Hmeljar, 85   Inštitut za hmeljarstvo in pivovarstvo Slovenije          7 
Razvoj nove metode za odkrivanje novih 
žarišč hude viroidne zakrnelosti hmelja na 
terenu – nov podoktorski projekt na IHPS 
Dr. Tanja Guček in dr. Sebastjan Radišek, 
Inštitut za hmeljarstvo in pivovarstvo Slovenije 
Razvoj novih metod je nujen korak k odkrivanju novih 
žarišč in zajezitvi širjenja bolezni hude viroidne 
zakrnelosti hmelja. V letu 2023 smo v Diagnostičnem 
laboratoriju za varstvo rastlin pričeli z izvajanjem 
novega podoktorskega projekta, ki ga je leta 2022 
pridobila dr. Tanja Guček. Naslov novega projekta je 
Razvoj in vpeljava Crispr/Cas diagnostike za 
terensko detekcijo viroida razpokanosti skorje 
agrumov (CBCVd) v hmelju (Humulus lupulus L.). 
Glavni cilj je razviti novo metodo (to je t.i. Crispr/Cas-
RT-RPA) za določanje viroida CBCVd, ki bo bistveno 
skrajšala čas analize, hkrati pa bo enako kakovostna, 
cenovno ugodna in primerna za številne načine 
uporabe, med katerimi bo najpomembnejši možnost 
uporabe na terenu. To pomeni, da bo omogočala 
hitro odkrivanje novih žarišč na terenu in tudi hitrejše 
testiranje certificiranih sadik hmelja, kar bo pomenilo 
velik napredek pri raziskavah hmelja in tudi pri 
rastlinski diagnostiki nasploh. Metoda bo uporabna 
tudi za vrednotenje odpornosti sort in epidemiološke 
študije, kar bo lahko bistveno omejilo nadaljnje 
širjenje bolezni in ublažilo ekonomsko škodo v 
hmeljarstvu.  
 
 
V ta namen smo že izvedli dva poskusa mehanske 
okužbe rastlin hmelja s CBCVd in rastline tedensko 
oziroma mesečno vzorčili. Prisotnost viroida CBCVd 
smo v rastlinah potrdili že po enem mesecu po okužbi 
z že uveljavljeno metodo PCR za občutljivo določanje 
viroidov (to je t.i. RT-PCR v realnem času). Te vzorce 
bomo uporabili za validacijo novo razvite metode. 
Obenem smo tudi že pričeli z optimizacijo hitrega 
načina izolacije viroidov. Testirali in primerjali smo 
več postopkov za homogenizacijo tkiva s pomočjo 
ročnega homogenizatorja in uspešno določili 
prisotnost viroida CBCVd v hmelju. Z uporabo vseh 
izboljšav pričakujemo, da bomo čas analize z dva dni, 
kakor dolga traja sedaj, skrajšali na eno uro.  
 
Shematski prikaz nove metode za določitev viroidov v eni 
uri. Postopek je sestavljen iz več korakov, ki jim sledi 
določitev viroida z uporabo fluorescence. 
(Povzeto po Guček, 2021) 
 
 
Sijaj, sijaj sončece (Foto: M. Žolnir)