), pooperativna bulozna 
keratopatija (24,3 %), brazgotine po kera-
titisu (12,2 %) ali po poškodbah (9,5 %), za-
motnitev presadka (9,5 %), perforirani ul-
kus (4,7 %), Fuchsova endotelna distrofija 
(4,7 %), druge distrofije roženice (4 %) ter 
stanje po kemični poškodbi oči (2 %). V teh 
dveh letih in pol nismo zabeležili nobenega 
zgodnjega propada presadka.
Razpravljanje
Očesna banka na Očesni kliniki v Lju-
bljani sodi med manjše do srednje velike 
očesne banke med članicami EEBA.7 Pri-
bližno 30 % očesnih bank EEBA za shra-
njevanje roženic uporablja hipotermični 
medij, pretežno Optisol GS ali Eusol C.7 
Povprečna starost darovalcev pri nas je 
nekoliko nižja, kot je povprečna starost 
darovalcev očesnih bank članic EEBA, ki 
uporabljajo hipotermični medij.7,8 Naši 
prejemniki so v povprečju starejši od daro-
valcev. Verjetno je to zato, ker imamo med 
darovalci velik delež večorganskih, ki so 
v povprečju mlajši od mrtvih darovalcev. 
Pri nas roženice pridobivamo z izrezom 
roženice in beločnice na mestu odvzema. 
Metoda odvzema (korneoskleralna ekscizija 
vs. enukleacija) pa po študiji Cornea Donor 
Study ne vpliva na preživetje presadka.9
Čas od smrti do odvzema (DPT) pri nas 
znaša 4,5 ur in je krajši, kot je povprečni 
DPT pri ostalih članicah EEBA (7,14 ur).7 
Daljši DPT je povezan s pogostejšimi epitel-
I-50 Zdrav Vestn Supl | junij 2012 | Letnik 81
IZVIrnI čLanek/OrIgInaL artIcLe
by the Warsaw Eye Bank from 1996 to 2002. Ann 
Transplant. 2003; 8(2): 26–31.
9. Sugar J, Montoya M, Dontchev M, Tanner JP, Beck 
R, Gal R, et al. Cornea Donor Study Group. Donor 
risk factors for graft failure in the cornea donor 
study. Cornea. 2009 Oct; 28(9): 981–5.
10. Sugar A, Gal RL, Beck W, Ruedy KJ, Blanton CL, 
Feder RS et al: Baseline donor characteristics in 
the Cornea Donor Study. Cornea, 2005; 24: 389–
396.
11. Van Meter WS, Katz DG, White H, Gayheart. Ef-
fect of death-to-preservation time on donor cor-
neal epithelium. R.Trans Am Ophthalmol Soc. 
2005; 103: 209–22
12. Cernak A, Cernak M. Is cornea suitable for tran-
splantation when death to preservation time is 
more then 14 hours? EEBA Congress. 2010 Jan 
22–23. Barcelona, Španija.
13. Terry MA, Shamie N, Straiko MD, Friend DJ, Da-
vis-Boozer D. Endothelial Keratoplasty The Rela-
tionship between Donor Tissue Storage Time and 
Donor Endothelial Survival. Ophthalmology. 2011 
Jan; 118(1): 36–40.
14. Laule A, Cable MK, Hoffman CE et al: Endothelial 
cell population changes of human cornea during 
life, Arch Ophthalmol 96: 2031–2035, 1078
15. Hashemian MN, Moghimi S, Fard MA, Fallah MR, 
Mansouri MR. Corneal endothelial cell density 
and morphology in normal Iranian eyes. BMC 
Ophthalmol. 2006 Mar 6; 6: 9.
16. Cornea Donor Study Investigator Group, Gal RL, 
Dontchev M, Beck RW, Mannis MJ, Holland EJ, 
Kollman C et al: The effect of donor age on cor-
neal transplantation outcome results of the cornea 
donor study. Ophthalmology. 2008 Apr; 115(4): 
620–626.
17. Schrage N, Reinhard T, Seitz B, Hermel M, Bö-
hringer D, Reinshagen H; The 2009 performan-
ce report of the German cornea banks. Sektion 
Gewebetransplantation und Biotechnologie der 
Deutschen Ophthalmologischen Gesellschaft. 
Ophthalmologe. 2011 Mar; 108(3): 278–80.
Literatura
1. Zakon o odvzemu in presaditvi delov človeškega 
telesa zaradi zdravljenja (ZOPDCT), Ur.l. RS, št. 
12/2000
2. Zakon o kakovosti in varnosti človeških tkiv in 
celic, namenjenih za zdravljenje (ZKVČTC), Ur.l. 
RS, št. 61/2007
3. Directive 2004/23/EC of the European parliament 
and the council of 31 March 2004 on setting stan-
dards of quality and safety for the donation, pro-
curement, testing, processing, preservation, sto-
rage and distribution of human tissues and cells 
(Dosegljivo na: http://eur-lex.europa.eu/LexUri-
Serv/LexUriServ.do?uri=OJ:L: 2004: 102: 0048: 
0058:en:PDF)
4. COMMISSION DIRECTIVE 2006/17/EC of 8 Fe-
bruary 2006 implementing Directive 2004/23/EC 
of the European Parliament and of the Council as 
regards certain technical requirements for the do-
nation, procurement and testing of human tissues 
and cells (Dosegljivo na: http://eur-lex.europa.eu/
LexUriServ/LexUriServ.do?uri=OJ:L: 2006: 038: 
0040: 0052:EN:PDF)
5. COMMISSION DIRECTIVE 2006/86/EC of 24 
October 2006 implementing Directive 2004/23/
EC of the European Parliament and of the Council 
as regards traceability requirements, notification 
of serious adverse reactions and events and certain 
technical requirements for the coding, processing, 
preservation, storage and distribution of human 
tissues and cells (Dosegljivo na: http://eur-lex.
europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do?uri=OJ:L: 
2006: 294: 0032: 0050:EN:PDF)
6. EEBA Medical Special Interest Group: D. Ponzin 
(Chair), E. Trias, G. Thuret. Agreement on Medical 
Standards. Reviewed annually. Last revision: Jan 
2008. (Dosegljivo na: www.eeba.eu)
7. European Eye Bank Association. Annual Directo-
ry, twentieth edition, January 2012 (published at 
the meeting of the EEBA in Rotterdam, Nether-
lands).
8. Grabska-Liberek I, Szaflik J, Brix-Warzecha M. 
The importance of various factors relating to the 
morphological quality of corneas used for PKP