Zaključno poročilo o rezultatih raziskovalnega projekta Oznaka poročila: ARRS_ZV_RPROJ_ZP_2008/176 ZAKLJUČNO POROČILO O REZULTATIH RAZISKOVALNEGA PROJEKTA A. PODATKI O RAZISKOVALNEM PROJEKTU 1. Osnovni podatki o raziskovalnem projektu Šifra projekta Z4-9343 Naslov projekta Razvoj postopkov produkcije in čiščenja adenovirusov Vodja projekta 22444 Barbara Lah Tip projekta Zg Podoktorski projekt za gospodarstvo Obseg raziskovalnih ur 3.400 Cenovni razred B Trajanje projekta 01.2007 - 12.2008 Nosilna raziskovalna organizacija 1655 BIA Separations d.o.o. Podjetje za separacijske tehnologije d.o.o. Raziskovalne organizacije -soizvajalke Družbenoekonomski cilj 11 Neusmerjene raziskave (temeljne) 2. Sofinancerjil 1. Naziv Naslov 2. Naziv Naslov 3. Naziv Naslov B. REZULTATI IN DOSEŽKI RAZISKOVALNEGA PROJEKTA 3. Poročilo o realizaciji programa raziskovalnega projekta2 Raziskovali, razvijali in prilagajali smo postopke proizvodnje in čiščenja adenovirusov. Zaradi preglednosti in načina vodenja smo projekt razdelili na več vsebinsko zaokroženih aktivnosti: 1. Izbor primernega adenovirusnega vektorja in permisivne celične kulture. 2. Postavitev metod gojenja in vzdrževanja celičnih kultur ter produkcija adenovirusa. 3. Postavitev metod sledenju virusu. 4. Postavitev metod sledenja nečistoč v virusnem materialu. 5. Optimizacija kromatografskih pogojev čiščenja in koncentriranja adenovirusov. Projekt Z4-9343 Stran 1 Zaključno poročilo o rezultatih raziskovalnega projekta 6. Karakterizacija izbranega CIM monolitnega kromatografskega nosilca. 7. Validacija postopkov čiščenja. Kot najprimernejši in tudi najbolj raziskan adenovirusni vektor smo izbrali humani Ad5-GFP rekombinantni vektor. Gre za adenovirusni vektor prve generacije, ki ima E1 delecijo. Pripravili smo si založne virusne raztopine, ki so omogočale stalno virusno produkcijo. Za pridobivanje adenovirusov smo izbrali celice 293AD, ki omogočajo razmnoževanje adenovirusov, saj nosijo zapis za protein E1. Razvili in prilagodili smo postopke gojenja celičnih kultur v t.i. "cell factories". Ti postopki omogočajo rast večje površine celic in pridobivanje dovolj adenovirusnega materiala za karakterizacijo in čiščenje na CIM monolitnih nosilcih. Želeli smo postaviti in optimizirati metodo kromatografskega čiščenja adenovirusov, ki daje dovolj čist material za morebitno klinično uporabo. Celice smo inficirali z Ad5-GFP virusom pri multipliciteti infekcije MOI=50, ki se je pokazala kot optimalna MOI. Po 48h do 72h infekcije smo celice poželi. Za pripravo virusnega lizata (sprostitev virusov iz celic), smo uporabili metodo večkratnega zamrzovanja in odtajevanja. V nadaljevanju smo ugotovili, da je bilo potrebno pridobljeni material encimsko obdelati (tretiranje materiala z encimom Benzonazo) preden smo lahko prešli na kromatografske metode čiščenja. Pripravljene virusni material smo shranjevali pri -80°C do nadaljnje uporabe pri kromatografskem čiščenju. Po primerjavi kromatografskih metod čiščenja adenovirusnega materiala na CIM monolitnih nosilcih z obstoječih klasičnih metodam čiščenja virusnih delcev na delčnih nosilcih in gradientu CsCl2 smo ugotovili, da s CIM monolitnimi nosilci dosegamo popolnoma primerljivo čistost biološkega materiala. Encimsko obdelan adenovirusni lizat lahko čistimo na monolitnih nosilcih pri bistveno večjih pretokih (do 10ml/min to je do 530 cm/h) kot to dovoljujejo klasične kromatografske metode (do 300 cm/h). Hkrati lahko tudi zaradi visoke vezavne kapacitete nosilca očistimo volumsko več materiala v bistveno krajšem času, kot bi to storili z uporabo klasičnih delčnih nosilcev. Ta lastnost nosilcev pomeni tudi veliko prednost pri prenosu postavljenih postopkov iz laboratorijskega na industrijski nivo čiščenja biomolekul. Kapaciteta CIM monolitnih nosilcev za adenoviruse je bila za razred višja kot je kapaciteta klasičnih nosilcev. Za Ad5-GFP virus smo dokazali dinamično vezavno kapacitieto velikostnega razreda E+12 pfu/ml ionsko izmenjevalnega nosilca. Za čiščenje adenovirusnih delcev smo prilagodili metodo stopenjskega gradienta z uporabo močnih anionsko izmenjevalnih CIM monolitnih nosilcev (CIM QA) in šibkejših anionsko izmenjevalnih nosilcev (CIM DEAE), ki omogočajo ločitev intaktnih adenovirusnih delcev od nečistoč kot so proteini in DNA. Vzporedno smo postavili tudi rutinske metode preverjanja čistosti biološkega materiala in določevanja infektivnih virusnih delcev z različico metode TCID50, to je s t.i. "End Point Dilution" (EPD) testom. Test plakov, ki je ena od že obstoječih metod kvantifikacije adenovirusov je zelo dolgotrajen test. Rezultati preverjanja virusne infektivnosti (določitve števila virusnih plakov, nastalih na celični kulturi, naslojeni z agarjem) se določajo po 10 dneh izvedbe testa. Zaradi tega smo vpeljali drugo metodo določitve infektivnosti virusnih delcev t.i. EPD test. Rezultate smo odčitavali 8. dan inkubacije celične kulture z virusnimi redčitvami na mikrotitrskih ploščah. Literatura navaja delno hemaglutinacijo Ad5 virusov s podganjimi eritrociti in zato smo tudi mi poskušali vpeljati in postaviti test hemaglutinacije Ad5-GFP s podganjimi eritrociti. Ta metoda bi bila bistveno hitrejša in zelo zaželjena za preverjanje adenovirusne infektivnosti. Rezultate odčitamo v nekaj urah, vendar se je po nekajkratnih testiranjih pokazalo, da bi bilo potrebno zagotavljati poleg podganjih eritrocitov tudi heterologni antiserum. Zaradi teh zahtev s postavitvijo postopka nismo nadaljevali. S postavljenimi metodami kromatografskega čiščenja na ionsko izmenjevalnih nosilcih smo pridobivali tudi do 60% izkoristke glede na izhodni material, kar kaže na to, da ne izgubljamo prevelikih količin virusa med postopkom čiščenja. Postopke čiščenja adenovirusov na ionsko izmenjevalnih nosilcih so v fazah validacije. 4. Ocena stopnje realizacije zastavljenih raziskovalnih ciljev3 Zastavljene cilje smo izpolnili. Uspešno smo postavili metode gojenja celic, produkcije Projekt Z4-9343 Stran 2 od 14 Zaključno poročilo o rezultatih raziskovalnega projekta adenovirusov na celičnih kulturah, prilagodili postopke kromatografskega čiščenje virusnih delcev ter sledenja nečistoč v virusnem materialu. Zaradi pomembnosti hitre in učinkovite metode kvantifikacije adenovirusnih delcev smo želeli postaviti še kromatografske metode določitve števila adenovirusnih delcev. To je izrednega pomena za prehod na industrijski nivo proizvodnje in čiščenja virusnih delcev, ki bi nam omogočilo določitev števila adenovirusnih delcev tako v celičnem lizatu kot tudi v čistem virusnem materialu skozi cel postopek produkcije in čiščenje biološkega materiala. Postavljanje te metode je v teku in se bo nadaljevalo. V načrtu imamo tudi postaviti metode sledenja virusnih delcev s t.i. "Nanoparticle Tracking Analysis", to je NTA analizo. S to analizo bomo določevali celokupno število virusnih delcev. Nadgradnja aparature s slednjem fluorescence, pa bo omogočila določitev deleža virusnih delcev (označenih z GFP markerjem) od ostalih nano delcev, ki se nahajo v še neočiščenem materialu. 5. Utemeljitev morebitnih sprememb programa raziskovalnega projekta4 Ni sprememb. 6. Najpomembnejši znanstveni rezultati projektne skupine5 Znanstveni rezultat 1. Naslov SLO Razvoj nove metode na metakrilatnih monolitih za čiščenje adenovirusnih vektorjev ANG New chromatographic method on methacrylate monoliths used for adenoviral vector purification Opis SLO Kromatografija, ki temelji na metakrilatnih monilitnih nosilcih se je pokazala kot zelo učinkovita metoda za čiščenje večjih količin adenovirusnih vektorjev. Gre za kromatografske nosilce, ki se odlikujejo po konvektivnem transportu molekul, velikem premeru por, veliki dostopnosti površin in visokih dinamičnih vezavnih kapacitetah za velike molekule in viruse. V tej študiji smo raziskovali lastnosti metakrilatnih monolitnih nosilcev za kromatografsko čiščenje adenovirusnih vektorjev. ANG For large scale Ad vector purification, chromatography using methacrylate monoliths has been found to be effective. Monoliths are characterized by convective mass transport, large channel diameter, high surface accessibility and high dynamic binding capacities for viruses. The aim of this study was exploring the characteristics of adenoviral vector purification using different ion exchange methacrylate monoliths. Objavljeno v Adenoviruses, Zadar, Croatia, 23 - 24 September, 2008. Adenoviruses : basic biology to gene therapy : book of abstracts. Zadar: Croatian Microbiological Society, 2008, str. 17. Predavanje na delavnici Adenoviruses: Basic biology to gene therapy. Tipologija 1.08 Objavljeni znanstveni prispevek na konferenci COBISS.SI-ID 3527544 2. Naslov SLO Razvoj hitre in učinkovite kromatografske metode, ki temelji na metakrilatnih nosilcih, za čiščenje adenovirusnih vektorjev ANG Development of a fast and a reliable chromatography method for adenovirus vectors purification using methacrylate monoliths. Opis SLO V tej raziskavi smo preverjali različne kemije nosilcev in različno pripravljene adenovirusne lizate. Najvišje izkoristke in čistost smo dosegli z uporabo močnih anionskih nosilcev. Uporaba močnih anionskih nosilcev je bila učinkovita tudi za čiščenje neobdelanega surovega lizata. Kombinacija visoke dinamične vezavne kapacitete virusnih delcev (vezava do 2 x 10^12 virusnih delcev na ml nosilca) in visoki pretoki ob nizkem padcu tlaka so izjemne lastnosti značilne za monolitne nosilce, ki omogočajo učinkovito »down stream« procesiranje čiščenja adenovirusnih vektorjev. Projekt Z4-9343 Stran 3 od 14 Zaključno poročilo o rezultatih raziskovalnega projekta ANG Different chemistries of supports and differently prepared crude adenovirus lysates were used in the experiments. It was shown that purity and recoveries were highest using strong anion exchange support. A high dynamic binding capacitiy of viral particles (reaching up to 2 x 10^12 virus particles per ml of support) combined with high flow rates at low pressure drops were further significant characteristics for these monolithic supports, providing efficient down-stream processing in adenoviral vector production. Objavljeno v MSS2008 - 3rd Monolith Summer School & Symposium, May 30-June 4, 2008 Portorož, Slovenia. Applications in biochromatography, bioconversion and solid phase synthesis : book of abstracts. Ljubljana: BIA Separations, 2008, str. 40, PO10. [COBISS.SI-ID 3480440] . Predstavitev postra na MSS2008. Tipologija 1.08 Objavljeni znanstveni prispevek na konferenci COBISS.SI-ID 3480440 3. Naslov SLO ANG Opis SLO ANG Objavljeno v Tipologija COBISS.SI-ID 4. Naslov SLO ANG Opis SLO ANG Objavljeno v Tipologija COBISS.SI-ID 5. Naslov SLO ANG Opis SLO ANG Objavljeno v Tipologija COBISS.SI-ID 7. Najpomembnejši družbeno-ekonomsko relevantni rezultati projektne skupine6 Družbeno-ekonomsko relevantni rezultat 1. Naslov SLO Monolitna poletna šola o biokromatografiji, biokonverziji in sintezi trdnih faz ANG Monolith Summer Symposium on Biochromatography, Bioconversion, and Solid Phase Synthesis Opis SLO Monolitna šola je razširila znanja iz področja monolitne tehnologije in njene uporabe. Raznolikost monolitnih nosilcev omogoča čiščenje širokega spektra biomolekul, od peptidov do virusov. Osvežili smo znanja s področja inovativnih biokromatografskih tehnik. Šola se je osredotočila na uporabo teorije monolitne kromatografije v našem vsakdanjem raziskovalnem delu in pregledu najnovejših napredkov iz tega področja. ANG Monolith school expanded upon the features of monolith technology and its applications. The versatility of this material allows the purification of a wide range of biomolecules from peptides to viruses. Led by many of the world`s leading authorities on this innovative biochromatographic technique, the uses of monoliths from R&D to Production and in laboratory testing and QC/QA was examined. The school`s focus was on applying the theory of Projekt Z4-9343 Stran 4 od 14 Zaključno poročilo o rezultatih raziskovalnega projekta monolith chromatography in our daily work and to examine the latest advances in the field. Šifra B.01 Organizator znanstvenega srečanja Objavljeno v MSS2008 - 3rd Monolith Summer School & Symposium, May 30-June 4, 2008 Portorož, Slovenia. Applications in biochromatography, bioconversion and solid phase synthesis : book of abstracts. Ljubljana: BIA Separations, 2008, Tipologija 2.30 Zbornik strokovnih ali nerecenziranih znanstvenih prispevkov na konferenci COBISS.SI-ID 3479928 2. Naslov SLO ANG Opis SLO ANG Šifra Objavljeno v Tipologija COBISS.SI-ID 3. Naslov SLO ANG Opis SLO ANG Šifra Objavljeno v Tipologija COBISS.SI-ID 4. Naslov SLO ANG Opis SLO ANG Šifra Objavljeno v Tipologija COBISS.SI-ID 5. Naslov SLO ANG Opis SLO ANG Šifra Objavljeno v Tipologija COBISS.SI-ID 8. Pomen raziskovalnih rezultatov projektne skupine7 8.1. Pomen za razvoj znanosti8 SLO Adenovirusni vektorji postajajo zaradi svojega učinkovitega vnosa v celice vedno bolj zaželjeni pri zdravljenju z gensko terapijo in zato potrebe po uporabi čistega biološkega materiala za Projekt Z4-9343 Stran 5 od 14 Zaključno poročilo o rezultatih raziskovalnega projekta namene genskega zdravljenja rastejo. Čeprav je danes na voljo mnogo različnih metod čiščenja, je v primerih, kjer je zahtevana visoka stopnja čistosti biološkega materiala, kromatografija metoda izbora. Vedno večje so tudi zahteve po nosilcih, ki so čim bolj mehansko in kemijsko obstojni ter imajo visoko kapaciteto za ciljano spojino. Prav ta lastnost in visoka selektivnost nosilca, veliko doprineseta k čistosti izbrane spojine. Zaradi težnje po vedno hitrejših procesih čiščenja bioloških molekul, se na ta način poveča tudi produktivnost, kar je izrednega pomena za področje biofarmacevtike. Monolitni nosilci predstavljajo posebno obliko kromatografskih nosilcev, kjer transport molekul temelji na konvekciji. Pri klasičnih delčnih nosilcih temelji transport na difuziji, ki je neprimerno počasnejša, kot je konvekcija. Zaradi omenjenih lastnosti imajo monolitni nosilci velik potencial pri preparativnem kromatografskem čiščenju bioloških makromolekul kot so virusi (adenovirusi, virusi influence, ipd.), proteini in DNA. Monolitni nosilci predstavljajo močno alternativo obstoječim postopkom čiščenja, ki temeljijo na klasičnih delčnih nosilcih. Postavljeni postopki kromatografskega čiščenja adenovirusnih delcev, ki temeljijo na ionsko izmenjevalnih CIM monolitnih nosilcih, predstavljajo pomembno prednost pri možnem prehodu iz laboratorijskega na industrijski nivo čiščenja adenovirusov. Visoki pretoki in visoke kapacitete ter ohranjena biološka aktivnost očiščenih biomoleku so lastnosti, ki odlikujejo CIM monolitne nosilce in omogočajo bistveno hitrejše postopke čiščenja biomolekul ter priprave dovolj velikih količin biološkega materiala za klinična testiranja. Razvoj postopkov kromatografskega čiščenja za adenoviruse bo mogoče prenesti tudi na nove viruse iz družine Parvovirusov, t.i. "adeno associated viruses", ki so tudi pomembni virusni kandidati pri genski terapiji. ANG_____________________________________________________________________________________________________________ Adenoviral vectors are very popular in cancer gene therapy because they easily enter human cells. For such applications high titre and high purity biological material is required. Even though there are many different methods of biological material purification available, chromatography still represents the method of choice, when the requests for high purity of biological material must be met. Nowadays, stationary phases that are mechanically and chemically stable and have high capacities for target molecules are desirable. High capacity and selectivity of stationary phases for target molecules are very important for purity of selective compound. As monolithic supports offer faster separations, consequently faster processes and higher productivity can be achieved in the field of biopharmaceutics. CIM monolithic chromatographic supports represent a new generation of chromatographic supports where fast mass transfer is based on convective flow. While dealing with particles based chromatography, capacities and separations depend on flow rate since molecules needs to diffuse into the pores. Based on convective interaction media transfer, monoliths offer flow rate independent properties like capacity, separation and yield. All these characteristics offer a great potential in preparative chromatography for large biomolecules such as viruses (i.e. adenoviruses, influenza viruses), proteins and DNA. Consequently, monoliths are becoming a real alternative to classical porous particle based chromatography. Established and optimized processes for adenoviral purification, based on CIM monolithic ion exchange chromatographic supports, are very important links for technical transfer from laboratory to industrial scale. High dynamic capacities for large molecules (i.e. viruses), high flow rates at low pressure drops and high biologic activity of purified molecules are characteristic and unique for CIM monolithic supports. The purification processes are fast and large quantities of purified biological material can be prepared for further clinical trials. We believe, established chromatographic processes of adenovirus purification could be further transferred to Parvovirus i.e. "adeno associated viruses", important gene therapy virus candidates. 8.2. Pomen za razvoj Slovenije2 SLO_____________________________________________________________________________________________________________ Zaradi porasta in razvoja zdravil, ki temeljijo na velikih biomolekulah in zaradi pomanjkanja primernih tehnologij za čiščenje le teh, predstavlja razvoj in proizvodnja monolitnih nosilcev ter postavljanje postopkov čiščenja biomolekul (npr. čiščenje virusov, proteinov, DNA) v podjetju BIA Separations, strateško pomembno tehnolologijo. V podjetju tako ustvarjamo znanje, ki je lahko prodor za nove tržne niše (npr. pogodbena raziskovanja), hkrati pa bo tehnologija omogočila večjo konkurenčnost slovenskim farmacevtskim podjetjem, ker zagotavlja večjo produktivnost proizvodnje makromolekul in s tem nižje stroške na področju priprave biogenerikov. ANG Due to current increases in development of new large molecule based pharmaceuticals and due to the lack of suitable purification technologies, the development and production of monolithic supports, along with purification methods (i.e., purification of viruses, proteins, DNA), presents Projekt Z4-9343 Stran 6 od 14 Zaključno poročilo o rezultatih raziskovalnega projekta a strategically important technology to BIA Separations. We are creating knowledge that can be used for breakthrough to new biotechnology markets (i.e. contract research). This technology will give Slovene pharmaceutical companies a competitive edge, since it assures increased productivity in macromolecules production and thus lowers costs in preparation of biogenerics. 9. Samo za aplikativne projekte! Označite, katerega od navedenih ciljev ste si zastavili pri aplikativnem projektu, katere konkretne rezultate ste dosegli in v kakšni meri so doseženi rezultati uporabljeni Cilj F.01 Pridobitev novih praktičnih znanj, informacij in veščin Zastavljen cilj " DA C NE Rezultat Dosežen Uporaba rezultatov V celoti F.02 Pridobitev novih znanstvenih spoznanj Zastavljen cilj P DA C NE Rezultat Dosežen Uporaba rezultatov V celoti F.03 Večja usposobljenost raziskovalno-razvojnega osebja Zastavljen cilj <*DA f* NE Rezultat Dosežen Uporaba rezultatov V celoti F.04 Dvig tehnološke ravni Zastavljen cilj " DA C NE Rezultat Dosežen Uporaba rezultatov V celoti F.05 Sposobnost za začetek novega tehnološkega razvoja Zastavljen cilj " DA C NE Rezultat Dosežen Uporaba rezultatov V celoti F.06 Razvoj novega izdelka Zastavljen cilj P DA C NE Rezultat Dosežen bo v naslednjih 3 letih Uporaba rezultatov F.07 Izboljšanje obstoječega izdelka Zastavljen cilj (~ DA " NE Rezultat Uporaba rezultatov F.08 Razvoj in izdelava prototipa Zastavljen cilj (~ DA <• NE Rezultat Projekt Z4-9343 Stran 7 od 14 Zaključno poročilo o rezultatih raziskovalnega projekta Uporaba rezultatov F.09 Razvoj novega tehnološkega procesa oz. tehnologije Zastavljen cilj nmlkji DA nmlkj NE Rezultat Dosežen Uporaba rezultatov Uporabljen bo v naslednjih 3 letih F.10 Izboljšanje obstoječega tehnološkega procesa oz. tehnologije Zastavljen cilj nmlkji DA nmlkj NE Rezultat Dosežen Uporaba rezultatov V celoti F.11 Razvoj nove storitve Zastavljen cilj nmlkji DA nmlkj NE Rezultat Dosežen bo v naslednjih 3 letih Uporaba rezultatov Uporabljen bo v naslednjih 3 letih F.12 Izboljšanje obstoječe storitve Zastavljen cilj nmlkji DA nmlkj NE Rezultat Dosežen Uporaba rezultatov V celoti F.13 Razvoj novih proizvodnih metod in instrumentov oz. proizvodnih procesov Zastavljen cilj nmlkji DA nmlkj NE Rezultat Dosežen Uporaba rezultatov Uporabljen bo v naslednjih 3 letih F.14 Izboljšanje obstoječih proizvodnih metod in instrumentov oz. proizvodnih procesov Zastavljen cilj nmlkji DA nmlkj NE Rezultat Dosežen Uporaba rezultatov V celoti F.15 Razvoj novega informacijskega sistema/podatkovnih baz Zastavljen cilj nmlkj DA nmlkji NE Rezultat Uporaba rezultatov F.16 Izboljšanje obstoječega informacijskega sistema/podatkovnih baz Zastavljen cilj nmlkj DA nmlkji NE Rezultat Uporaba rezultatov F.17 Prenos obstoječih tehnologij, znanj, metod in postopkov v prakso Zastavljen cilj nmlkji DA nmlkj NE Rezultat Dosežen Projekt Z4-9343 Stran 8 od 14 Zaključno poročilo o rezultatih raziskovalnega projekta Uporaba rezultatov V celoti F.18 Posredovanje novih znanj neposrednim uporabnikom (seminarji, forumi, konference) Zastavljen cilj nmlkji DA nmlkj NE Rezultat Dosežen Uporaba rezultatov V celoti F.19 Znanje, ki vodi k ustanovitvi novega podjetja ("spin off") Zastavljen cilj nmlkj DA nmlkji NE Rezultat Uporaba rezultatov F.20 Ustanovitev novega podjetja ("spin off") Zastavljen cilj nmlkj DA nmlkji NE Rezultat Uporaba rezultatov F.21 Razvoj novih zdravstvenih/diagnostičnih metod/postopkov Zastavljen cilj nmlkj DA nmlkji NE Rezultat Uporaba rezultatov F.22 Izboljšanje obstoječih zdravstvenih/diagnostičnih metod/postopkov Zastavljen cilj nmlkj DA nmlkji NE Rezultat Uporaba rezultatov F.23 Razvoj novih sistemskih, normativnih, programskih in metodoloških rešitev Zastavljen cilj nmlkj DA nmlkji NE Rezultat Uporaba rezultatov F.24 Izboljšanje obstoječih sistemskih, normativnih, programskih in metodoloških rešitev Zastavljen cilj nmlkj DA nmlkji NE Rezultat Uporaba rezultatov F.25 Razvoj novih organizacijskih in upravljavskih rešitev Zastavljen cilj nmlkj DA nmlkji NE Rezultat Uporaba rezultatov F.26 Izboljšanje obstoječih organizacijskih in upravljavskih rešitev Zastavljen cilj nmlkj DA nmlkji NE Rezultat Projekt Z4-9343 Stran 9 od 14 Zaključno poročilo o rezultatih raziskovalnega projekta Uporaba rezultatov F.27 Prispevek k ohranjanju/varovanje naravne in kulturne dediščine Zastavljen cilj f* DA <• NE Rezultat Uporaba rezultatov F.28 Priprava/organizacija razstave Zastavljen cilj (~ DA <• NE Rezultat Uporaba rezultatov F.29 Prispevek k razvoju nacionalne kulturne identitete Zastavljen cilj f* DA " NE Rezultat Uporaba rezultatov F.30 Strokovna ocena stanja Zastavljen cilj f* DA " NE Rezultat Uporaba rezultatov F.31 Razvoj standardov Zastavljen cilj f DA <• NE Rezultat Uporaba rezultatov F.32 Mednarodni patent Zastavljen cilj (~ DA <• NE Rezultat Uporaba rezultatov F.33 Patent v Sloveniji Zastavljen cilj f* DA <• NE Rezultat Uporaba rezultatov F.34 Svetovalna dejavnost Zastavljen cilj <~ DA " NE Rezultat Uporaba rezultatov F.35 Drugo Zastavljen cilj f~ DA <• NE Rezultat Uporaba rezultatov Projekt Z4-9343 Stran 10 od 14 Zaključno poročilo o rezultatih raziskovalnega projekta Komentar / 10. Samo za aplikativne projekte! Označite potencialne vplive oziroma učinke vaših rezultatov na navedena področja Vpliv Ni vpliva Majhen vpliv Srednji vpliv Velik vpliv G.01 Razvoj visoko-šolskega izobraževanja G.01.01. Razvoj dodiplomskega izobraževanja <• r r r G.01.02. Razvoj podiplomskega izobraževanja r (S r r G.01.03. Drugo: r r r r G.02 Gospodarski razvoj G.02.01 Razširitev ponudbe novih izdelkov/storitev na trgu c r r (S G.02.02. Širitev obstoječih trgov r r r (S G.02.03. Znižanje stroškov proizvodnje r r r C G.02.04. Zmanjšanje porabe materialov in energije r r (S r G.02.05. Razširitev področja dejavnosti r r (S r G.02.06. Večja konkurenčna sposobnost r r r (S G.02.07. Večji delež izvoza r r (S r G.02.08. Povečanje dobička r r (S r G.02.09. Nova delovna mesta <• r r r G.02.10. Dvig izobrazbene strukture zaposlenih r r r (S G.02.11. Nov investicijski zagon r a r r G.02.12. Drugo: (S r r r G.03 Tehnološki razvoj G.03.01. Tehnološka razširitev/posodobitev dejavnosti r r a r G.03.02. Tehnološko prestrukturiranje dejavnosti a r r r G.03.03. Uvajanje novih tehnologij r r (S r G.03.04. Drugo: a r r r G.04 Družbeni razvoj G.04.01 Dvig kvalitete življenja a r r r G.04.02. Izboljšanje vodenja in upravljanja a r r r G.04.03. Izboljšanje delovanja administracije in javne uprave a r r r G.04.04. Razvoj socialnih dejavnosti (S r r r G.04.05. Razvoj c ivilne družbe Projekt Z4-9343 Stran 11 od 14 Zaključno poročilo o rezultatih raziskovalnega projekta a r r r G.04.06. Drugo: a r r r G.05. Ohranjanje in razvoj nacionalne naravne in kulturne dediščine in identitete (S r r r G.06. Varovanje okolja in trajnostni razvoj (S r r r G.07 Razvoj družbene infrastrukture G.07.01. Informacijsko-komunikacijska infrastruktura a r r r G.07.02. Prometna infrastruktura (S r r r G.07.03. Energetska infrastruktura a r r r G.07.04. Drugo: (S r r r G.08. Varovanje zdravja in razvoj zdravstvenega varstva a r r r G.09. Drugo: a r r r Komentar V podjetju Bia Separations ustvarjamo nova znanja, ki so lahko temelj za prodor na nove tržne niše (npr. pogodbeno raziskovanje). 11. Pomen raziskovanja za sofinancerje, navedene v 2. točki10 1. Sofinancer Vrednost sofinanciranja za celotno obdobje trajanja projekta je znašala: EUR Odstotek od utemeljenih stroškov projekta: % Najpomembnejši rezultati raziskovanja za sofinancerja Šifra 1. 2. 3. 4. 5. Komentar Ocena 2. Sofinancer Vrednost sofinanciranja za celotno obdobje trajanja projekta je znašala: EUR Odstotek od utemeljenih stroškov projekta: % Najpomembnejši rezultati raziskovanja za sofinancerja Šifra Projekt Z4-9343 Zaključno poročilo o rezultatih raziskovalnega projekta 1. 2. 3. 4. 5. Komentar Ocena 3. Sofinancer Vrednost sofinanciranja za celotno obdobje trajanja projekta je znašala: EUR Odstotek od utemeljenih stroškov projekta: % Najpomembnejši rezultati raziskovanja za sofinancerja Šifra 1. 2. 3. 4. 5. Komentar Ocena C. IZJAVE Podpisani izjavljam/o, da: • so vsi podatki, ki jih navajamo v poročilu, resnični in točni • se strinjamo z obdelavo podatkov v skladu z zakonodajo o varstvu osebnih podatkov za potrebe ocenjevanja, za objavo 6., 7. in 8. točke na spletni strani http://sicris.izum.si/ ter obdelavo teh podatkov za evidence ARRS • so vsi podatki v obrazcu v elektronski obliki identični podatkom v obrazcu v pisni obliki Podpisi: Barbara Lah in/ali podpis vodje raziskovalnega projekta zastopnik oz. pooblaščena oseba RO Kraj in datum: Ljubljani 14.4.2009 Oznaka poročila: ARRS_ZV_RPROJ_ZP_2008/176 Projekt Z4-9343 Stran 13 od 14 Zaključno poročilo o rezultatih raziskovalnega projekta 1 Samo za aplikativne projekte. Nazaj 2 Napišite kratko vsebinsko poročilo, kjer boste predstavili raziskovalno hipotezo in opis raziskovanja. Navedite ključne ugotovitve, znanstvena spoznanja ter rezultate in učinke raziskovalnega projekta. Največ 18.000 znakov vključno s presledki (približno tri strani, velikosti pisave 11). Nazaj 3 Realizacija raziskovalne hipoteze. Največ 3.000 znakov vključno s presledki (približno pol strani, velikosti pisave 11). Nazaj 4 Samo v primeru bistvenih odstopanj in sprememb od predvidenega programa raziskovalnega projekta, kot je bil zapisan v predlogu raziskovalnega projekta. Največ 3.000 znakov vključno s presledki (približno pol strani, velikosti pisave 11). Nazaj 5 Navedite največ pet najpomembnejših znanstvenih rezultatov projektne skupine, ki so nastali v času trajanja projekta v okviru raziskovalnega projekta, ki je predmet poročanja. Za vsak rezultat navedite naslov v slovenskem in angleškem jeziku (največ 150 znakov vključno s presledki), rezultat opišite (največ 600 znakov vključno s presledki) v slovenskem in angleškem jeziku, navedite, kje je objavljen (največ 500 znakov vključno s presledki), izberite ustrezno šifro tipa objave po Tipologiji dokumentov/del za vodenje bibliografij v sistemu COBISS ter napišite ustrezno COBISS.SI-ID številko bibliografske enote. Navedeni rezultati bodo objavljeni na spletni strani http://sicris.izum.si/. PRIMER (v slovenskem jeziku): Naslov: Regulacija delovanja beta-2 integrinskih receptorjev s katepsinom X; Opis: Cisteinske proteaze imajo pomembno vlogo pri nastanku in napredovanju raka. Zadnje študije kažejo njihovo povezanost s procesi celičnega signaliziranja in imunskega odziva. V tem znanstvenem članku smo prvi dokazali… (največ 600 znakov vključno s presledki) Objavljeno v: OBERMAJER, N., PREMZL, A., ZAVAŠNIK-BERGANT, T., TURK, B., KOS, J.. Carboxypeptidase cathepsin X mediates ß2 - integrin dependent adhesion of differentiated U-937 cells. Exp. Cell Res., 2006, 312, 2515-2527, JCR IF (2005): 4.148 Tipopologija: 1.01 - Izvirni znanstveni članek COBISS.SI-ID: 1920113 Nazaj 6 Navedite največ pet najpomembnejših družbeno-ekonomsko relevantnih rezultatov projektne skupine, ki so nastali v času trajanja projekta v okviru raziskovalnega projekta, ki je predmet poročanja. Za vsak rezultat navedite naslov (največ 150 znakov vključno s presledki), rezultat opišite (največ 600 znakov vključno s presledki), izberite ustrezen rezultat, ki je v Šifrantu raziskovalnih rezultatov in učinkov (Glej: http://www.arrs.gov.si/sl/gradivo/sifranti/sif-razisk-rezult.asp), navedite, kje je rezultat objavljen (največ 500 znakov vključno s presledki), izberite ustrezno šifro tipa objave po Tipologiji dokumentov/del za vodenje bibliografij v sistemu COBISS ter napišite ustrezno COBISS.SI-ID številko bibliografske enote. Navedeni rezultati bodo objavljeni na spletni strani http://sicris.izum.si/. Nazaj 7 Pomen raziskovalnih rezultatov za razvoj znanosti in za razvoj Slovenije bo objavljen na spletni strani: http://sicris.izum.si/ za posamezen projekt, ki je predmet poročanja. Nazaj 8 Največ 4.000 znakov vključno s presledki Nazaj 9 Največ 4.000 znakov vključno s presledki Nazaj 10 Rubrike izpolnite/prepišite skladno z obrazcem "Izjava sofinancerja" (http://www.arrs.gov.si/sl/progproj/rproj/gradivo/), ki ga mora izpolniti sofinancer. Podpisan obrazec "Izjava sofinancerja" pridobi in hrani nosilna raziskovalna organizacija – izvajalka projekta. Nazaj Obrazec: ARRS-ZV-RPROJ-ZP/2008 v1.00 Projekt Z4-9343 Stran 14 od 14