I. slovenski kongres elektroporacije Bled, Slovenija 17. ─ 18. februar, 2023 slovenski kongres I elektroporacije Bled, 17. –18. februar 2023 Organizirata Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko in Onkološki inštitut Ljubljana Program in knjiga povzetkov I. slovenski kongres elektroporacije Bled, Slovenija 17.−18. februar, 2023 Program in knjiga povzetkov Organizirata: UL Fakulteta za elektrotehniko in Onkološki inštitut Ljubljana Uredniki: Damijan Miklavčič, Gregor Serša in Samo Mahnič-Kalamiza BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB .DWDORåQL]DSLVRSXEOLNDFLML&,3SULSUDYLOLY1DURGQLLQ XQLYHU]LWHWQLNQMLåQLFLY/MXEOMDQL &2%,666,,' ,6%13') BBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBBB 85/KWWSVNRQJUHVHOHNWURSRUDFLMDVLZSFRQWHQW XSORDGV,6OR.RQJUHV(3B.QMLJD3RY]HWNRYSGI &RS\ULJKW�=DORåED)($OOULJKWVUHVHUYHG 5D]PQRåHYDQMHWXGLIRWRNRSLUDQMHGHODYFHORWLDOLSRGHOLK EUH]SUHGKRGQHJDGRYROMHQMD=DORåEH)(SUHSRYHGDQR =DORåQLN=DORåED)(/MXEOMDQD ,]GDMDWHOM)DNXOHWD]DHOHNWURWHKQLNR/MXEOMDQD 8UHGQLNSURIGU6DãR7RPDåLþ 1DVORYQDIRWRJUDILMD)UDQFL)HUMDQZZZVORYHQLDLQIR PHGLDWHND .UDMLQOHWRL]LGD/MXEOMDQD HOHNWURQVNDL]GDMD I slovenski kongres elektroporacije Bled, 17. –18. februar 2023 POSTERJI Arnold PREDAVANJA REGISTRACIJA Rosa Restavracija Restaurant Voda Bar Bar Recepcija PREDAVANJA Reception POSTERJI REGISTRACIJA Sonce Zrak Dvorana Vhod Conference hal Entrance Sejna soba Meeting room P R O G R A M Program predavanj Stran Osnovni mehanizmi in predklinične raziskave elektroporacije I, petek, 17. februar 2023, 9:00-10:30 Lokacija: Dvorana Sonce Sekcija: Osnovni mehanizmi in predklinične raziskave elektroporacije I 11 9:00 Biomedicinske aplikacije elektroporacije: od mehanizmov do aplikacije 11 KL-01 Gregor Serša 9:30 Osnovni mehanizmi elektroporacije membrane – kaj vemo 11 OR-01 Lea Rems, Tadej Kotnik 9:45 Koncept praga elektroporacije in modeliranje električnega polja 11 OR-02 Bor Kos 10:00 Vaskularni učinki elektroporacije in elektrokemoterapije 11 OR-03 Boštjan Markelc 10:15 Odziv celic na različne elektroporacijske pulze 12 OR-04 Tamara Polajžer, Damijan Miklavčič Osnovni mehanizmi in predklinične raziskave elektroporacije II, petek, 17. februar 2023, 11:00-12:00 Lokacija: Dvorana Sonce Sekcija: Osnovni mehanizmi in predklinične raziskave elektroporacije II 12 11:00 Radiosenzibilizacija tumorjev z elektrokemoterapijo ali genskim elektro- 12 OR-05 prenosom, in vitro in in vivo Simona Kranjc Brezar 11:15 Elektrokemoterapija kot in situ vakcinacija 12 OR-06 Katja Uršič Valentinuzzi 11:30 The role of DNA electrophoresis in gene electrotransfer 13 OR-07 Shaurya Sachdev, Damijan Miklavčič 11:45 Genski elektroprenos plazmidne DNA z zapisom za kemokin CCL5 ali 13 OR-08 CCL17 v kombinaciji z obsevanjem Tim Božič Genska transfekcija, petek, 17. februar 2023, 14:00-15:15 Lokacija: Dvorana Sonce Sekcija: Genska transfekcija 14 14:00 Genska terapija raka 14 KL-02 Maja Čemažar 14:30 Plazmidni vektorji za genski elektroprenos 14 OR-09 Urška Kamenšek 3 14:45 Sistematični pregled različnih električnih in bioloških parametrov upora- 14 OR-10 bljenih pri genski transfekciji z elektroporacijo Tjaša Potočnik, Alenka Maček Lebar, Špela Kos, Matej Reberšek, Eva Pirc, Gregor Serša, Damijan Miklavčič 15:00 Neklinično vrednotenje plazmidov za odobritev klinične študije faze I z 14 OR-11 gensko terapijo Maša Bošnjak Elektrokemoterapija v kliniki, petek, 17. februar 2023, 16:30-19:00 Lokacija: Dvorana Sonce Sekcija: Elektrokemoterapija v kliniki 15 16:30 Elektrokemoterapija tumorjev glave in vratu 15 KL-03 Aleš Grošelj 17:00 Elektrokemoterapija primarnih jetrnih tumorjev – od klasične operacije 15 OR-12 do perkutanega pristopa Mihajlo Djokić 17:15 Laparoskopska elektrokemoterapija hepatoceličnega raka 16 OR-13 Blaž Trotovšek 17:30 Perkutano zdravljenje HCC 16 OR-14 Miha Štabuc, Rok Dežman, Peter Popović 17:45 Stimulacija učinka imunoterapije z elektrokemoterapijo 16 OR-15 Barbara Perić 18:00 Načrtovanje zdravljenja tumorjev hrbtenice z elektrokemoterapijo 16 OR-16 Helena Cindrič 18:15 Elektrokemoterapija v ginekologiji 17 OR-17 Nina Kovačević, Gregor Vivod, Sebastjan Merlo 18:30 Elektrokemoterapija pri nemelanomskih tumorjih kože 17 OR-18 Črt Jamšek, Aleš Grošelj, Maša Bošnjak, Simona Kranjc Brezar, Gregor Serša Veterina in biotehnologija, sobota, 18. februar 2023, 9:00-10:45 Lokacija: Dvorana Sonce Sekcija: Veterina in biotehnologija 18 9:00 Elektrokemoterapija v veterinarski onkologiji – kaj nas učijo klinične iz- 18 KL-04 kušnje Nataša Tozon 9:30 Anestezija prašičev za aplikacijo elektroporacije 18 OR-19 Alenka Seliškar 9:45 Primerjava intratumoralne in peritumoralne aplikacije IL-12 v kombinaciji 18 OR-20 z elektrokemoterapijo za zdravljenje spontanih mastocitomov pri psih Urša Lampreht Tratar 10:00 Permeabilizacija celične membrane s pulzirajočim elektromagnetnim po- 18 OR-21 ljem Matej Kranjc, Simona Kranjc Brezar, Vitalij Novickij, Gregor Serša, Damijan Miklavčič 4 10:15 Transport snovi med in po elektroporaciji 19 OR-22 Samo Mahnič-Kalamiza, Jessica Genovese, Marko Stručić, Enrico Sidoti, Matej Kranjc, Damijan Miklavčič 10:30 Vpliv elektroporacije na protimikrobno aktivnost antibiotikov pri rezisten- 19 OR-23 tni bakteriji Saša Haberl-Meglič, Damijan Miklavčič, Dejan Slokar Srčna ablacija in druge priložnosti, sobota, 18. februar 2023, 11:15-13:00 Lokacija: Dvorana Sonce Sekcija: Srčna ablacija in druge priložnosti 20 11:15 S-HEK celice kot model vzdražnih celic za študij elektroporacije 20 OR-24 Tina Batista Napotnik, Bor Kos, Lea Rems 11:30 Na evropski trg z elektroporatorjem kot medicinskim pripomočkom 20 OR-25 Peter Kramar 11:45 Elektrokemoterapija in superselektivna kateterizacija: nov tehnološki pri- 20 OR-26 stop k zdravljenju visokopretočnih žilnih malformacij glave in vratu Aljoša Krt, Maja Čemažar, Dimitrij Lovrič, Gregor Serša, Črt Jamšek, Aleš Grošelj 12:00 Učinki elektroporacije na izražanje sistemov ionskega transporta in ozna- 20 OR-27 čevalcev celične smrti v celicah H9C2 Vid Jan, Maida Jusović, Damijan Miklavčič 12:15 Električni pulzi: mišična kontrakcija in bolečina 21 OR-28 Alenka Maček-Lebar, Aleksandra Cvetkoska, Peter Trdina, Damijan Miklavčič, Matej Reberšek 12:30 Srčna ablacija in druge priložnosti elektroporacije in sodelovanja v Slove- 21 KL-05 niji Damijan Miklavčič 5 Program poster prezentacij Stran Odmor za kavo in poster sekcija, petek, 17. februar 2023, 15:45-16:30 Lokacija: Dvorana Zrak Sekcija: Poster sekcija 25 PO-01 When and how cells die after electroporation with different electric pulses 25 B-01 Wencheng Peng, Tamara Polajžer, Chenguo Yao, Damijan Miklavčič PO-02 Sprememba električnih lastnosti ravninskih lipidnih dvoslojev kot posledi- 25 B-02 ca lipidne oksidacije Katja Balantič, Damijan Miklavčič, Peter Kramar PO-03 Učinki elektrokemoterapije na imunološko pomembne modifikacije v tu- 25 B-03 morskih celicah Urša Kešar PO-04 Molekularne lastnosti endotelijskih celic, ki določajo odziv na kalcijevo 25 B-04 elektroporacijo Iva Šantek PO-05 Elektroporacija mišje osteosarkomske celične linije K7M2 v in vitro pogo- 26 B-05 jih Saša Kupčič PO-06 Kombinirana uporaba elektroporacije in antibiotikov za povečanje inakti- 26 B-06 vacije Lactiplantibacillus plantarum Žana Lovšin, Tadej Kotnik, Anja Klančnik PO-07 Spremljanje učinkov elektroporacije s pomočjo magnetnoresonančne ele- 26 B-07 ktričnoimpedančne tomografije (MREIT) na rastlinskih tkivih različnih stopenj heterogenosti Marko Stručić, Jessica Genovese, Vitalij Novickij, Samo Mahnič-Kalamiza, Igor Serša, Damijan Miklavčič, Matej Kranjc PO-08 Numerično modeliranje temperature v PEF pretočnih komorah 27 B-08 Peter Lombergar, Samo Mahnič-Kalamiza, Damijan Miklavčič PO-09 Analiza znotrajsrčnih elektrogramov po dovedeni elektroporaciji v levem 27 B-09 prekatu delujočega prašičjega srca Jernej Štublar, Tomaž Jarm, Atul Verma, Graham Wright, Daniel C. Sigg, Damijan Miklavčič PO-10 Izražanje reporterskih genov GFP in DsRed po genskem elektroprenosu v 27 B-10 tumorskih celicah in vitro Tilen Komel PO-11 Aktivacija citosolnih senzorjev po genskem elektroprenosu plazmida z za- 27 B-11 pisom za Interlevkin-12 Ajda Medved PO-12 Uporaba kombinacije bakteriofagne vakcine in genskega elektroprenosa IL- 28 B-12 12 za zdravljenje malignega melanoma Nuša Brišar, Simona Kranjc Brezar, Andrej Cör 6 PO-13 In vivo validiran večnivojski numerični model elektroporacije skeletne mi- 28 B-13 šice Rok Šmerc, David A. Ramirez, Samo Mahnič-Kalamiza, Janja Dermol-Černe, Daniel C. Sigg, Lars M. Mattison, Paul A. Iaizzo, Damijan Miklavčič PO-14 Nivo feritina, LDH in nukleosomov v krvi pred in po zdravljenju masto- 28 B-14 citomov s kombininacijo elektrokemoterapije in genskega elektroprenosa IL-12 pri psih ter primerjava s kliničnim odgovorom Maša Vilfan PO-15 Zdravljenje ponovitve raka zunanjega spolovila z elektrokemoterapijo kot 29 B-15 alternativa pelvični eksenteraciji Gregor Vivod, Nina Kovačević, Sebastjan Merlo PO-16 Klinični odgovor na zdravljenje intransit zasevkov kožnega melanoma z 29 B-16 elektrokemoterapijo pri imunosuprimiranemu bolniku – prikaz primera Sara Milićević, Barbara Perić PO-17 Elektrokemoterapija posteriorne resekcijske površine pri raku trebušne sli- 29 B-17 navke zaradi zmanjšanja recidivov bolezni Žan Čebron PO-18 Vpliv uporabe kavitacijskega ultrazvočnega sistema za aspiracijo (CUSA) 29 B-18 na razsoj tumorskih celic po resekciji jetrnih tumorjev Benjamin Hadžialjević PO-19 Pomen analize hiperspektralnih slik nemelanomskih rakov glave in vratu 30 B-19 za zdravljenje z elektrokemoterapijo Aljoša Krt, Aleš Grošelj, Gregor Serša PO-20 Tkivni indeksi za ekstrakcijo lastnosti tkiv tumorjev glave in vratu 30 B-20 Črt Keber, Aljoša Krt, Jošt Stergar, Urban Simončič, Aleš Grošelj, Boštjan Markelc, Tadej Tomanič, Tim Božič, Simona Kranjc Brezar, Gregor Serša, Matija Milanič PO-21 Napovedna vrednost bleomicin hidrolaze za učinek zdravljenja z elektro- 30 B-21 kemoterapijo Jan Bogataj P O V Z E T K I P R E D A V A N J *** dij kažejo tudi na strukturne spremembe membran- skih proteinov in citoskeleta ter kemijske spremembe (oksidacijo) lipidov, ki prispevajo k povečani pre-Osnovni mehanizmi in pustnosti membrane. To predavanje bo predstavilo predklinične raziskave trenutno razumevanje biofizikalnih mehanizmov, na elektroporacije I katerih temelji pojav elektroporacije oz. elektroper-17. februar, 9:00 - 10:30 meabilizacije. ključne besede: celična membrana; vsiljena tran-KL-01 smembranska napetost; pore; oksidacija lipidov; Biomedicinske aplikacije elektroporacije: od membranski proteini. mehanizmov do aplikacije Gregor Serša OR-02 Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen-Koncept praga elektroporacije in modelira- talno onkologijo, Slovenia nje električnega polja Bor Kos Izpostavljenost celic ali tkiv električnemu polju Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-povzroči strukturne spremembe v celični membra- venia ni, ki omogočajo prehod molekul v in iz celice. Pod posebnimi pogoji so spremembe v membrani rever-Elektroporacija je kompleksen pojav, ki nasta- zibilne, zato temu pravimo reverzibilna elektropo-ne ob izpostavljenost celic močnemu električnemu racija, lahko pa povzročimo tudi nepovratne spre-polju. To povzroči povečanje transmembranske na- membe, ki vodijo v celično smrt kar imenujemo ire-petosti na nivoje, ki povzročijo porušitev lipidne-verzibilna elektroporacija. Elektrokemoterapija in ga dvosloja. Posledično se ob elektroporacji poveča genski elektroprenos sta se že uveljavila v onkologi- prepustnost celične membrane za ione in moleku-ji za zdravljenje različnih vrst tumorjev. Elektroke- le, za katere je sicer membrana neprepustna. Tra-moterapija z bleomicinom pa se uporablja tudi za janje povečane prevodnosti in biološki učinki, kot zdravljenje žilnih malformacij – elektrosklerotera-je na primer celična smrt, na celice pa so odvisni pija. Poleg v onkologiji, humani in veterinarski, se od jakosti in trajanja električnega polja. Predsta-biomedicinske aplikacije elektroporacije pojavljajo vil bom numerično modeliranje električnega polja v tudi v vakcinaciji, za zdravljenje različnih bolezni. tkivu z metodo končnih elementov, in njeno upora-V zadnjem času se uveljavlja elektroporacija tudi bo za načrtovanje zdravljenja in razvoj novih terapij v zdravljenju motenj srčnega ritma. Nadaljnji na-na osnovi elektroporacije. Predstavil bom metode predek k izboljšanju učinka zdravljenja in persona-upoštevanja odvisnosti praga od števila in dolžine lizaciji zdravljenja pa sloni na poznavanju bioloških pulzov. Za doseganje elektroporacije v klinično re-dejavnikov, ki določajo učinke zdravljenja. levantnih volumnih ciljnega tkiva lahko uporabimo ključne besede: elektroporacija; elektrokemote- različne pristope upoštevanja prispevkov več parov rapija; genski elektroprenos; biološki dejavniki; va- elektrod k pokritosti. Predstavil bom tudi metode skularne malformacije. za upoštevanje vpliva negotovosti v vrednosti praga elektroporacije v načrtovanju zdravljenja. OR-01 ključne besede: elektroporacija; prag elektropo-Osnovni mehanizmi elektroporacije membra- racije; numerične metode. ne – kaj vemo Lea Rems, Tadej Kotnik OR-03 Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-Vaskularni učinki elektroporacije in elektro- venia kemoterapije Boštjan Markelc Izpostavitev bioloških celic visokonapetostnim Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen-električnim pulzom povzroči začasno povečanje pre-talno onkologijo, Slovenia pustnosti celičnih membran in s tem povečanje iz-menjave snovi med celično notranjostjo in okoljem. Čeprav je glavni način delovanja elektrokemo- Membrana postane prepustnejša zaradi struktur- terapije uničenje tumorskih celic zaradi povečane nih sprememb, ki nastanejo pod vplivom vsiljene citotoksičnosti citostatikov, ima tudi različne učin-transmembranske napetosti. Raziskave, temeljujo- ke na ravni tkiva. Že sama elektroporacija povzroči če na računskih in eksperimentalnih modelih bio-vazokonstrikcijo normalnih žil, začasno zaustavitev loških membran, so v zadnjih letih močno okrepi-pretoka krvi v njih ter povečanje njihove permea-le razumevanje teh strukturnih sprememb. Poleg bilnosti za različno velike molekule, kar potrjuje, da por, ki nastanejo v lipidnih domenah, rezultati štu-je lahko elektroporacija kot metoda za lokalno do-11 stavo molekul uporabna v različne namene (dostava *** citostatikov, siRNA, plazmidna DNA itd.). Ravno tako elektroporacija in elektrokemoterapija povzro- čita zaustavitev pretoka krvi v tumorskem žilju, ki Osnovni mehanizmi in je dolgotrajnejši kot pri normalnih žilah. Odgovor predklinične raziskave tumorskih žil na elektrokemoterapijo se začne razli-elektroporacije II kovati od tistega na elektroporacijo že znotraj prve 17. februar, 11:00 - 12:00 ure po terapiji. Elektrokemoterapija ima namreč tudi žilno razdiralni učinek, ki pa je specifičen za OR-05 tumorske žile, saj tega vpliva ne zaznamo v žilah, Radiosenzibilizacija tumorjev z elektrokemo-ki obkrožajo tumor. terapijo ali genskim elektroprenosom, in vi- ključne besede: Elektroporacija; Elektrokemote- tro in in vivo rapija; žile; žilno razdiralni učinki. Simona Kranjc Brezar Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen-OR-04 talno onkologijo, Slovenia Odziv celic na različne elektroporacijske pul-Radioterapija je eden od najpogostejših načinov ze zdravljenja raka. Učinek radioterapije je mogoče Tamara Polajžer, Damijan Miklavčič izboljšati z adjuvantnimi zdravljenji. Kot adjuvan-Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-tno zdravljenje smo v naših raziskavah uporabili venia elektrokemoterapijo ali genski elektroprenos. Oba Pri različnih metodah zdravljenja z elektropora-pristopa izkoriščata elektroporacijo kot način vno-cijo uporabljamo različne dolžine/oblike pulzov. Ne sa molekul, ki sicer slabo ali pa sploh ne prehaja-glede na dolžino ali obliko izbranih pulzov pa vsi jo v celice; kemoterapevtikov (bleomicin, cisplatin) pulzi povzročijo povečano prepustnost membrane ali plazmidne DNA z zapisom za različne tarčne (reverzibilno elektroporacijo) in vsaj deloma celično molekule (IL-12, siRNA proti molekuli MCAM ali smrt (ireverzibilno elektroporacijo). Elektropora-CD105). Protitumorski učinek radiosenzibilizacije cijski pulzi lahko vplivajo na številne tarče znotraj z elektrokemoterapijo ali genskim elektroprenosom celice in aktivirajo različne signalne poti, kar lah-smo vrednotili na različnih tumorskih modelih, tako ko povzroči tudi celično smrt. Elektroporaciji tre-na in vitro nivoju kot in vivo na singenih modelih in nutno pripisujejo aktivacijo različnih celičnih smrti xenograftih. Antivaskularni in imunomodulatorni – apoptozo, nekrozo, ter novejši obliki nekroptozo učinki elektrokemoterapije ali genskega elektropre-in piroptozo, pri katerih pride do sproščanja speci-nosa so tumorske celice/tumorje radiosenzibilizirali. fičnih signalnih molekul v izvencelični prostor s či-Vsekakor pa pri protitumorskem odgovoru na zdra- mer se aktivira imunski sistem. Vprašanje pa ostaja vljenje igra veliko vlogo imunološki status oziroma ali gre pri metodah zdravljenja z elektroporacijo za tumorsko mikrookolje. univerzalen/splošen ali specifičen odziv celic, odvi-ključne besede: elektrokemoterapija; genski ele-sen od parametrov pulzov. Natančen vpliv različnih ktroprenos; radioterapija; kemoterapevtik; plazmi-parametrov pulzov na celični odziv ostaja zaenkrat dna DNA. neznan, ugotavljamo pa, da se celice odzovejo raz-lično ob uporabi pulzov različnih dolžin (ns, µs, ms) OR-06 in oblik (HFIRE). Elektrokemoterapija kot in situ vakcinacija ključne besede: različne dolžine/oblike elektro-Katja Uršič Valentinuzzi poracijskih pulzov; celična smrt; DAMP. Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimentalno onkologijo, Slovenia Poleg neposrednih citotoksičnih učinkov elektro- kemoterapija (EKT) aktivira tudi imunski protitumorski odziv. V podoktorskem projektu smo razi- skali, ali lahko z EKT spremenimo imunološko hladne tumorje v imunološko vroče tumorje oziroma izzovemo in situ vakcinacijo. Primerjali smo učinkovitost EKT z intratumoralno aplikacijo bleomici-na, cisplatina ali oksaliplatina ter vpliv na izražanje imunološko pomembnih označevalcev, vrsto celične smrti in stopnjo aktivacije imunskega odziva v treh imunološko različnih mišjih tumorskih modelih. Po-12 kazali smo, da so trije tumorski modeli različno ob-kom zato smo z GET kemokinov CCL5 ali CCL17 čutljivi na EKT in dokazali vpletenost imunskega želeli spodbuditi infiltracijo imunskih celic v mišje sistema pri odgovoru. Stopnja aktivacije imunskega tumorje CT26 in 4T1, z radioterapijo pa spodbudi-odziva je odvisna od vrste citostatika in vrste tu-ti aktivacijo imunskih celic v tumorjih. Z in vitro morskega modela. Poleg tega peritumoralni genski in in vivo testi kemotakse smo pokazali, da lahko elektroprenos plazmida z zapisom za interlevkin-12 induciramo migracijo mišjih makrofagov in naiv-lahko poveča lokalno učinkovitost EKT in spodbu- nih splenocitov, med tem ko so meritve zaostankov di tudi sistemski odgovor ali protitumorski učinek v rasti tumorjev pokazali razlike med preiskovani-na oddaljene nezdravljene tumorje. ma tumorskima modeloma v odgovoru na terapijo. ključne besede: elektrokemoterapija; genski ele-Imunogeni tumorji CT26 so odgovorili na terapijo ktroprenos; interlevkin-12; in situ vakcinacija; mišji GET kemokinov in obsevanja ne glede na uporablje-tumorski model. no plazmidno DNA, na neimunogenih tumorjih 4T1 pa smo dokazali protitumorski učinek kemokinov. OR-07 ključne besede: Kemokini; Genski elektroprenos; The role of DNA electrophoresis in gene elec-Radioterapija. trotransfer Shaurya Sachdev, Damijan Miklavčič Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slovenia Gene electrotransfer is used to deliver nucleic acids (such as DNA) to cells by applying pulsed electric field and increasing the permeability of the cell membrane. In addition, pulsed electric field also pushes the DNA towards the cathode by electrophoresis. It is generally accepted that electrophoresis plays an important role in DNA transport during gene electrotransfer. Transport of DNA to the inside of the cells can be divided into various length scales. The largest length scale involves the migration of DNA in the tissue due to electrophoresis. Further, DNA must come close to the cell membrane and establish a contact, which involves migration of DNA over a microscopic scale. Finally, the shortest length scale is of DNA moving across the nm-thick cell membrane. In this presentation, the role of electrophoresis will be elaborated across the various length scales involved in DNA transport during gene electrotransfer. ključne besede: electroporation; gene electrotransfer; electrophoresis. OR-08 Genski elektroprenos plazmidne DNA z za- pisom za kemokin CCL5 ali CCL17 v kombi- naciji z obsevanjem Tim Božič Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimentalno onkologijo, Slovenia Genski elektroprenos plazmidne DNA z zapisom za kemokine, majhne signalne proteine, ki lahko in-ducirajo migracijo imunskih celic, smo preučevali na nivoju tumorskih celic in tumorjev. Znano je, da stopnja infiltracije imunskih celic v tumorskem mikrookolju lahko vpliva na potek bolezni in kore-lira z učinkovitostjo imunoterapij pri bolnikih z ra-13 *** predstavitvi bom predstavila, kako smo se priprave lastnih plazmidov lotili na Oddelku za eksperimentalno onkologijo Onkološkega inštituta Ljubljana. Genska transfekcija ključne besede: Plazmidni vektorji; Genski ele-17. februar, 14:00 - 15:15 ktroprenos; Molekularno kloniranje ; Antibiotična rezistenca. KL-02 Genska terapija raka OR-10 Maja Čemažar Sistematični pregled različnih električnih in Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen-bioloških parametrov uporabljenih pri genski talno onkologijo, Slovenia transfekciji z elektroporacijo Genski elektroprenos (GEP) je metoda vnosa Tjaša Potočnik 1, Alenka Maček Lebar1, Špela Kos2, nukleinskih kislin (DNK, RNA oligonukleotidov ...) Matej Reberšek1, Eva Pirc1, Gregor Serša2, Damijan v celice s pomočjo aplikacije električnih pulzov. Pa- Miklavčič1 1 rametri GEP se razlikujejo glede na velikost nukle-Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-inske kisline, ki jo želimo dovesti v celice, tarčnega venia 2 tkiva, glede na nivo izražanja in trajanje izražanja Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen-transgena ter spremljajoče poškodbe tkiva. Upora-talno onkologijo, Slovenia ba GEP v terapevtske namene se v glavnem deli Nepoznavanje učinkov, ki jih imajo različni ele- na dve področji: DNK cepiva proti nalezljivim bo-ktrični in biološki parametri na gensko transfekcijo leznim in genska terapija raka z antiangiogenim ali z elektroporacijo (GET), ovira optimizacijo in ome-imunomodulatornim delovanjem. Prihodnost GEP juje njeno širšo uporabo. V sistematičnem pregle-za zdravljenje raka so predvsem v različnih kom- du člankov GET in vitro smo ugotovili, da uspe-binacijah s standardnimi lokalnimi terapijami, kot šno GET lahko izvedemo na številne različne nasta radioterapija ali elektrokemoterapija, z name- čine. Izbira elektroporatorja pogojuje izbiro elek-nom doseči sistemski učinek terapije. Poleg tega je tričnih pulzov, velik vpliv na uspešnost GET imajo veliko predkliničnega dela namenjenega optimizaci-tudi elektroporacijski medij, celična linija in lastno-ji plazmidnih DNK, razvoju novih elektrod in vresti nukleinske kisline. Za nepristransko vrednotenje dnotenju električnih parametrov, kar bo omogočilo eksperimentalnih rezultatov so pomembne ustrezne boljše načrtovanje in oblikovanje kliničnih presku-kontrole in merjenje dovedenih pulzov. Ker na GET šanj. vpliva veliko različnih električnih in bioloških para-ključne besede: Genska terapija; elektroporacija; metrov, je pomembno, da so vsi uporabljeni para-genski elektroprenos; rak. metri ustrezno poročani, kar omogoči primerjavo rezultatov in potencialno hitrejšo optimizacijo GET. OR-09 ključne besede: Genski elektroprenos; Plazmi-Plazmidni vektorji za genski elektroprenos dna DNK; parametri pulzov; Celična linija. Urška Kamenšek Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen-OR-11 talno onkologijo, Slovenia Neklinično vrednotenje plazmidov za odobri- Genetska informacija, ki jo z genskim elektro- tev klinične študije faze I z gensko terapijo prenosom vstavljamo v celice, je zapisana na plaz-Maša Bošnjak midnih vektorjih. Plazmidi so majhne krožne izven- Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen-kromosomske, dvoverižne DNA molekule, naravno talno onkologijo, Slovenia prisotne v bakterijah. Za namene genske terapi-Interlevkin 12 (IL-12) je ključni citokin vpleten je uporabljamo umetno sestavljene plazmide, tako v protitumorsko delovanje imunskih celic. Genski imenovane plazmidne vektorje. Pripravljamo jih z elektroprenos plazmida za IL-12, v tumor, se v ZDA molekularnim kloniranjem, ki vključuje nabor me- že uporablja za zdravljenje melanoma. Da bi zado-tod, pri kateri fragmente DNA vzamemo iz izvor- stili Evropskim zahtevam za klinično uporabo, smo nega organizma in jih vstavimo oz. kloniramo v v okviru projekta SmartGene.si razvili proizvodnjo izbrani plazmidni vektor. Zgradba plazmidnih vek- plazmidov brez genov za odpornost na antibiotik, ki torjev ima lahko velik vpliv na dinamiko izražanja nosita zapis za izražanje humanega IL-12 (phIL12) vnešene genetske informacije in tudi učinkovitost in in njegovega mišjega ortologa (pmIL12). Da bi po-imunogenost samega genskega prenosa. Poleg tega kazali primernost plazmidov za uporabo v klinični je pri pripravi plazmidov, ki so namenjeni klinič- študiji, smo z in vitro študijami določili biološko ak-ni uporabi, treba upoštevati tudi varnostna pripo-tivnost proteinov, ki nastajata iz plazmidov phIL12 ročila nadzornih agencij za licenciranje zdravil. V 14 in pmIL12, stopnjo izražanja transgenov in števi- *** lo kopij plazmidne DNA v celicah. Študije so bile narejene na humani celični liniji ploščatoceličnega karcinoma žrela FaDu in mišji celični liniji raka de-Elektrokemoterapija v belega črevesa CT26. Nato smo z in vivo študija- kliniki mi na mišjih tumorjih CT26 določili učinkovitost 17. februar, 16:30 - 19:00 zdravila, farmakokinetiko, toksičnost, toleranco in imunogenost plazmida pmIL12. KL-03 ključne besede: neklinično vrednotenje; interle- Elektrokemoterapija tumorjev glave in vratu ukin 12; phIL12 ; genska terapija. Aleš Grošelj Univerzitetni klinični center Ljubljana, Slovenia V področju glave in vratu je elektrokemoterapija v zadnjih letih postala eno izmed standardnih zdravljenj raka. Zaradi enostavnosti metode in do-stopnosti tumorjev se največkrat uporablja za zdravljenje nemelanomskega raka kože glave in vratu. Z njo tako uspešno zdravimo velike, multiple in ponavljajoče rake, ko so druga standardna zdra- vljenja bodisi izčrpana ali pa bi povzročila veliko funkcionalno in/ali estetstsko iznakažanost. Z elektrokemoterapijo lahko zdravimo tudi sluznične rake in globoko ležeče tumorje v področju glave in vratu, vendar je trenutno takšno zdravljenje omejeno zgolj na bolnike z napredujočo boleznijo in izčrpa-nim drugim zdravljenjem. Žilni učinki elektrokemoterapije omogočajo tudi zdravljenje žilnih malformacij, kjer je rezultat drugih zdravljenj običajno slab. Trenutni trend razvoja elektrokemoterapije kaže, da je mogoče elektrokemoterapijo uspešno kombinirati z drugimi elektroporacijskimi zdravljenji, kakršen je genski elektroprenos IL-12. ključne besede: elektrokemoterapija; rak glave in vratu; genski elektroprenos. OR-12 Elektrokemoterapija primarnih jetrnih tu- morjev – od klasične operacije do perkuta- nega pristopa Mihajlo Djokić Univerzitetni klinični center Ljubljana, Slovenia Elektrokemoterapija omogoča zdravljenje ko- žnih kot tudi globoko ležečih tumorjev. Na podlagi dobrih rezultatov zdravljenja kolorektalnih jetrnih metastaz z elektrokemoterapijo, smo zasnovali prospektivno študijo za opredelitev izvedljivosti, varnosti in učinkovitosti elektrokemoterapije pri zdravljenju hepatoceličnega carcinoma. V študijo je bilo skupno vključenih 25 bolnikov, pri vseh smo elektrokemoterapijo izvedli med klasično oziroma od- prto operacijo. Glede na relativno dobre rezulta-te zdravljenja smo z elektrokemoterapijo zdravili še dva bolnika laparoskopsko in nato dodatno še dva bolnika perkutano pod CT nadzorom. Razvoj in iz-vedba elektrokemoterapije z minimalno invazivnim 15 pristopom prinaša krajši čas hospitalizacije in hi-pomembnejših stranskih učinkov in učunkovita, saj trejšo rehabilitacijo po zdravljenju. sta bila takoj po posegu in v času sledenja ob tu-ključne besede: hepatocelični karcinom; elektro-morja avitalna. kemoterapija; bleomicin,; elektroporacija; perkuta-Perkutani ECT izgleda učinkovita minimalno ni pristop. invazivna metoda zdravljenja HCC, še zlasti pri bolnikih, ki niso primerni za opercijo in tumorjih, ki OR-13 niso primerni za perkutano ablacijo. Laparoskopska elektrokemoterapija hepato- ključne besede: hepatocelularni karcinom; elek-celičnega raka trokemoterapija; bleomicin; perkutano. Blaž Trotovšek Univerzitetni klinični center Ljubljana, Slovenia OR-15 Popolna odstranitev hepatoceličnega raka Stimulacija učinka imunoterapije z elektro- (HCC) s segmentno orientiranimi posegi in pre- kemoterapijo saditev jeter sta metodi izbora z najboljšim Barbara Perić preživetjem. Številni pacienti s HCC v cirotičnih Onkološki inštitut Ljubljana, Sektor operativnih dejav-jetrih niso primerni za tovrstno zdravljenje zaradi nosti, Slovenia slabega delovanja jeter in spremljajočih bolezni. Uvod: Zaviralci PD-1 (pembrolizumab, PLM) Elektrokemoterapija (ECT) je nova, uspešna oblika preprečijo celicam kožnega melanoma (KM) izogi-lokalnega zdravljenja HCC, ki je varna in učinko- banje bolnikovemu imunskega sistema. Kako poma-vita. Uporabnost ECT v zdravljenju HCC je bila gati tistim bolnikom, ki se na zdravljenje ne odzove-najprej dokazana pri odprtih kirurških posegih, z jo, je eden pomembnejših izzivov. Namen raziska-razvojem elektrod za perkutano uporabo, se ECT ve je bil ugotoviti, ali z elektrokemoterapijo (EKT) uveljavlja tudi kot perkutana tehnika. Prednosti lahko izboljšamo učinkovitost PLM. odprtega posega (vidni nadzor nad mestom pose- Metode: V raziskavo smo vključili podatke baz In-ga) in prednosti perkutanega pristopa (minimalna spECT in Register Raka RS o bolnikih s kožnimi invazivnost) združuje laparoskopska tehnika, še zasevki KM ( S IIIC/IV) zdravljenimi med 2016 in posebej v primerih tumorjev, ki so v stiku z 2020. Razvrstili smo jih v tri skupine zdravljenja: votlimi organi. Hkrati omogoča tudi posege na PML, (n=44), PLM-EKT (n=45) in EKT (n=41). drugih organih kadar so potrebni. Predstavljamo Regres kožnih zasevkov smo ocenili po 6 mesecih. uspešno uporabo ECT z laparoskopskim pristopom Statistično analizo smo izvedli z orodjem NCSS, kot z namenom ozdravitve pri pacientih neprimernih značilno vrednost pa upoštevali p <0.05. za druge oblike kurativnega zdravljenja. Rezultati: Objektiven odgovor kožnih zasevkov v ključne besede: hepatocelični rak; elektrokemo- PML-EKT je bil 78%, v PLM skupini pa 39% terapija; bleomicin; laparoskopija. (p<0.001). Izboljšalo se je 1-letno preživetje brez lokalne ponovitve (86% vs. 51%, p<0.001) in sis-OR-14 temskega razsoja (64% vs. 39%, p<0.034). Izbolj-Perkutano zdravljenje HCC šalo se je 1-letno celokupno preživetje; PLM-EKT Miha Štabuc, Rok Dežman, Peter Popović 88%, PLM pa 64%, p<0.006. Univerzitetni klinični center Ljubljana, Slovenia Zaključek: EKT stimulira bolnikov imunski odziv HCC je najpogostejši primarni maligni tumor je- na KM in izboljša učinkovitost PLM. ter. Pri bolnikih v zelo zgodnjem in zgodnjem sta-ključne besede: elektrokemoterapija; kožni me-diju bolezni je metoda izbora oz. možno zdravljenje lanom; zaviralci PD-1. perkutana toplotna ablacija. Včasih pa ta metoda zaradi lege tumorja ob vitalnih strukturah ni mo-OR-16 žna. V teh primerih pride v poštev elektrokemo- Načrtovanje zdravljenja tumorjev hrbtenice terapija, ki je lokalna netoplotna ablativna metoda z elektrokemoterapijo za zdravljenje tumorjev s kombinacijo kemoterapi-Helena Cindrič je in elektrod postavljenih v področje tumorja, ki Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-z aplikacijo električnih pulzov povzročijo reverzibil- venia no elektroporacijo tumorskih celic. Metoda se je že Boleče metastaze v hrbtenici so pogost zaplet izkazala kot učinkovita pri zdravljenju HCC med pri bolnikih z rakom. Elektrokemoterapija (EKT) odprto operacijo, podatkov o zdravljenju s perku-je uspešna minimalno invazivna metoda za zdravlje-tanim pristopom pa je malo. V naši ustanovi smo nje tumorjev hrbtenice. Študije poročajo o zmanj-do sedaj na perkutani način zdravili dva bolnika s šanju bolečine, zaustavitvi napredovanja bolezni ter HCC. Izkazalo se je da je metoda izvedljiva, brez ohranitvi stabilnosti kosti, brez opaženih nevrolo-16 ških poškodb in drugih stranskih učinkov. OR-18 Uspeh in varnost terapije lahko izboljšamo z upo-Elektrokemoterapija pri nemelanomskih tu- rabo računalniško podprtega načrtovanja zdravlje- morjih kože nja. Na podlagi slik CT izdelamo bolniku prilagojen Črt Jamšek 1, Aleš Grošelj1, Maša Bošnjak2, Simona model, v katerem z izračunom električnega polja v Kranjc Brezar2, Gregor Serša2 ciljnem tkivu ter optimizacijskimi postopki določi-1Univerzitetni klinični center Ljubljana, Slovenia mo optimalno postavitev elektrod in parametre te-2Onkološki inštitut, Oddelek za eksperimentalno onko-rapije, da zagotovimo popolno pokritje tumorja in logijo, Slovenia minimiziramo nevarnost poškodb hrbtenjače. Od leta 2014 smo na Kliniki za ORL in CFK Obetaven pristop k zdravljenju tumorjev hrbtenice napravili skupno 232 posegov elektrokoemoterapije z EKT je t. i. transpedikularni pristop, kjer ele-pri 185 različnih pacientih, tretirali smo skupno 543 ktrode za EKT v vretence vstavimo skozi pedikle. nodulov. Glede na histološki podtip smo tretira- Za predlagani pristop smo razvili algoritem za opti-li 272 bazalnoceličnih karcinomov, 80 ploščatocelič- mizacijo položajev elektrod in napetosti, ki močno nih karcinomov, 9 zasevkov ploščatoceličnega kar-zmanjša čas in nivo znanja potreben za izdelavo na-cinoma na vratu in 182 klinično suspektnih lezij, ki črta zdravljenja. histološko niso bile verificirane. Pri zdravljenju ko-ključne besede: elektroporacija; elektrokemote- žnih karcinomov smo uporabili bleomicin, ki smo ga rapija; onkologija; metastaze hrbtenice; optimizaci-aplicirali v polni (15.000 IE/m2 BSA) ali znižani do-ja. zi (10.000 IE/m2 BSA). Glede odgovora tumorjev na zdravljenje nismo opazili statistično pomembnih OR-17 razlik med obema skupinama, predstavili bomo tudi Elektrokemoterapija v ginekologiji rezultate dolgoročnega spremljanja. Elektrokemo- Nina Kovačević, Gregor Vivod, Sebastjan Merlo terapija je varna, učinkovita in zanesljiva metoda Onkološki Inštitut Ljubljana, Ginekološka onkologija, zdravljenja nemelanomskih kožnih tumorjev, ki jo Slovenia uporabljamo predvsem pri zdravljenju velikih, mul-Na področju ginekologije so do sedaj bile nareje-tiplih tumorjev ali pa tumorjev na rekonstrukcijsko ne in vitro ter in vivo raziskave, ki nakazujejo proti-zahtevnih mestih. tumorsko učinkovitost elektrokemoterapije pri raku ključne besede: Electrochemotherapy; Bleo- materničnega vratu, raku jajčnikov, leiomiosarko- mycin; Non-melanoma skin cancers. mu materničnega telesa ter raku zunanjega spolo- vila. Leta 2020 smo na Onkološkem inštitutu Ljubljana z elektrokemoterapijo zdravili 66-letno gospo z meta-stazo slabo diferenciranega endometrioidnega karcinoma v predelu zunanjega spolovila v paliativne namene. Dosežen je bil kompleten odgovor na zdravljenje. Na Onkološkem inštitutu Ljubljana poteka klinična raziskava o uporabi elektrokemoterapije pri lokalno napredovalih ponovitvah raka zunanjega spolo- vila. Ugotavljamo, da je elektrokemoterapija var-na in učinkovita metoda zdravljenja ponovitev raka zunanjega spolovila. Nadaljne raziskave o možnosti uporabe elektroke- moterapije v ginekologiji so smiselne pri raku materničnega vratu, saj je le-ta transvaginalno dostopen igelnim elektrodam ter pri raku jajčnikov v inope-rabilnih ali kemorezistentnih primerih. ključne besede: elektrokemoterapija; rak zunanjega spolovila; ploščlatocelični karcinom; gineko-logija. 17 *** fiziološke posebnosti prašičev v kontekstu aneste-zije, postopek pred vključitvijo v poskus, socialna interakcija s prašiči ter osnovne anestezijske tehni-Veterina in biotehnologija ke in načini prepoznavanja akutne bolečine. Z vi-18. februar, 9:00 - 10:45 dika dobrobiti živali smo stres zaradi rokovanja in medicinskih postopkov zmanjšali s predhodno so-KL-04 cializacijo živali, obogatitvijo okolja in z uporabo Elektrokemoterapija v veterinarski onkologi- periferno vstavljenih centralnih venskih katetrov za ji – kaj nas učijo klinične izkušnje večkratne odvzeme krvi. Nataša Tozon ključne besede: anestezija; prašič; elektropora-Univerza v Ljubljani, Veterinarska fakulteta, Slovenia cija; 3R princip. Naraščanje števila onkoloških pacientov, po- membnost njihovega zdravljenja in pomembnost ži- OR-20 valskih modelov za translacijsko onkologijo, nareku-Primerjava intratumoralne in peritumoralne je iskanje novih metod zdravljenja, ki med drugim aplikacije IL-12 v kombinaciji z elektrokemo-zasledujejo tudi cilje dobrobiti živali. terapijo za zdravljenje spontanih mastocito- Relativna preprostost, varnost in učinkovitost ele-mov pri psih ktrokemoterapije (EKT) v predkliničnih in redkih Urša Lampreht Tratar kliničnih raziskavah je narekovala uvedbo EKT, kot Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen-samostojnega ali adjuvantnega zdravljenja tumor- talno onkologijo, Slovenia jev pri živalih. Na osnovi spremljanja kliničnih paci-Elektrokemoterapija (EKT) v kombinaciji z gen- entov v številnih raziskavah, smo leta 2016 objavili skim elektroprenosom interlevkina 12 (IL-12 GEP) operativni postopek za uporabo EKT pri živalih, ki je bila že uporabljena v kliničnih študijah pri psih za že vključuje nekatere pomembne vključitvene kri-zdravljenje različnih vrst spontanih tumorjev. Upo-terij, kot je velikost tumorja. Operaterja usmerja rabljen način aplikacije IL-12 je bil intratumoralni tudi glede izbora parametrov elektroporacije: izbor (i.t.) ali peritumoralni (peri.t.). Zato smo zasno-in ustrezen odmerek kemoterapevtika ter čas in ob-vali klinično študijo z namenom primerjave različ- seg dovajanja električnih pulzov, vrste elektrod ter nih aplikacij plazmidne DNA. Vključili smo 77 psov preverjanja ustreznosti apliciranih električnih puls spontanimi kožnimi ali podkožnimi mastocitomi zov. (MCT), ki smo jih razdelili v tri skupine: prva je Manjkajoče odgovore na nerešena vprašanja ter bila zdravljena s kombinacijo ECT+GET peri. t. ustrezno umestitev EKT med standardne postopke (29 psov), druga s kombinacijo ECT+GET i.t. (30 zdravljenja v veterinarski onkologiji lahko ponudi le psov) in tretja samo z ECT (18 psov). Rezultati multicentrična prospektivna klinična študija. so pokazali, da je pri lokalni zajezitvi tumorja naj-Za uspešno uporabo metode zdravljenja, pa tudi za bolj učinkovita terapija z ECT + GET i.t., kot tudi strokovno spremljanje pacientov po zdravljenju je pri podaljšanem intervalu brez bolezni in preživetju nujna ustrezna usposobljenost doktorjev veterinar- brez napredovanja bolezni. Ti podatki sovpadajo z ske medicine. imuno analizo, kjer smo pri psih zdravljenimi z ECT ključne besede: elektrokemoterapija; cisplatin; + GET i.t. dokazali porast citotoksičnih limfocitov bleomicin; veterinarska medicina. T po terapiji. ključne besede: elektrokemoterapija; interlevkin OR-19 12; genski elektroprenos; mastocitom. Anestezija prašičev za aplikacijo elektropo- racije OR-21 Alenka Seliškar Permeabilizacija celične membrane s pulzira- Univerza v Ljubljani, Veterinarska fakulteta, Slovenia jočim elektromagnetnim poljem Prašič je standardna poskusna žival za preizku- Matej Kranjc 1, Simona Kranjc Brezar2, Vitalij šanje novih metod zdravljenja tumorjev jeter in tre-Novickij3, Gregor Serša2, Damijan Miklavčič1 bušne slinavke. Onkološki inštitut in Veterinarska 1Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-fakulteta v Ljubljani sta na prašičih izvedla več se-venia rij poskusov, kjer smo ugotavljali poškodbe zdravih 2Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen-tkiv in posledično varnost uporabe elektroporacije talno onkologijo, Slovenia za zdravljenje tumorjev v bližini velikih jetrnih žil 3Vilnius Gediminas Technical University, Faculty of in tkivu trebušne slinavke. V skladu s 3R principom Electronics, High Magnetic Field Institute, Lithuania smo izvedli tudi sekundarne farmakološke in aneste-Pulzirajoče elektromagnetno polje inducira po- zijske raziskave. Predstavljene bodo anatomske in 18 večano prepustnost celične membrane podobno kot OR-23 običajna elektroporacija, le da se električno polje Vpliv elektroporacije na protimikrobno ak-vzpostavi neinvazivno preko časovno spremenljive- tivnost antibiotikov pri rezistentni bakteriji ga magnetnega polja. Inducirano električno polje Saša Haberl-Meglič 1, Damijan Miklavčič1, Dejan je v primerjavi z električnim poljem, ki se vzposta-Slokar2 vi pri običajni elektroporaciji za reverzibilno elek-1Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-troporacijo membrane, nižje za več redov velikosti. venia Kljub temu so rezultati različnih študij pokazali, da 2Center odličnosti za biosenzoriko, instrumentacijo in je povečana prepustnost membrane s pulzirajočim procesno kontrolo, Center za biotehnologijo, Slovenia elektromagnetnim poljem možna tako v pogojih in Razvoj bakterijske rezistence zahteva nove me- vitro kot tudi in vivo, kjer je elektromagnetno po-tode inaktivacije bakterij. Ena izmed njih je lah-lje omogočilo vnos majhnih molekul v celice (npr. ko elektroporacija (EP), ki prehodno poveča prepu-cisplatin, siRNA) kot tudi večjih funkcionalnih mo-stnost membrane in transport molekul preko mem- lekul (plazmidna DNK). Neinvazivna permeabiliza- brane. cija celične membrane bi tako lahko predstavljala Namen raziskave je preučevanje vpliva EP na proti-alternativo običajni elektroporaciji in bi postopke, mikrobno aktivnost antibiotikov, na katere je bak-ki temeljijo na običajni elektroporaciji, naredila var- terija rezistentna (tetraciklin in kloramfenikol). nejše in lažje izvedljive. Dokazali smo, da EP močno poveča protimikrobno ključne besede: elektromagnetno polje; električ- aktivnost obeh antibiotikov; ta učinek je večji pri no polje; celična membrana. višjih koncentracijah antibiotikov in jakostih električnega polja. Zaznali smo višji vpliv EP na proti-OR-22 mikrobno aktivnost tetraciklina v primerjavi s klo-Transport snovi med in po elektroporaciji ramfenikolom. Sama EP ni vplivala na funkcional- Samo Mahnič-Kalamiza 1, Jessica Genovese2, Mar-nost antibiotikov, prav tako čas dodajanja antibio-ko Stručić1, Enrico Sidoti3, Matej Kranjc1, Damijan tikov (dodajanje antibiotika pred EP in do 30 min. Miklavčič1 po EP) ni imel vpliva na povečanje ali zmanjšanje 1Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-protimikrobne aktivnosti. venia Naše ugotovitve so lahko podlaga za razvoj novih 2University of Bologna, Department of Agricultural and metod za čiščenje onesnaženih voda z rezistentnimi Food Sciences, Italy bakterijami (npr. odpadne bolnišnične vode). 3Università di Genova, Italy ključne besede: elektroporacija; bakterijska Zaradi delovanja elektroporacije na celice v tki-inaktivacija; bakterijska rezistenca; antibiotik. vu pride do sprememb lastnosti tkiva vezanih na transport snovi v celice, iz celic, ter v medcelič- nem prostoru. S transportom snovi v kontekstu tkiva največkrat mislimo na difuzijo, vendar pa so med dovajanjem elektroporacijskih pulzov prisotni tudi elektrokinetični mehanizmi transporta, kakršni sta elektroforeza (elektrokinetična migracija nabitih delcev v električnem polju) in elektroosmoza (transport medija/tekočine v poroznih strukturah). Poleg tega v turgidnih tkivih porušitev selektivne pre-pustnosti membrane povzroči transport snovi za- radi razlike v pritisku med celico in zunajceličnim prostorom. V prispevku bo predstavljenih nekaj nedavno pridobljenih uvidov v transport snovi med in po elektroporaciji, pridobljenih z eksperimentalnimi študijami na rastlinskih, deloma pa tudi na živalskih tkivih (ex vivo), podana pa bo tudi primerjava med obema vrstama tkiva, in kaj se o transportu snovi med in po elektroporaciji lahko naučimo iz različ- nega odziva tkiv na elektroporacijo. ključne besede: transport snovi; elektroporacija; rastlinska tkiva; živalska tkiva. 19 *** teve so odvisne od predvidenega namena uporabe. Proizvajalec praviloma določi namen z opredelitvi-jo indikacij oz. področjem uporabe medicinskega Srčna ablacija in druge pripomočka. Izdelana tehnična dokumentacija po priložnosti prilogi II in III uredbe MDR je osnova za pričetek 18. februar, 11:15 - 13:00 planiranja kliničnega testiranja in s tem korak do končnega razvoja naprave za serijsko proizvodnjo OR-24 in certifikacijo. S-HEK celice kot model vzdražnih celic za ključne besede: MDR (EU) 2017/745 Uredba o študij elektroporacije medicinskih pripomočkih; certifikat; CE; kakovost. Tina Batista Napotnik, Bor Kos, Lea Rems Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-OR-26 venia Elektrokemoterapija in superselektivna kate- Gensko spremenjeno celično linijo humanih em- terizacija: nov tehnološki pristop k zdravlje-brionalnih ledvičnih celic, S-HEK, smo uporabili nju visokopretočnih žilnih malformacij glave kot preprost model vzdražnih celic za študij odzi-in vratu vov na električne pulze. Celice namreč vsebujejo Aljoša Krt 1, Maja Čemažar2, Dimitrij Lovrič1, Gre-le dva najosnovnejša elementa, potrebna za vzdra-gor Serša2, Črt Jamšek1, Aleš Grošelj1 žnost: dobro definirane napetostno odvisne natrije-1Univerzitetni klinični center Ljubljana, Slovenia ve in kalijeve kanalčke (NaV1.5 in Kir2.1). V štu-2Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen-diji smo uporabili tudi nevzdražne NS-HEK celice, talno onkologijo, Slovenia ki vsebujejo le NaV1.5. Z električnimi pulzi dolži-Namen: Namen raziskave je prikazati učinko- ne 100 µs smo v S-HEK celicah uspeli sprožiti en vitost zdravljenja visokopretočnih žilnih malforma-ali več akcijskih potencialov, kar smo spremljali op-cij glave in vratu s kombinacijo elektrokemoterapije tično pod fluorescenčnim mikroskopom s potencio- (EKT) in superselektivne kateterizacije. metričnim barvilom ElectroFluor630. Pri pulzih z Metode: Pri pacientu z arteriovensko malfor-višjo amplitudo (200 V/cm in več) smo v celicah macijo (AVM) spodnje ustnice smo v splošni ane- zasledili podaljšano depolarizacijo. Pri tem nismo steziji opravili superselektivno kateterizacijo. Pre-opazili vnosa propidija, zasledili pa smo dvig kalci-ko mikrokatetra smo neposredno v dovodno arterijo ja v celicah, kar nakazuje na šibko elektroporacijo. AVM aplicirali 750IU bleomicina ter nato s ploščati-Zaključili smo, da so S-HEK celice primeren model mi elektrodami dovedli 15 električnih pulzov preko za preučevanje vplivov elektroporacije na vzdražne celotne površine AVM. celice ter njihove ionske kanalčke. Rezultati: Redne kontrolne preglede in toaleto ključne besede: elektroporacija; vzdražne celice; področja smo opravljali 10 tednov. Dosežen je bil potenciometrično barvilo; akcijski potencial; depo-odličen odgovor, brez funkcionalnih in estetskih po-larizacija. sledic ter brez recidiva 18 mesecev po posegu. Zaključek: Sočasna uporaba EKT z bleomici- OR-25 nom in superselektivne kateterizacije je lahko učin-Na evropski trg z elektroporatorjem kot me- kovita metoda za zdravljenje visokopretočnih žilnih dicinskim pripomočkom malformacij v področju glave in vratu ter tako pred-Peter Kramar stavlja pomemben tehnološki in terapevtski napre-Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-dek pri zdravljenju le-teh. venia ključne besede: superselektivna kateterizacija; V medicini se elektroporacija uporablja pri ele-elektrokemoterapija; visokopretočne malformacije; ktrokemoterapiji, srčni ablaciji in genski terapiji. AVM; bleomicin. Elektroporacijo izvajamo z generatorjem kratkih električnih visoko napetostnih pulzov, t.i. elektro-OR-27 porator. Kadar gre za terapijo v kliničnem oko- Učinki elektroporacije na izražanje sistemov lju, mora biti skladna z zakonodajo. To področje v ionskega transporta in označevalcev celične Evropski Uniji ureja uredba MDR (EU) 2017/745. smrti v celicah H9C2 Proizvajalec mora zagotoviti vse procese v podjeVid Jan, Maida Jusović, Damijan Miklavčič tju v skladu s sistemom vodenja kakovosti. Pri Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-načrtovanju elektroporatorja je potrebno zadostiti venia splošnim zahtevam glede varnosti in učinkovitosti, Ablacija s pulzirajočim električnim poljem ki med drugim vsebujejo zahteve za električno var- (PFA) je obetavna nova metoda zdravljenja atrij-nost, uporabnost ter druga področja tveganj. Zah-20 ske fibrilacije (AF), pri kateri se ablacija pljučnih KL-05 ven izvaja z (ireverzibilno) elektroporacijo (EP), ki Srčna ablacija in druge priložnosti elektropo-prepreči neželeno širjenje električnih signalov. racije in sodelovanja v Sloveniji EP povzroči uhajanje ATP skozi permeabilizirano Damijan Miklavčič membrano. ATP je potreben tako za celjenje celič- Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-ne membrane kot za delovanje ionskih črpalk, kot venia sta Ca2+-ATPaza sarko/endoplazemskega retiku-Slovenija se na svetovnem zemljevidu elektro- luma ali Na+,K+-ATPaza, ki igrata ključno vlogo poracije uvršča med velesile. Elektrokemoterapija, pri vzdrževanju kontinuirnih kontrakcij srčne miši-genska transfekcija v terapiji raka in katetrska srč- ce. Vprašanje obstaja, ali in kako EP z različnimi na ablacija so klinične aplikacije, kjer smo orali le-pulznimi parametri vpliva na delovanje teh črpalk. dino in bistveno pripomogli k razvoju teh terapij. Poleg tega ni dobro znano, kako različni pulzni pa-Ključ do uspeha so temeljne in predklinične razi-rametri vplivajo na vrste celične smrti, ki jih pov- skave ter predvsem sodelovanje med različnimi in-zroča EP. Pri PFA za zdravljenje AF so zaželeni štitucijami in strokovnjaki. Slovenija je zaradi svo-neimunogeni tipi celične smrti, saj bi to vodilo do je majhnosti in prislovične nepremičnosti populaci-hitrejšega celjenja srčnega tkiva po EP. V naši štu-je idealna za manjše klinične študije in dolgotraj-diji smo na celicah H9C2 proučili vplive EP na izra-no sledenje bolnikov ter spremljanje učinkovitosti žanje ionskih črpalk in označevalcev celične smrti. zdravljenja. Je seveda tudi dovolj velika za sodelo-ključne besede: ablacija s pulzirajočim električ- vanje na drugih področjih – tako raziskovalno, kot nim poljem; atrijska fibrilacija; Na+,K+-ATPaza; tudi pri razvoju izdelkov in postopkov. Zdi pa se, Ca2+-ATPaza sarko/endoplazemskega retikuluma; da tu zamujamo priložnosti. Prve raziskave na kri-označevalci celične smrti. oprezervaciji matičnih celic z elektroporacijo, ekstrakcijo dragocenih snovi iz mikroorganizmov so – OR-28 čeprav s spodbudnimi rezultati – zastale. Aplikaci-Električni pulzi: mišična kontrakcija in bole-je iz živilske industrije, sicer uveljavljene po Evro- čina pi, v našem prostoru (še) ne obstajajo. Povezava Alenka Maček-Lebar 1, Aleksandra Cvetkoska1, Pe-raziskovalnih skupin s podjetji (zaenkrat) ni rodila ter Trdina2, Damijan Miklavčič1, Matej Reberšek1 prodajnih uspešnic. Lahko to spremenimo? 1Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-ključne besede: elektroporacija; srčna katetrska venia ablacija; genska terapija; elektrokemoterapija; so-2Univerzitetni klinični center Ljubljana, Slovenia delovanje. Terapije, ki temeljijo na elektroporaciji, spre- mljajo kontrakcije mišic v bližini mesta terapije in bolečina. Električni pulzi, ki so vzrok za uspešno elektroporacijo tretiranih celic, namreč povzročijo tudi vzdraženje živčnih in mišičnih celic; daljši so električni pulzi, nižja napetost na elektrodah povzroči vzdraženje. Zato je bila za zmanjšanje nevro-mišične električne stimulacije med terapijami, ki temeljijo na elektroporaciji, predlagana uporaba bifa-znih visokofrekvenčnih električnih pulzov trajajočih nekaj mikrosekund. V študiji smo pokazali, da bifa-zni visokofrekvenčni električni pulzi zmanjšajo mi- šično kontrakcijo in občutek bolečine v primerjavi z daljšimi sto in več mikrosekund trajajočimi monofa-znimi električnimi pulzi. Poleg dolžine pulzov pa na intenzivnost mišične kontrakcije in bolečine vpliva tudi zakasnitev med fazama bipolarnega pulza in zakasnitev med posameznimi pulzi. ključne besede: elektroporacija; terapija; bipo-larni električni pulzi. 21 P O V Z E T K I P O S T E R P R E Z E N T A C I J *** Rezultati kažejo, da se pri oksidiranih dvoslojih po-viša kapacitivnost, kar kaže na spremembo debeline in dielektrične konstante dvosloja. Upornost se pri Poster sekcija oksidiranih dvoslojih zniža, kar kaže na povečanje 17. februar, 15:45 - 16:30 električne prevodnosti in lažje prehajanje ionov skozi dvosloj. Izmerjena Ubr za oksidirane dvosloje je PO-01 nižja kot pri neoksidiranih, kar pomeni, da so dvo-When and how cells die after electroporation sloji grajeni iz oksidiranih lipidov manj stabilni, in with different electric pulses imajo krajšo življensko dobo. Wencheng Peng 1, Tamara Polajžer1, Chenguo Yao2, ključne besede: Lipidna oksidacija; Ravninski Damijan Miklavčič1 lipidni dvosloji; Električne lastnosti ; Porušitvena 1Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-napetost. venia 2Chongqing University, School of Electrical Enginee-PO-03 ring, China Učinki elektrokemoterapije na imunološko Based on unique electroporation effects induced pomembne modifikacije v tumorskih celicah by electric pulses, biomedical applications like ECT, Urša Kešar GET and IRE are developing rapidly. In clinical Onkološki inštitut Ljubljana, Slovenia therapy, electric pulses of different durations ran-Elektrokemoterapija (EKT) povzroči različne ti- ging from nanosecond to millisecond are used for pe celične smrti, med drugim tudi imunogeno celič- different applications. However, biological effects no smrt (ICD), vendar pa so imunološki učinki EKT of these pulses have not been thoroughly studied, na splošno slabo poznani. V naši raziskavi smo oce-especially cell death. In order to reveal process and nili sproščanje s poškodbo povezanih molekulskih pattern of cell death, cells (CHO, H9c2, B16F1) vzorcev (DAMP) po EKT in vitro, ki zajemajo: (1) were exposed to five representative pulses (5 ms, kalretikulin, (2) ATP in (3) protein visoko-mobilne 100 µ s, HFIRE, 200 ns, 4 ns). The results of diffe-skupine 1 (HMGB1), ki se ob ICD sprostijo izven rent cell viability assays (MTS, PI and Clonogenic celic. Uporabili smo tri različne mišje tumorske ce-assay) are not consistent however the responses of lične linije, ki tvorijo različno imunogene tumorske cells to different pulses are comparable. According modele, in sicer celično linijo melanoma B16F10, to the experiments, we can understand when and karcinoma dojke 4T1 ter karcinoma debelega čre- how cells die after treatment with different electric vesa CT26. Tretirali smo jih z EKT s koncentra-pulses, which is important for electroporation-based cijami cisplatina (CDDP), oksaliplatina (OXA) in technologies and treatments. bleomicina (BLM) pri katerih umre 30, 50 ali 70 ključne besede: Electric Pulses; Cells Death; ?lic (IC30, IC50, IC70) in smo jih določili s testom Cell Viability Assays. klonogenosti, spremembe pa spremljali 0, 4, 24 in 48 h po EKT. Naši rezultati kažejo, da EKT pov-PO-02 zroči ICD pri vseh treh celičnih linijah, vendar ne Sprememba električnih lastnosti ravninskih pri vseh citostatikih in vseh uporabljenih koncen-lipidnih dvoslojev kot posledica lipidne oksi-tracijah. dacije ključne besede: EKT; ICD; kalretikulin; ATP; Katja Balantič, Damijan Miklavčič, Peter Kramar HMGB1. Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slovenia PO-04 Fizikalnokemijski procesi, ki potekajo na mole- Molekularne lastnosti endotelijskih celic, ki kularni ravni med elektroporacijo, so že dobro razi-določajo odziv na kalcijevo elektroporacijo skani. Manj znani pa ostajajo številni stranski pro-Iva Šantek cesi, eden izmed njih je lipidna oksidacija - verižna Onkološki Inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen-reakcija, ki povzroči oksidativno degradacijo lipidov talno onkologijo , Slovenia s čimer lahko pojasnimo dolgotrajno prepustnost Kalcijeva elektroporacija (CaEP) je nov pri- membrane po elektroporaciji. V študiji smo razvistop zdravljenja tumorjev, pri katerem se uporablja li sistem za merjenje električnih lastnostih lipidnih Ca2+ in elektroporacija (EP) kot dostavna metoda. dvoslojev grajenih iz neoksidiranih ali oksidiranih Poleg direktnega citotoksičnega učinka na tumor-lipidov. Merili smo kapacitivnost C(F) in upornoske celice, ima CaEP tudi žilno razdiralne učinke. sti R(Ω) z LCR metrom ter porušitveno napetost Mehanizem delovanja CaEP na endotelijske celice Ubr(V) in življenjski čas tbr(µs) lipidnega dvosloja (EC) trenutno še ni poznan. Namen študije je bil z izpostavitvijo linearnemu naraščajočemu signalu. 25 določiti učinek CaEP na humani EC celični liniji Naš namen je bil določiti vpliv mehanizma delova-EA.hy926 in HMEC-1 ter preučiti njihove moleku- nja antibiotika, njegove koncentracije, jakosti elek-larne lastnosti, ki določajo odziv na CaEP. Test via-tričnega polja in časa inkubacije na povečanje inak-bilnosti je pokazal manjše preživetje celic EA.hy926 tivacije Gram-pozitivne bakterije Lactiplantibacil-v primerjavi s HMEC-1 po CaEP. Ravno tako je bi- lus plantarum. V ta namen smo uporabili ampi- lo opazno večje porušenje aktinskih filamentov, mi-cilin, ki inhibira sintezo celične stene (zunajcelič- krotubulov, ter medceličnih stikov pri EA.hy926 kot na tarča), in tetraciklin, ki inhibira sintezo prote-pri HMEC-1. Celični liniji sta se tudi razlikovali v inov (znotrajcelična tarča). Po enourni inkubaci-odzivu na tretiranje z učinkovinami, ki vplivajo na ji ni bilo razlik v inaktivaciji med antibiotikoma, Ca2+ kanale. Analiza transkriptoma je pokazala ko pa smo čas inkubacije podaljšali na 24 ur, se več kot 1400 različno izraženih genov in aktivira-je stopnja inaktivacije bistveno povišal, predvsem nih poti povezanih s Ca2+ med linijama EC, kar bi pri višjih koncentracijah tetraciklina v kombinaciji lahko pojasnilo opažene razlike v njunem odzivu na z jakostjo električnega polja nad 5 kV/cm. CaEP. ključne besede: elektroporacija; antibiotiki; bak-ključne besede: kalcijeva elektroporacija; endo-terije; inaktivacija. telijske celice; analiza transkriptoma. PO-07 PO-05 Spremljanje učinkov elektroporacije s po- Elektroporacija mišje osteosarkomske celične močjo magnetnoresonančne električnoimpe- linije K7M2 v in vitro pogojih dančne tomografije (MREIT) na rastlinskih Saša Kupčič tkivih različnih stopenj heterogenosti Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen-Marko Stručić 1, Jessica Genovese2, Vitalij talno onkologijo, Slovenia Novickij3, Samo Mahnič-Kalamiza1, Igor Serša4, Damijan Miklavčič1, Matej Kranjc1 Osteosarkom je eden najpogostejših primarnih 1Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-kostnih rakov, ki prizadene predvsem otroke med venia 10 in 14 letom starosti. Zadnjih pet desetletij 2University of Bologna, Department of Agricultural and ostaja uveljavljeno primarno standardno zdravlje- Food Sciences, Italy nje amputacija z adjuvantno standardno kemotera- 3Institute of High Magnetic Fields, Vilnius Gediminas pijo. Elektrokemoterapija bi lahko bila primerna za Technical University, Lithuania zdravljenje osteosarkomov, saj že ima izkazan dober 4Inštitut Jožef Stefan, Odsek za fiziko trdne snovi, Slo-učinek na lokalizirane kožne, podkožne ter globoko venia ležeče tumorje. Poleg tega ima elektrokemoterapija tudi imunomodulatoren učinek, kar lahko pripomo-Cilj našega dela je bil raziskati možnost spre- re k sistemskemu zdravljenju bolezni. Zato bomo mljanja elektroporacije na rastlinskih tkivih različ- v okviru naših raziskav ovrednotili primerne pogo-nih stopenj heterogenosti z uporabo tehnik slika-je za elektroporacijo mišje osteosarkomsko celično nja z magnetno resonanco. Spremljali smo razpore-linijo K7M2 za nadaljne poskuse in vitro. ditev električnega polja med aplikacijo električnih ključne besede: osteosarkom; elektrokemotera- pulzov z magnetnoresonančno električnoimpedanč- pija; elektroporacija. no tomografijo (MREIT), ki se primarno uporablja za rekonstrukcijo električne prevodnosti vzorca na PO-06 podlagi izmerjene gostote električnega toka. Doda-Kombinirana uporaba elektroporacije in an- tno smo spremljali dinamiko vodnih molekul v tki-tibiotikov za povečanje inaktivacije Lacti- vih pred in po elektroporaciji z uporabo T2 kartiplantibacillus plantarum ranja. Z uporabo obeh metod smo uspešno določili Žana Lovšin 1, Tadej Kotnik1, Anja Klančnik2 spremembe v tkivih in jih primerjali z vzpostavlje-1Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-nim električnim poljem izmerjenim med elektropo- venia racijo. Primerjave so pokazale, da so rekonstrui-2Univerza v Ljubljani, Biotehniška fakulteta, Slovenia rano električno polje in porazdelitev relaksacijskih T2 časov odvisna od kompleksnosti strukture tkiv. Elektroporacija se vse pogosteje uporablja kot Izsledki raziskav potrjujejo pomembnost električne dopolnilna metoda pri inaktivaciji bakterij, tudi v in snovne heterogenosti tkiva in njunem vplivu na kombinaciji s protimikrobnimi spojinami. Večina proces porazdelitve električnega polja med elektroteh raziskav se osredotoča na snovi, ki se lahko upo-poracijo. rabljajo v prehrambni industriji, manj jih uporablja ključne besede: slikanje z magnetno resonan-klinične antibiotike, saj je takšna uporaba omejena co; magnetnoresonančna električnoimpedančna to-na čiščenje odpadnih voda iz bolnišnic. mografija; T2 kartiranje; elektroporacija; rastlinska 26 tkiva. sprejeto, da je zmanjšanje amplitude iEGM napo- vednik kvalitete (trajnosti) lezije, vendar za PFA to PO-08 še ni bilo ovrednoteno. Numerično modeliranje temperature v PEF V predklinični študiji smo PFA dovajali pri raz- pretočnih komorah ličnih dozah (1000 V – 1500 V, 1 vlak – 16 vla- Peter Lombergar, Samo Mahnič-Kalamiza, Damijan kov) ter analizirali 5-minutne signale iEGM zajete Miklavčič na mestu dovajanja PFA. IEGM smo z diskretno Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slovalčno dekompozicijo razgradili na visokofrekvenč- venia no (63 Hz – 500 Hz) ter nizkofrekvenčno (0,5 Hz Obdelava s pulzirajočim električnim poljem (an- – 8 Hz) vsebino. Pri visokofrekvenčni vsebini smo gl. PEF treatment) je obetavna tehnologija na po-ugotovili pričakovano zmanjšanje amplitude iEGM. dročju prehranske industrije, biotehnologije in oko- Nasprotno pa je bil pri nizkofrekvenčni vsebini oči-ljevarstva. Ključna komponenta sistema za PEF ten dvig amplitude iEGM. Dozna odvisnost učinka obdelavo je pretočna komora, kjer je obdelovanec je bila statistično pomembna 3,5 minute po PFA. izpostavljen električnim pulzom. Prednost PEF ob-Za PFA bo potrebno prilagoditi uveljavljeno delave je v tem, da mehanizem delovanja ni ter- vrednotenje kvalitete lezij. mične narave, s čimer naj bi se izognili morebitnim ključne besede: Znotraj srčni elektrogram; Zdra-stranskim učinkom termičnih metod. A to ni nuj- vljenje motenj srčnega ritma; Ireverzibilna ablacija. no res, saj se za PEF obdelavo pogosto uporabljajo protokoli z visoko napetostjo in visokim številom PO-10 pulzov, ki lahko povzročijo znatno gretje in dvig Izražanje reporterskih genov GFP in DsRed temperature. Zaradi elektromagnetnih motenj, ki po genskem elektroprenosu v tumorskih ce- jih povzročajo visoke jakosti električnega polja med licah in vitro PEF obdelavo, je težko natančno izmeriti tempera-Tilen Komel turo. Zato je razvoj numeričnih modelov, ki omogo-Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen- čajo izračun dviga temperature pomemben. Namen talno onkologijo, Slovenia prispevka je predstaviti validiran numerični model, Fluorescenčni reporterski geni se pogosto upo-ki modelira vsak pulz posebej, ter omogoča izračun rabljajo za preučevanje transfekcije različnih vrst prostorske porazdelitve in časovnega poteka elek-primarnih celic in celičnih linij. Spremljanje celic v tričnega polja in temperature v različnih pretočnih realnem času pokaže tudi časovne vzorce izražanja komorah. genov. Cilj naše raziskave je bil preučiti dinamiko ključne besede: elektroporacija; numerično mo-izražanja reporterskih genov GFP in DsRed posa- deliranje; pretočna komora. mično in v kombinaciji po genskem elektroprenosu plazmidov v dveh različnih celičnih linijah mišjega PO-09 raka B16F10 in CT26 in vitro. Odstotek transfeci-Analiza znotrajsrčnih elektrogramov po do- ranih celic z obema reporterskima genoma je bil ve-vedeni elektroporaciji v levem prekatu delu- čji v celični liniji B16F10 v primerjavi s celično linijo jočega prašičjega srca CT26. Prav tako se je izražanje obeh reporterskih Jernej Štublar 1, Tomaž Jarm1, Atul Verma2, Gra-genov v celični liniji B16F10 začelo prej. Sočasno ham Wright3, Daniel C. Sigg4, Damijan Miklavčič1 izražanje fluorescenčnih proteinov je bilo doseženo 1Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-le v manjšem številu celic. Študija je pokazala, da venia je transfekcija kombinacije plazmidov in njuno so-2McGill University, McGill University Health Centre, časno izražanje izvedljiva. Kljub temu so potrebne Canada dodatne študije, da bi pojasnili in razložili razlike v 3University of Toronto, Sunnybrook Research Insititu-izražanju reporterskih genov med rakavimi celični-te, Canada mi linijami. 4Medtronic Cardiac Ablation Solutions, Cardiac Abla-ključne besede: genski elektroprenos; reporterski tion Solutions, United States proteini; dinamika izražanja; odstotek transfekcije. Ablacija srčne mišice z ireverzibilnimi elektro- poracijskimi pulzi (PFA) se uveljavlja na področju PO-11 invazivnega zdravljenja motenj srčnega ritma. Med Aktivacija citosolnih senzorjev po gen- elektrofiziološko preiskavo preko velikih žil s kate-skem elektroprenosu plazmida z zapisom za tri dostopamo do notranjosti srca in opazujemo lo-Interlevkin-12 kalno električno aktivnost srčno-mišičnih celic (zno-Ajda Medved trajsrčni elektrogram - iEGM). V klinični praksi je Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimentalno onkologijo, Slovenia 27 Gensko zdravljenje je terapevtska strategija, ki stavitve na bakteriofagu; Proteinska fuzija; Genski uporablja gene kot terapevtike. Med terapijo se v elektroprenos; Interlevkin 12. celice vstavi terapevtske gene, ki jih celice prepo-PO-13 znajo kot eksogene nukleinske kisline (DNA, RNA) In vivo validiran večnivojski numerični mo-in posledično tudi kot s patogeni povezane molekul-del elektroporacije skeletne mišice ske vzorce (PAMP). Prepoznavo eksogenih nukle- Rok Šmerc 1, David A. Ramirez2, Samo Mahnič- inskih kislin omogoča aktivacija endosomskih in ci-Kalamiza1, Janja Dermol-Černe1, Daniel C. Sigg3, Lars tosolnih vzorčno prepoznavnih receptorjev (PRRs), M. Mattison3, Paul A. Iaizzo2, Damijan Miklavčič1 specifičnih za nukleinske kisline, ki se nanje vežejo. 1Univerza v Ljubljani, Fakulteta za elektrotehniko, Slo-Aktivacija PRRs povzroča specifičen imunski odziv, venia ki lahko privede do protitumorskih učinkov. Ena 2University of Minnesota, Department of Surgery, Uni-izmed genskih terapij za zdravljenje raka je genski ted States elektroprenos (GET) plazmidne DNA z zapisom za 3Medtronic, Inc., Cardiac Ablation Solutions, United citokin interlevkin-12 (IL-12). Plazmidna DNA, ki States jo vnesemo v celice z GET, bi lahko aktivirala različne citosolne senzorje, zato je bil cilj naše študije Cilj študije je bil določiti vpliv orientacije elek-ovrednotiti učinek GET plazmidne DNA z zapisom tričnega polja na obseg ireverzibilnih elektroporacij-za IL-12 na nekatere citosolne senzorje pri mišjih skih poškodb v anizotropnem mišičnem tkivu z upo-B16F10 in CT26 celičnih linijah. rabo in vivo validiranega večnivojskega numerične-ključne besede: GET; Interlevkin-12; PAMPS; ga modela. V eksperimentalnem delu smo igelne citosolni senzorji; DNA senzorji. elektrode vstavili v skeletno mišico prašičev in vivo tako, da je bila smer dovedenega električnega polja PO-12 bodisi vzporedna bodisi pravokotna na smer mišič- Uporaba kombinacije bakteriofagne vakcine nih vlaken, nato pa smo z uporabo trifenil tetrazo-in genskega elektroprenosa IL-12 za zdravlje- lijevega klorida določili obliko lezij. V numeričnem nje malignega melanoma delu smo najprej uporabili model posamezne celice Nuša Brišar 1, Simona Kranjc Brezar2, Andrej Cör3 za določitev električne prevodnosti med elektropo-1Univerza na Primorskem, Fakulteta za vede o zdravju, racijo na celični ravni, nato pa smo izračunane spre-Slovenia membe posplošili na raven tkiva. Eksperimentalne 2Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen-lezije smo primerjali z izračunanimi porazdelitva-talno onkologijo, Slovenia mi električnega polja z uporabo Sørensen-Diceovega 3Ortopedska bolnišnica Valdoltra, Raziskovalni odde-koeficienta podobnosti, s čimer smo določili irever-lek, Slovenia zibillni prag elektroporacije za uporabljene eksperimentalne pogoje. Pokazali smo, da je mišična ani-Bakteriofagi predstavljajo obetavni pristop za zotropija bistvenega pomena pri obravnavi poraz- imunoterapijo raka. S sposobnostjo samosestavlja- delitve električnega polja pri aplikacijah elektropo-nja v bakterijah in imunogenostjo predstavljajo ide-racije. alne nanonosilce za razvoj protitumorskih vakcin. ključne besede: večnivojski numerični model; Cilj raziskave je bil s tehnologijo predstavitve na anizotropija skeletne mišice; prag ireverzibilne elek-bakteriofagu pripraviti bakteriofagno vakcino za troporacije; ablacija s pulznim električnim poljem; mišji melanom. Bakteriofage M13 smo gensko mo-porazdelitev električnega polja. dificirali, da so v fuziji s svojimi plaščnimi proteini pIII oz. pVIII predstavljali tumorske peptide MA-PO-14 GE antigena. Prisotnost proteinske fuzije peptida Nivo feritina, LDH in nukleosomov v krvi smo potrdili s prenosom Western oz. z LC-MS/MS. pred in po zdravljenju mastocitomov s kom- In vitro smo dokazali, da bakteriofagi niso toksični bininacijo elektrokemoterapije in genskega za evkarionske celice. In vivo poskusi so pokaza-elektroprenosa IL-12 pri psih ter primerjava li, da je intraperitonealna aplikacija modificiranih s kliničnim odgovorom fagov varna. Protitumorsko delovanje anti-MAGE Maša Vilfan protiteles smo preverili z izpostavitvijo B16F10 se-Univerza v Ljubljani, Veterinarska fakulteta, Slovenia rumu imuniziranih miši. Z nadaljnjimi študijami bomo ocenili terapevtski Kombinacija elektrokemoterapije (EKT), kot lo-učinek bakteriofagne vakcine za zdravljenje in do-kalnega zdravljenja v kombinaciji s sistemsko tera-prinos kombinacije bakteriofagne vakcine in GEP pijo genskega elektroprenosa IL-12 (IL-12 GEP), se IL-12 k terapevtskemu potencialu. je v veterinarski onkologiji izkazala za varno in učin-ključne besede: Bakteriofagi; Tehnologija pred-kovito metodo zdravljenja različnih tumorjev pri 28 psih. V iskanju napovednih dejavnikov učinkovito- sevke vzdolž leve spodnje okončine. Opravili smo 4 sti omenjenega kombiniranega zdravljenja smo pri EKT z bleomicinom intravensko (prvič v odmerku zdravljenih psih spremljali serumske koncentracije 15.000 IU/m2, nato v zmanjšanem odmerku). EKT feritina, LDH in nukelosomov, ki so se v objavljenih je bila opravljena v 9 mesecih. Dosežen je bil CR študijah na psih izkazali kot uporabni prognostični tretiranih lezij. Pet mesecev po zadnji EKT se je dejavniki v veterinarski onkologiji. Povezava feritina novo pojavil intransit zasevek, ki smo ga izrezali. na, LDH in nukleosomov z učinkovitostjo EKT in 9 mesecev po končanem zdravljenju ni bilo znakov IL-12 GEP še ni bila raziskana, zato je namen te ponovitve. Po 1 letu je bolnica zaradi sestemskega raziskave preveriti povezavo med naštetimi napo-razsoja umrla. vednimi dejavniki pred in po zdravljenju z EKT in Zaključek: EKT je učinkovit in varen postopek pri IL-12 GEP v korelaciji s kliničnim odgovorom. imunosuprimiranih bolnikih s KM. ključne besede: Elektrokemoterapija; Genski ključne besede: Elektrokemoterapija; Kožni me-elektroprenos; Feritin; LDH; Nukleosom. lanom; Imunosupresija. PO-15 PO-17 Zdravljenje ponovitve raka zunanjega spo- Elektrokemoterapija posteriorne resekcijske lovila z elektrokemoterapijo kot alternativa površine pri raku trebušne slinavke zaradi pelvični eksenteraciji zmanjšanja recidivov bolezni Gregor Vivod, Nina Kovačević, Sebastjan Merlo Žan Čebron Onkološki inštitut Ljubljana, Slovenia Univerzitetni klinični center Ljubljana, Slovenia Pelvična eksenteracija (izpraznitev medenice) Rak trebušne slinavke sodi med malignome z pri ženskah s ponovitvijo raka zunanjega spolovi- najvišjo stopnjo smrtnosti, saj ga zaznamuje hi-la je povezana z visoko obolevnostjo in umrljivo- tro razraščanje in zgodnje zasevanje. Radikalna ki-stjo ter znatnimi stroški zdravljenja. Ker pelvična rurška resekcija predstavlja edino učinkovito meto-eksenteracija močno poslabša kakovost življenja in do zdravljenja. Uspešnost zdravljenja raka trebu-lahko vodi do resnih zapletov, so se razvile nove šne slinavke je s trenutno uveljavljenimi metodami oblike zdravljenja, kot je na primer elektrokemo- zdravljenja slaba. Povprečno 5-letno preživetje zna-terapija. Namen raziskave je bil oceniti varnost, ša do 5%, slabo pa je tudi preživetje bolnikov po učinkovitost in primernost elektrokemoterapije pri resekciji tumorja, saj znaša okrog 15%. Zasnovali zdravljenju ponovitve raka zunanjega spolovila v smo prospektivno klinično študijo za opredelitev iz-predelu perineja. Analizirali smo možne načine vedljivosti, varnosti in učinkovitosti elektrokemote-zdravljenja, izhod zdravljenja in zaplete pri bolni-rapije posteriorne resekcijske površine pri raku tre-cah s ponovitvijo ploščatoceličnega raka zunanjega bušne slinavke. Zdravljenje z elektrokemoterapijo spolovila v predelu perineja. bomo izvedli 8-28 minut po intravenski aplikaciji ključne besede: elektrokemoterapija; pelvična bleomicina (15mg/m2). Posteriorno resekcijsko po-eksenteracija; rak zunanjega spolovila; perinej. vršino bomo zdravili s postavitvijo elektrod med naslednje anatomske orientacijske točke: krn hole-PO-16 dohusa, trunkus celiakus, resekcijsko ploskvijo tre-Klinični odgovor na zdravljenje intransit za- bušne slinavke ter spodaj višina leve renalne vene. sevkov kožnega melanoma z elektrokemo- Predvidoma bomo vključili 20 bolnikov. Trenutno terapijo pri imunosuprimiranemu bolniku – poteka vključevanje bolnikov. Predstavljeni bodo prikaz primera preliminarni rezultati zdravljenja sedmih bolnikov. Sara Milićević, Barbara Perić ključne besede: rak trebušne slinavke; reverzibil-Onkološki inštitut Ljubljana, Sektor operativnih dejav-na elektroporacija; elektrokemoterapija; bleomicin; nosti, Slovenia pankreatikoduodenektomija. Uvod: Elektrokemoterapija (EKT) je uveljavlje- na metoda zdravljenja in transit zasevkov kožnega PO-18 melanoma (KM). Pričakovan je 64 % popolni od- Vpliv uporabe kavitacijskega ultrazvočnega ziv (CR) po enkratni EKT, celokupni (OR) pa 82 sistema za aspiracijo (CUSA) na razsoj tu- %. Učinek EKT pri imunosuprimiranih bolnikih ni morskih celic po resekciji jetrnih tumorjev znan. Benjamin Hadžialjević Prikaz primera: 68-letna bolnica po transplanta- Univerzitetni klinični center Ljubljana, Slovenia ciji jeter na imunosupresivnem zdravljenju je leto Maligni tumorji jeter so pomemben vzrok umr-in pol po začetem kirurškem zdravljenju KM ter ljivosti zaradi raka. Metoda izbora za zdravljenje je poskusu uvedbe tarčne terapije razvila intransit za-kirurška odstranitev tumorja v zdravo. Razsoj tu-29 morskih celic ima pomemben vpliv na čas do pono-PO-20 vitve bolezni in na preživetje bolnikov. Do sedaj ni Tkivni indeksi za ekstrakcijo lastnosti tkiv bila objavljena raziskava, ki bi neposredno prouče-tumorjev glave in vratu vala razsoj tumorskih celic po trebušni votlini med Črt Keber 1, Aljoša Krt2, Jošt Stergar3, Urban resekcijo jeter. Kavitacijski ultrazvočni kirurški sis-Simončič1, Aleš Grošelj2, Boštjan Markelc4, Tadej tem za aspiracijo (angl. CUSA) je instrument, ki s Tomanič1, Tim Božič4, Simona Kranjc Brezar4, Gregor pomočjo ultrazvočnega valovanja drobi jetrno tkivo Serša4, Matija Milanič1 1 in ga izsesa iz trebušne votline. V raziskavi bomo Univerza v Ljubljani, Fakulteta za matematiko in fizi-bolnikom, pri katerih bo opravljena resekcija jeter s ko, Slovenia 2 CUSA, odvzeli vzorce aspirata in s pomočjo citopa-Univerzitetni klinični center Ljubljana, Slovenia 3 tološkega pregleda ter pretočne citometrije določali Institut Jožef Stefan, Odsek za reaktorsko fiziko, Slo-morebitno prisotnost tumorskih celic. Z raziskavo venia 4 želimo oceniti tveganje za intraabdominalni razsoj Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen-tumorskih celic med resekcijo jeter. Aspirat CUSA talno onkologijo, Slovenia namreč odraža lokalno tumorsko okolje in bi lahko Razumevanje tumorjev in njihovega mikrookolja predstavljal odličen medij za proučevanje mehaniz-je ključno za uspešno in natančno diagnozo bolezni. mov, ki sodelujejo pri razsoju tumorskih celic. Hiperspektralno slikanje v vidnem in bližnjem in-ključne besede: tumorji jeter; kirurgija; pretočna frardečem spektralnem območju smo uporabili za citometrija; citopatologija. slikanje benignih in malignih tumorjev kože na ob-močju glave in vratu. Slike smo analizirali s peti-PO-19 mi različnimi tkivnimi indeksi (Dawsonov melanin-Pomen analize hiperspektralnih slik nemela- ski in eritema indeks, Huangov in Ishimaruov in- nomskih rakov glave in vratu za zdravljenje deks oksigenacije, ter indeks vode). Slike indeksov z elektrokemoterapijo predstavljajo porazdelitev tkivnih parametrov, ki so Aljoša Krt 1, Aleš Grošelj1, Gregor Serša2 pomembni za razumevanje fiziologije in morfologije 1Univerzitetni klinični center Ljubljana, Slovenia tumorjev. Predstavili bomo primere benignih (ne-2Onkološki inštitut Ljubljana, Oddelek za eksperimen-vus), ter malignih lezij (BCC). Iz indeksov je raz-talno onkologijo, Slovenia vidno, da je v primeru nevusov bistveno povišan Namen: Namen doktorske naloge je z novim teh- indeks melanina, v premeru BCC pa so povišani nološkim pristopom zajeti in ovrednotiti nekatere indeksi eritema, obeh oksigenacij in vode. Tkivni fiziološke značilnosti nemelanomskih kožnih rakov indeksi lahko služijo pri odkrivanju in klasifikaciji glave in vratu. Hipoteza: Fiziološke značilnosti tu-tumorjev, ter nudijo informacijo o procesih znotraj morjev ugotovljene z analizo hiperspektralnih slik tumorskega in zdravega tkiva. so napovedni dejavnik za odgovor na zdravljenje z ključne besede: Tumorji glave in vratu; Hiper-EKT. Cilji: Zajem in analiza fizioloških parame- spektralno slikanje; Tkivni indeksi. trov eksperimentalnih tumorjev in nemelanomskih tumorjev glave in vratu, analiza sprememb fiziolo-PO-21 ških parametrov eksperimentalnih tumorjev in ne- Napovedna vrednost bleomicin hidrolaze za melanomskih tumorjev glave in vratu z analizo hi-učinek zdravljenja z elektrokemoterapijo perspektralnih slik po EKT, obdelava podatkov in Jan Bogataj iskanje napovednih dejavnikov za izid zdravljenja z Univerza v Ljubljani, Biotehniška fakulteta, Slovenia EKT. Metode: Slikanje tumorjev pred in po EKT Pri zdravljenju z elektrokemoterapijo so objek- s hiperspektralno kamero, obdelava slik in ocena tivni odgovori primerljivi z drugimi ablativnimi teh-učinkovitosti EKT v povezavi z ožiljenostjo in pre-nikami, vendar pa se odgovori razlikujejo glede na krvljenostjo tumorjev. Pričakovani rezultati: Hi-histološki tip tumorjev, velikostjo tumorja ter pred-perspektralno slikanje je primerna metoda za zaje-hodna zdravljenja. Zaenkrat ne poznamo bioloških manje fizioloških značilnosti tumorja, analiza hiper-označevalcev, s katerimi bi napovedali odgovor na spektralnih slik lahko omogoča ločevanje tumorjev zdravljenje z elektrokemoterapijo. Eden izmed mo-po fizioloških lastnostih in analiza hiperspektralnih žnih mehanizmov odpornosti tumorja na terapijo je slik tumorjev po EKT sledi fiziološkim spremem-encimska inaktivacija zdravila. Bleomicin hidrolaza bam v tkivu tumorja. (BLMH) je encim, ki je v človeku kodiran na BL- ključne besede: Elektrokemoterapija; Hiper- MH genu in presnovno inaktivira glikopeptid ble- spektralno slikanje; Prekrvljenost; Ožiljenost; Rak omicin, zaenkrat pa ni poročil o vplivu BLMH na glave in vratu. izid zdravljenja z elektrokemoterapijo. Namen projekta je raziskati vrednost koncentracije BLMH kot 30 napovednega dejavnika za učinkovitost elektrokemoterapije v različnih tumorskih celicah in tumorjih. Naša hipoteza je, da višja koncentracija BLMH v tumorskih celicah in tumorjih poslabša odgovor na elektrokemoterapijo. Nivo BLMH bi lahko bil prvi biološki označevalec napovedovanja odgovorov tumorjev na elektrokemoterapijo. ključne besede: Elektrokemoterapija; bleomicin hidrolaza; biološki označevalci. 31 I N D E K S A V T O R J E V B Komel, Tilen 27, R Balantič, Katja 25, Kos, Bor 20, 11, Ramirez, David A. 28, Batista Napotnik, Tina 20, Kos, Špela 14, Reberšek, Matej 14, 21, Bogataj, Jan 30, Kotnik, Tadej 26, 11, Rems, Lea 20, 11, Bošnjak, Maša 17, 14, Kovačević, Nina 29, 17, S Božič, Tim 13, 30, Kramar, Peter 25, 20, Sachdev, Shaurya 13, Brišar, Nuša 28, Kranjc, Matej 18, 26, 19, Seliškar, Alenka 18, Kranjc Brezar, Simona 12, 17, 28, Č 18, 30, Serša, Gregor 14, 30, 18, 20, 30, Čebron, Žan 29, Krt, Aljoša 30, 20, 30, 11, 17, Čemažar, Maja 14, 20, Kupčič, Saša 26, Serša, Igor 26, C Sidoti, Enrico 19, L Cindrič, Helena 16, Sigg, Daniel C. 27, 28, Lampreht Tratar, Urša 18, Cör, Andrej 28, Simončič, Urban 30, Lombergar, Peter 27, Cvetkoska, Aleksandra 21, Slokar, Dejan 19, Lovrič, Dimitrij 20, Stergar, Jošt 30, D Lovšin, Žana 26, Stručić, Marko 19, 26, Dermol-Černe, Janja 28, M Dežman, Rok 16, Š Maček Lebar, Alenka 14, 21, Djokić, Mihajlo 15, Šantek, Iva 25, Mahnič-Kalamiza, Samo 26, 19, Šmerc, Rok 28, G 28, 27, Štabuc, Miha 16, Genovese, Jessica 19, 26, Markelc, Boštjan 30, 11, Štublar, Jernej 27, Grošelj, Aleš 30, 15, 20, 30, 17, Mattison, Lars M. 28, Medved, Ajda 27, T H Merlo, Sebastjan 17, 29, Tomanič, Tadej 30, Haberl-Meglič, Saša 19, Miklavčič, Damijan 28, 19, 13, 14, Tozon, Nataša 18, Hadžialjević, Benjamin 29, 18, 12, 26, 25, 21, 27, 27, 25, 21, Trdina, Peter 21, I 20, 19, Trotovšek, Blaž 16, Iaizzo, Paul A. 28, Milanič, Matija 30, U Milićević, Sara 29, J Uršič Valentinuzzi, Katja 12, Jamšek, Črt 17, 20, N V Jan, Vid 20, Novickij, Vitalij 26, 18, Verma, Atul 27, Jarm, Tomaž 27, P Vilfan, Maša 28, Jusović, Maida 20, Peng, Wencheng 25, Vivod, Gregor 29, 17, K Perić, Barbara 29, 16, W Kamenšek, Urška 14, Pirc, Eva 14, Wright, Graham 27, Keber, Črt 30, Polajžer, Tamara 12, 25, Kešar, Urša 25, Popović, Peter 16, Y Klančnik, Anja 26, Potočnik, Tjaša 14, Yao, Chenguo 25, 33 S P O N Z O R J I 35 S P O N Z O R J I LEADING ELECTROPORATION TECHNOLOGY www.igeamedical.com - oncology@igeamedical.com ISEBT International Society for Electroporation-Based Technologies and Treatments The mission of the International Society for Electroporation-Based Technologies and Treatments is to promote the advancement of scientific knowledge of the interactions of pulsed electric and electromagnetic fields and ionized gases with biological systems (cells, tissues, organisms, molecules and materials), with an emphasis on electroporation, and to facilitate the development of applications based on these phenomena in biology, medicine, biotechnology, and food and environmental technologies. The Society fosters collaboration and exchange of ideas and information among scientists, technology users, and other interested parties to accelerate the dissemination of new findings, and supports research, education, and training through the organization and sponsorship of congresses, conferences, workshops, and schools. We disseminate our activities through various channels. Visit our website (www.electroporation.net), subscribe to the monthly newsletter, or follow us on social media; either on Twitter: twitter.com/ElecPorationNET, or LinkedIn: www.linkedin.com/company/isebtt/. MEMBER BENEFITS ◦ Access to full papers published in Bioelectricity, the official journal of the Society. ◦ Access to the Handbook of Electroporation, the reference work on electroporation-based technologies and treatments. ◦ Discounted participation fees to ISEBTT-endorsed and sponsored events. ISEBTT Support of Schools and Workshops Part of the mission of the ISEBTT is to support Schools and Workshops that are within the scope of electroporation. Organizers of these events are asked to submit requests for support. The request should be in the form of a letter to the current President and the letter should include: - the amount of support requested; - the number of expected attendees; - the cost of registration; Who to contact? - what the cost of registration would be for ISEBTT members. See the Council page on the Society homepage to determine who to contact. The letter should also include information on the budget for the event as well as disclose other sources of revenue. The school will Visit www.electroporation.net also be advertised to members via the Newsletter and web page. CTS™ Xenon™ Electroporation System High speed and large volume Transfect up to 2.5 × 10⁹ T cells/25 mL in less than 25 minutes. Process flexibility User-programmable system enables you to create and optimize electroporation protocols for various cell types and payloads, from process development through commercial manufacturing. Efficient nonviral transfection Can be used to deliver DNA, RNA, and protein payloads. Closed-system processing CTS Xenon MultiShot Electroporation Cartridge helps enable sterile welding to PVC or C-Flex™ tubing. Neon™ Transfection System Efficient Up to 90% transfection in many cell types, including difficult-to-transfect cells, primary, and stem cells. Flexible Easily transfect from 2 × 104 cells to 6 × 106 cells per reaction. Simple Easy to use, with a single reagent kit for all cell types. Versatile Open system allows electroporation parameters to be optimized freely. www.omega.si omega@omega.si Odkrivanje subcelične dinamike življenja. Dolgoročno prostorninsko slikanje živih celic Z mikroskopom ZEISS Lattice Lightsheet 7 je fluorescenčna mikroskopija s svetlobnim listom na voljo za slikanje živih celic s subcelično ločljivostjo, hkrati pa lahko uporabljate standardne nosilce vzorcev. Volumetrično slikanje subceličnih struktur in dinamike skozi ure in dneve je na voljo vsem. Odkrijte dinamiko življenja v podrobnostih brez primere - s preprostostjo, ki si je niste predstavljali! zeiss.com/lattice-lightsheet www. .org Document Outline P R O G R A M P O V Z E T K I P R E D A V A N J P O V Z E T K I P O S T E R P R E Z E N T A C I J I N D E K S A V T O R J E V