Oznaka poročila: ARRS-RPROG-ZP-2014/23 ZAKLJUČNO POROČILO O REZULTATIH RAZISKOVALNEGA PROGRAMA A. PODATKI O RAZISKOVALNEM PROGRAMU 1.Osnovni podatki o raziskovalnem programu Šifra programa P4-0053 Naslov programa Endokrini, imunski in encimski odzivi pri zdravih in bolnih živalih Vodja programa 13334 Milka Vrecl Obseg raziskovalnih ur 53550 Cenovni razred C Trajanje programa 01.2009 - 12.2013 Izvajalci raziskovalnega programa (javne raziskovalne organizacije - JRO in/ali RO s koncesijo) 406 Univerza v Ljubljani, Veterinarska fakulteta Raziskovalno področje po šifrantu ARRS 4 BIOTEHNIKA 4.04 Veterina Družbenoekonomski cilj 08. Kmetijstvo Raziskovalno področje po šifrantu FOS 4 Kmetijske vede 4.03 Veterina B. REZULTATI IN DOSEŽKI RAZISKOVALNEGA PROGRAMA 2.Povzetek raziskovalnega programa1 SLO Na področju raziskav oksidativnega stresa smo določili korelacijo med antioksidantnimi parametri in kardiovaskularnim statusom psov z različnimi srčno-žilnimi obolenji, referenčne hematološke, biokemijske in antioksidantne parametre krvi pred in po definirani vadbi športnih konj, farmakokinetiko koencima Q10 in dinamiko tekočin v pljučih pri konjih. Poročamo tudi, da stopnja parodontalne bolezni pri psih ni povezana s sistemsko ravnjo dušikovega oksida, in da zdravljenje najhuje prizadetih živali povzroča individualno specifičen sistemski odziv. Retrospektivna študija anaplazmoze psov je pokazala, da je potrebno uvesti dodatne diagnostične kriterije za izboljšano diagnostiko in protokol zdravljenja. Pri uvajanju/optimizaciji naprednih metod zdravljenja smo v klinično prakso uvedli elektrokemoterapijo in elektrogensko terapijo za zdravljenje različnih novotvorb psov in avtotransplantacijo matičnih celic iz maščobnega tkiva za zdravljenje sklepnih obolenj psov in konjev. Za trženje slednje smo ustanovili spin-out podjetje Animacel. Pri proizvodnih živalih so raziskave presnovnega stresa in bolezni v zgodnjem poporodnem obdobju pri kravah molznicah pokazale visoko diagnostično vrednost razmerja med maščobami in beljakovinami v mleku glede na podaljšan poporodni premor. Potrdili smo tudi prisotnost želatinaz in metaloproteaz (matriksinov) v semenski plazmi merjascev ter korelacijo med njihovo prisotnostjo v semenski plazmi in značilnostmi semena ter razvili patentirano napravo za atravmatski vnos materiala na izbrano lokacijo v rodila. Primerjava funkcionalne diferenciacije skeletnih mišičnih vlaken pri domačem in divjem prašiču kaže, da je intenzivnejši proces debelitve vlaken pri domačem prašiču vezan predvsem na hipertrofijo vlaken z izraženo izoformo miozina MyHC-IIb, ki je izražena tudi pri divjem prašiču, medtem ko je v skeletnih mišicah drugih velikih domačih sesalcev ni. Na področju raziskav receptorjev s sedmimi transmembranskimi območji (7TMR) in vpliva izbranih biološko aktivnih molekul smo sodelovali pri razvoju presejalnega testa za kanabinoidni receptor tipa 1 ter študiji, s katero je bila potrjena vloga BILF1, 7TMR, ki se nahaja v odprtem bralnem okvirju virusa Epstein-Barr (EBV), pri transformaciji celic. Potrdili smo tudi pomen lipidnih raftov/kaveol za interakcijo 7TMR z beta-arestinom 2 in razjasnili vlogo argininskega motiva pri znotrajcelični zadržanosti dopaminskega receptorja tipa 2. Razjasnili smo tudi mehanizem delovanja sintetičnih polimernih alkilpiridinijevih soli, kandidatnih molekul za zdravljenje nedrobnoceličnega pljučnega karcinoma, na sesalski organizem in ovrednotili njihov predklinični potencial. Najpomembnejša pridobljena spoznanja na področju proučevanja spolno pogojenega obnašanja miših brez gena SF-1 so, da na spolno obnašanje samcev geni s spolnih kromosomov ne vplivajo, medtem ko je spolno in materinsko obnašanje samic posledica delovanja genov in izpostavljenosti spolnim hormonom. ANG In the field of oxidative stress research a correlation between antioxidant and cardiovascular parameters in dogs with cardiovascular diseases was established; reference hematological, biochemical and antioxidant parameters in blood were determined before and after exercise in horses as were the pharmacokinetics of coenzyme Q10 and the lung fluid dynamics. We also reported that the severity of periodontal disease in dogs is not associated with systemic levels of nitric oxide and that treatment of the most severely affected animals induces individually-specific systemic response. A retrospective study of anaplasmosis in dogs revealed the necessity to introduce additional diagnostic criteria to improve diagnostics and treatment protocols. In the area of improved technologies and treatment methods we successfully introduced the electrochemo- and electrogene-therapy for the treatment of various tumors in dogs, and adipose-derived adult stem cell auto-transplantation for the treatment of joint disorders in dogs and horses. For commercialization of the latter, a spin-off company Animacel was established. Production animal studies on metabolic stress and disease development in early postpartum period in dairy cows revealed a high diagnostic value of fat/protein ratio in milk in relation to prolonged calving to conception interval. The presence of gelatinases and metalloproteases in boar seminal plasma was established for the first time and their correlations with semen indicators determined. A patented device for atraumatic introduction of a material to a predefined distant site in a reproductive tract was also developed. Comparison of functional differentiation of skeletal muscle fibers in domestic and wild pigs showed that the process of the fibers enlargement is more intense in the domestic pigs and is linked primarily to hypertrophy of muscle fibers that express myosin isoform IIb. Its presence was also confirmed in wild pigs, while it is missing in skeletal muscles of other large domestic mammals. In the field of seven trans-membrane receptor (7TMR) and biologically active molecules we participated in the development of a screening assay for the cannabinoid receptor 1 and a study confirming cell transformation mediated by the 7TMR BILF1, which is encoded in the open reading frame of the Epstein-Barr virus. We also elucidated the role of lipid rafts/caveolae for 7TMR functional interaction with beta-arrestin 2 and the impact of evolutionary preserved arginine motif in the intracellular retention of the dopamine receptor type 2. The mode of action of synthetic polymeric alkylpyridinium salts, candidate molecules for the treatment of small-cell lung carcinoma, was clarified and their preclinical potential assessed. Studies on sexually dimorphic behavior in SF-1 knockout mice revealed that male sexual behavior does not appear to be regulated by genes on sex hormones, while female sex and maternal behavior seems to be affected by both genes and sex hormones. 3.Poročilo o realizaciji predloženega programa dela na raziskovalnem programu2 SLO Cilj raziskav raziskovalnega programa P4-0053 je pridobivanje temeljnih spoznanj o delovanju zdravega in obolelega organizma, s poudarkom na razumevanju pomena oksidativnega stresa in celične diferenciacije ter prenos pridobljenih temeljnih znanj v prakso. V obdobju 2009-2013 smo raziskave izvajali znotraj treh tematskih sklopov. Sklop-I je vključeval uvajanje izboljšanih metod zdravljenja/biotehnoloških postopkov, proučevanje oksidativnega stresa ter ugotavljanje diagnostičnih in prognostičnih pokazateljev. Pri uvajanju/optimizaciji novih metod zdravljenja smo razvili in v klinično prakso uvedli avtotransplantacijo matičnih celic iz maščobnega tkiva za zdravljenje sklepnih obolenj psov in konjev. Spremljanje pacientov kaže, da je metoda zelo uspešna, saj lahko tudi pri hudih kroničnih vnetjih sklepov ob rentgenskih slikanjih vidimo, da se kostni izrastki dejansko zmanjšajo, česar ni mogoče doseči z drugimi, trenutno uveljavljenimi metodami zdravljenja. V predkliničnih študijah smo proučili učinkovitost in varnost genske terapije s humanim interlevkinom-12 (IL-12) pri zdravljenju spontanih tumorjev. Ugotovili smo, da je intratumorska elektrogenska terapija (EGT) pri različnih vrstah tumorjev psov izzvala dober lokalni protitumorski učinek s statistično značilnim zmanjšanjem velikosti zdravljenih mastocitomov, spremembe v histološki zgradbi tumorjev in sistemsko izločanje citokinov (IL-12 in interferona-Y), brez zaznavnih stranskih učinkov. S kombinacijo peritumorske EGT z IL-12 in elektrokemoterapije tumorjev smo dosegli sistemsko izločanje obeh omenjenih citokinov in popolno regresijo zdravljenih nodulov. Sistemsko izločanje obeh citokinov in podaljšanje dobe preživetja zdravljenih živali smo dosegli tudi z intramuskularno EGT z IL-12. Vzporedno smo ugotavljali tudi varnost uporabljene genske terapije z vidika možnosti prenosa genov z rekombinantnega plazmida pORF-hIL12 na kompetentne bakterije. V bakterijah, izoliranih iz EGT-tretiranih živali, nismo ugotovili genov, kodiranih v plazmidu pORF-hIL12. Rezultati predkliničnih študij so potrdili visok terapevtski potencial EGT z IL-12 kot samostojne ali podporne terapije različnih novotvorb psov. EGT z IL-12 smo zato uvedli v klinično prakso za izvajanje visoko-specialističnega zdravljenja nekaterih tumorskih obolenj pri psih. Rezultati raziskav na področju športne medicine konj so pokazali, da tretiranje konj s furosemidom med športno aktivnostjo v nasprotju s pričakovanji ni spremenilo dinamike tekočine v pljučih. Po izboru Kestler News Hour, ki deluje pod okriljem AAEP (American association of equine practitioners), je bil članek o vplivu furosemida uvrščen v skupino klinično najbolj relevantnih objav v medicini konj za leto 2011. Proučili smo tudi hipotezo, ki trdi, da je Jacobs-Stewartova reakcija pomembna pri dinamiki tekočine v pljučnem krvnem obtoku. Znatno zmanjšanje Jacobs-Stewartove reakcije smo dosegli z inhibicijo karboanhidraze z acetazolamidom, ki je prekinila pretok tekočine iz pljučnega krvnega obtoka v pljučni parenhim. S tem smo dokazali, da je dinamika tekočine v pljučnem krvnem obtoku v večji meri odvisna od Jacobs-Stewartove reakcije, kot pa od sprememb v hidrostatičnem (Starlingovem) pritisku v pljučih. Raziskave oksidativnega stresa so vključevale proučevanje patofizioloških sprememb pri vnetno-imunskem odzivu, ki so lahko posledica porušenega ravnovesja med nastajanjem reaktivnih kisikovih in dušikovih zvrsti in antioksidantnimi mehanizmi ali porušenega ravnovesja med pro- in protivnetnimi citokini. Te procese smo spremljali v različnih patoloških stanjih, kot so parodontalna bolezen in srčno žilna obolenja pri psih. Pri proučevanju sistemskega nitroksidativnega stresa pri okužbi s parodontopatogenimi bakterijami smo znanja, pridobljena na eksperimentalnem modelu miši, prenesli v klinično situacijo in v sodelovanju z Univerzo Davis v Kaliforniji ugotovili, da je odziv drugačen kot v predhodnih eksperimentalnih študijah; stopnja parodontalne bolezni pri psih ni povezana s sistemsko ravnjo dušikovega oksida. Zdravljenje najhuje prizadetih živalih povzroča individualno specifičen sistemski odziv, kar kaže na nujnost individualizacije pristopa k diagnostiki, zdravljenju in spremljanju živali s parodontitisom. Rezultati raziskav tudi potrjujejo, da sta oksidativni stres in posledično povečana lipidna peroksidacija vključena v patogenezo atopičnega dermatitisa psov, terapija psov ob podpori vitamina E pa je, kot smo predvidevali, učinkovitejša. Različne parametre oksidativnega stresa smo proučili tudi pri psih po enkratni aplikaciji vodotopnega koencima Q10 (CoQ10), pri psih s spontanimi kardiovaskularnimi boleznimi in v srčnem popuščanju ter pri klavniških, športnih ter rekreativnih konjih. V nasprotju s pričakovanji je študija farmakokinetike CoQ10 pri konjih pokazala njegovo slabo absorpcijo in majhno biološko uporabnost. S proučevanjem patogeneze in imunskega odziva pri psih po naravni okužbi z bakterijo Anaplasma phagocytophylum smo ugotovili, da je seroprevalenca okužbe z A. phagocytophilum pri psih v Sloveniji 73,8-odstotna; 5,3% psov je PCR-pozitivnih. Verjetnost pojava akutnih znakov je značilno višja pri okužbi z gensko različico H, v primerjavi z različico P. Rezultati klinične študije anaplazmoze psov so bili objavljeni v reviji, ki je uvrščena v skupino A''. Na področju uvajanja novih diagnostičnih pokazateljev v semenu smo potrdili prisotnost želatinaz in metaloproteaz v semenski plazmi merjascev ter korelacijo med njihovo prisotnostjo in značilnostmi semena. Tudi raven TNF-alfa v semenski plazmi merjascev je dober prognostični pokazatelj preživitvene sposobnosti merjaščevih semenčic. Kvaliteto kratkotrajnega hranjenja merjaščevega semena je moč izboljšati pred ohlajenjem z dializo, medtem ko metoda ločevanja celic s polimernimi magnetnimi mikrokroglicami, konjugiranimi z aneksinom V, ni primerna za ločevanje apoptotičnih merjaščevih semenčic. Vpliv letnih časov na parametre semena pri bikih smo ugotavljali v obsežni retrospektivni študiji, v kateri smo analizirali podatke za 71983 ejakulatov, odvzetih v obdobju 31 let. Nasprotno z veljavnim prepričanjem, da letni časi ne vplivajo na reprodukcijske funkcije pri govedu, rezultati naše raziskave tega ne potrjujejo. Raziskave presnovnega stresa in bolezni v zgodnjem poporodnem obdobju pri kravah molznicah so pokazale visoko diagnostično vrednost razmerja med maščobami in beljakovinami (M/B) v mleku glede na podaljšan poporodni premor. Razmerje M/B je lahko v pomoč veterinarjem praktikom pri predvidevanju težav s plodnostjo v čredah krav mlečnih pasem. Razvili smo tudi patentirano napravo, ki omogoča atravmatsko uvajanje sredstva na izbrano lokacijo v reproduktivnem traktu, in hkrati tudi izključuje možnost okužbe/poškodbe notranjosti cevastega organa. Sklop-II je obsegal raziskave delovanja membranskih receptorjev, vpliva naravnih in sintetičnih biološko aktivnih molekul ter morfološke in genetske študije. Na področju raziskav receptorjev s sedmimi transmembranskimi območji (7TMR) smo v sodelovanju s 7TM Pharmo A/S razvili presejalni test, ki je specifično prilagojen za kanabinoidni receptor tipa 1; eden od identificiranih zadetkov je bil uvrščen v fazo I kliničnega preizkušanja. Sodelovali smo pri študiji s katero je bila potrjena vloga BILF1, 7TMR, ki se nahaja v odprtem bralnem okvirju virusa Epstein-Barr (EBV) pri transformaciji celic, ki jo sproži infekcija z EBV. Potrdili smo tudi pomen lipidnih raftov/kaveol za interakcijo 7TMR z beta-arestinom 2 in razjasnili vlogo argininskega motiva znotraj tretje znotrajcelične zanke dopaminskega receptorja tipa 2, ki deluje kot retencijski signal za zadržanost receptorja v endoplazemskem retikulumu. Na področju raziskav delovanja 7TMR poteka tudi 34-mesečno doktorsko usposabljanje Maje Mandic z Veterinarske fakultete v Zagrebu (program Basileus). Sodelovali smo tudi pri retrospektivni študiji, katere namen je bila ocena uporabnosti imunohistološkega razvrščanja malignih tumorjev mlečne žleze pri psicah kot napovednega dejavnika za izid bolezni. Rezultati so pokazali, da je raven izražanja jedrnih receptorjev za progesteron in estrogen eden od najpomembnejših napovednih dejavnikov za izid bolezni psic z malignimi tumorji mlečne žleze. Z obsežno raziskavo vpliva biološko aktivnih molekul smo proučili patofiziološko delovanje sintetičnih polimernih alkilpiridinijevih soli (APS), ki so kandidatne molekule za zdravljenje nedrobnoceličnega pljučnega karcinoma. Za ovrednotenje predkliničnega potenciala teh snovi smo proučili njihove učinke na ravni receptorjev, celic, tkiv, organov in vsega organizma. Prvi smo dokazali, da APS12-2 blokira živčno-mišični prenos prek nedepolarizirajočega mehanizma delovanja na postsinaptične nikotinske acetilholinske receptorje (nAChR) v živčno-mišičnem stiku. Članek, ki opisuje mehanizem delovanja APS12-2, je bil uvrščen med izjemne znanstvene dosežke na področju biotehnike za leto 2012. Poznavanje mehanizma in ciljnega mesta delovanja kandidatnih molekul je osnova za načrtovanje kliničnih raziskav in obvezen podatek pri morebitni registraciji zdravila. Zaključili smo tudi primerjalno morfološko študijo razvoja skeletnih mišičnih vlaken pri domačem in divjem prašiču. Primerjava funkcionalne diferenciacije skeletnih mišičnih vlaken je pokazala, da je diferenciacija hitrejša pri divjem prašiču, nasprotno pa je proces debelitve vlaken intenzivnejši pri domačem prašiču in je vezan predvsem na hipertrofijo vlaken z izraženo najhitrejšo izoformo miozina IIb (MyHC-IIb). Dokaz MyHC-IIb pri divjem prašiču, ki je v skeletnih mišicah drugih velikih domačih sesalcev ni, je ovrgel predpostavko, da je njen obstoj v mišicah domačega prašiča posledica selekcije za dosego čim boljšega prirasta in mesnatosti. Sodelovali smo tudi pri morfološko-genetski raziskavi, katere namen je bil prepoznati morebitne gene, ki so odgovorni za fenotipsko razlikovanje med mišmi, ki na debelost niso dovzetne, in tistimi, ki so zanjo dovzetne. Opravljena je bila analiza funkcionalne zmožnosti skeletne mišičnine, ki se pri suhih miših kaže v povečani lokomotorni aktivnosti, večji produkciji toplote v mirovanju in zvišanem oksidativnem potencialu mišičnih vlaken. Ugotovili smo tudi razlike v izražanju nekaterih kandidatnih genov za debelost med linijami debelih in suhih miši. Na področju karakterizacije skeletnih mišičnih vlaken je potekalo tudi 8-mesečno doktorsko usposabljanje mag. Laza Pendovskega z Veterinarske fakultete v Skopju (program Basileus). V okviru genetskih študij smo proučili še vpliv polimorfizmov gena za prionski protein (PRNP) na dovzetnost na praskavec pri kozah. Pri treh kozah s potrjenim praskavcem smo določili tiho mutacijo na kodonu 138, ki lahko pogojuje dovzetnost na praskavec. Za serin na položaju 146 pa predpostavljamo, da ima zaščitno vlogo pri razvoju bolezni. Sklop-III; v študijah razvoja razlik v možganih med spoloma uporabljamo model miši brez gena SF-1, ki niso nikoli izpostavljene endogenim spolnim hormonom. To nam omogoča ugotavljanje genetsko pogojenih razlik, ki so neodvisne od razlik v izpostavljenosti spolnim hormonom. Najpomembnejši rezultati proučevanja razvoja spolnih razlik v možganih so: i) na žensko spolno obnašanje vplivajo tudi spolni kromosomi, ii) na agresivno in moško spolno obnašanje spolni kromosomi nimajo velikega vpliva, iii) v možganih miši brez gena SF-1 se kljub odsotnosti spolnih hormonov pojavljajo nekatere strukturne spolne razlike in razlike v izraženosti genov, iv) socialna osamitev v času pubertete ima močan in dolgotrajen vpliv na socialno obnašanje in v) ena okvarjena kopija gena SF-1 povzroči motnje v materinskem obnašanju. Ti rezultati so bili objavljeni v uglednih znanstvenih revijah, dva izmed člankov pa v revijah, ki sta uvrščeni v skupino A''. 4.Ocena stopnje realizacije programa dela na raziskovalnem programu in zastavljenih raziskovalnih ciljev3 SLO Zastavljeni raziskovalni cilji v obdobju 2009-2013 so bili uresničeni. Menimo, da so z vidika znanstvene odličnosti in aplikativnosti pomembna naslednja dognanja oz. dosežki: - uspešen prenos rezultatov temeljnih in predkliničnih študij, izvedenih na laboratorijskih živalih, v klinično prakso tj. izvajanje visoko-specialističnega zdravljenja nekaterih tumorskih obolenj psov z EGT in avtotransplantacija matičnih celic za zdravljenje sklepnih obolenj; - ustanovitev spin-out podjetja; - odziv pri okužbi s parodontopatogenimi bakterijami je v klinični situaciji drugačen kot v predhodnih eksperimentalnih študijah, in stopnja parodontalne bolezni, v nasprotju s predpostavko, pri psih ni povezana s sistemsko ravnjo dušikovega oksida; - določitev parametrov oksidativnega stresa v fizioloških in patoloških stanjih in pri različnih živalskih vrstah je pomembna za ovrednotenje vpliva različnih antioksidantov (CoQ10, vitamina E), kot dodatkov k prehrani ali kot podpornega zdravljenja ob standardni terapiji; - pri proučevanju patogeneze in imunskega odziva pri psih po naravni okužbi z bakterijo Anaplasma phagocytophylum smo opravili vse zastavljene naloge in ugotovitve objavili v odmevnem članku (skupina A''); - temeljna spoznanja, ki prispevajo k razumevanju spolne diferenciacije možganov, predvsem vloga genov na spolnih kromosomih, ki neodvisno od spolnih hormonov vplivajo na različen razvoj možganov pri osebkih ženskega in moškega spola (dve objavi v skupini A''); - poglobljeno poznavanje delovanja membranskih receptorjev in biološko aktivnih snovi ponuja priložnosti za aplikativne raziskave in povezovanje z industrijo (uspešno sodelovanje pri razvoju presejalne platforme za kanabinoidni receptor in uvrstitev kandidatne molekule v klinično testiranje); - uvedba novih diagnostičnih pokazateljev za ugotavljanje kvalitete merjaščevega semena in izboljšanih biotehnoloških postopkov za konzerviranje semena pripomore k uporabi kakovostnejšega semena za umetno osemenjevanje, kar prispeva k izboljšanju proizvodnih lastnosti živali; - zdravljenje športnih konjev s furosemidom je bližje načelom športnega dopinga, kot pa preventivi s športnim naporom pogojenega krvavenja v pljučih; - potrditev obstoja najhitrejše izoforme miozina MyHC-IIb pri divjem prašiču, ki je v skeletnih mišicah drugih velikih domačih sesalcev ni, je ovrgla predpostavko, da je njen obstoj v mišicah domačega prašiča posledica selekcije; - poznavanje fizioloških lastnosti domačih živali omogoča njihovo smotrnejšo uporabo v sistemih nadzorovane paše na kraških pašnikih in vodeno reprodukcijo. Dobljeni rezultati so bili uporabljeni za pripravo navodil za vodenje nadzorovane paše na kraških pašnikih (podukrep 1430; kmetijski okoljski program); - spoznanja genetskih študij so podlaga za izdelavo priporočil za selekcijo genotipov živali in oblikovanje rejskih programov ter načrta ukrepov ob pojavu transmisivnih spongiformnih encefalopatij. 5.Utemeljitev morebitnih sprememb programa raziskovalnega programa oziroma sprememb, povečanja ali zmanjšanja sestave programske skupine4 V zadnjem letu izvajanja ni bilo bistvenih odstopanj in sprememb od sprejetega raziskovalnega programa, niti sprememb v sestavi programske skupine. 6.Najpomembnejši znanstveni rezultati programske skupine5 Znanstveni dosežek 1. COBISS ID 3520890 Vir: COBISS.SI Naslov SLO Vpliv spolnih kromosomov na diferenciacijo spolnega obnašanja samic ANG Evidence that sex chromosome genes affect sexual differentiation of female sexual behavior Opis SLO Originalni znanstveni članek opisuje rezultate raziskav ženskega spolnega obnašanja ter izraženosti progesteronskega receptorja v hipotalamusu pri miših brez gena SF-1. Ugotovili smo, da na spolne razlike v ženskem spolnem obnašanju ter izraženosti progesteronskega receptorja vplivajo tudi geni s spolnih kromosomov, saj smo spolne razlike ugotovili tudi med samci in samicami brez gena SF-1, ki niso izpostavljeni spolnim hormonom. Članek je bil v enem letu od objave že trikrat citiran. ANG Original scientific article describes female sex behavior and hypothalamic expression of progesterone receptor in SF-1 knockout mice. It was established that sex differences in both, expression of female sex behavior and immunoexpression of progesterone receptor in the hypothalamus are likely partially dependent on genes from sex chromosomes as sex specific differences were found also between male and female SF-1 KO mice that have never been exposed to sex steroid hormones. The manuscript has already been cited three times in one year since publication. Objavljeno v Academic Press.; Hormones and behavior; 2012; Vol. 61, issue 5; str. 719724; Impact Factor: 3.735;Srednja vrednost revije / Medium Category Impact Factor: 3.307; A'': 1;A': 1; WoS: CN, IA; Avtorji / Authors: Grgurevič Neža, Büdefeld Tomaž, Španic Tanja, Tobet Stuart, Majdič Gregor Tipologija 1.01 Izvirni znanstveni članek 2. COBISS ID 28169945 Vir: COBISS.SI Naslov SLO Anaplazmoza psov: primerjava hematoloških, biokemičnih in kliničnih odstopanj pri psih glede na višino titra protiteles in okužbo, potrjeno s PCR ANG Anaplasmosis in dogs: The relation of haematological, biochemical and clinical alterations to antibody titre and PCR confirmed infection Opis SLO V retrospektivni klinični študiji smo ovrednotili izbrane laboratorijske in klinične parametre pri serološko pozitivnih psih glede na višino IFA titra (6 skupin) in pri PCR pozitivni skupini psov, da bi izboljšali diagnostične kriterije. Trombocitopenija je bila najizrazitejše odstopanje pri pozitivnih psih. Vsi ostali parametri so odstopali le med pozitivnimi skupinami in kontrolno, ne pa med posameznimi pozitivnimi skupinami. Ugotovitve potrjujejo nujnost uvedbe dodatnih diagnostičnih metod za potrditev kliničnih posledic okužbe z A. phagocytophilum. Članek je bil od objave že štirikrat citiran. ANG The aim of this retrospective study was to determine significant differences of selected parameters between groups, according to the IFA titres (6 groups) and PCR positive result (one group) in attempt to improve current diagnostic and treatment criteria. Thrombocytopenia was the most prominent change in all positive dogs. There were significant differences only between each positive group compared to the control group. Our results showed the necessity of introducing additional diagnostic procedures in clinical practice to confirm the clinical relevance of exposure to A. phagocytophilum. Article has been cited four times since publication. Objavljeno v Elsevier; Veterinary Microbiology; 2011; Vol. 149, issue 1/2; str. 172-176; Impact Factor: 3.327;Srednja vrednost revije / Medium Category Impact Factor: 0.939; A'': 1;A': 1; WoS: QU, ZC; Avtorji / Authors: Ravnik Urška, Tozon Nataša, Strašek Katja, Avšič-Županc Tatjana Tipologija 1.01 Izvirni znanstveni članek 3. COBISS ID 3261050 Vir: COBISS.SI Naslov SLO Vpliv odraščanja v izolaciji na socialno obnašanje pri odraslih miših ANG Adolescent social isolation changes social recognition in adult mice Originalni znanstveni članek o vplivu odraščanja v izolaciji na socialno obnašanje pri laboratorijskih miših je pomemben, ker kaže, da način reje Opis SLO laboratorijskih miši lahko vpliva na rezultate vedenjskih analiz. Poleg tega tudi omejena izolacija dolgotrajno vpliva na socialno obnašanje, najverjetneje preko epigenetskih mehanizmov, kar je pomembno tudi za razumevanje delovanja možganov pri ljudeh in drugih živalih. Članek je bil v dveh letih od objave že osemkrat citiran. ANG Original scientific article on the effect of social isolation on social behavior in laboratory mice. The article is especially important from two perspectives. Firstly, it shows that breeding conditions have profound effects on behavior in laboratory mice and must therefore be taken into account when performing behavioral analyzes. Secondly, it shows that even transient social isolation has long lasting effects on mouse behavior, most likely achieved through epigenetic mechanisms, and this could have important implications also for human mental health. Article has been cited eight times since publication. Objavljeno v Elsevier/North-Holland; Behavioural brain research; 2011; Vol. 216, issue 2; str. 647-651; Impact Factor: 3.417;Srednja vrednost revije / Medium Category Impact Factor: 3.302; A'': 1;A': 1; WoS: CN, RU; Avtorji / Authors: Kerčmar Jasmina, Büdefeld Tomaž, Grgurevič Neža, Tobet Stuart, Majdič Gregor Tipologija 1.01 Izvirni znanstveni članek 4. COBISS ID 3587706 Vir: COBISS.SI Naslov SLO Nekompetitivni zaviralec acetilholinesteraze APS12-2 je močan antagonist nikotinskih acetilholinskih receptorjev v skeletnih mišicah ANG The non-competitive acetylcholinesterase inhibitor APS 12-2 is a potent antagonist of skeletal muscle nicotinic acetylcholine receptors Opis SLO APS12-2 je eden od sintetičnih analogov poli-APS, izoliranih iz morske spužve Reniere sarai. Spada med nekompetitivne zaviralce encima acetilholinesteraze (AChE). Merili smo njegov vpliv na krčljivost mišice in elektrofiziološke kazalnike mišičnih vlaken. APS12-2 je v odvisnosti od koncentracije blokiral prek živca izzvano izometrično mišično kontrakcijo (IC50 = 0,74 pM), brez vpliva na neposredno izzvano kontrakcijo do koncentracije 2,72 pM. Vpliv APS12-2 na membranske potenciale mišičnih vlaken v mišji diafragmi smo proučili z znotrajcelično mikroelektrodno tehniko. APS12-2 je v koncentracijah od 0,007 do 3,40 pM zmanjšal amplitudo miniaturnih potencialov motorične ploščice (MPMP), dokler niso ti pri koncentraciji 0,68 pM popolnoma izginili. APS12-2 na frekvenco MPMP ni vplival. APS12-2 je po blokadi natrijevih kanalčkov v mišičnih vlaknih, ki so odvisni od napetosti, v odvisnosti od koncentracije blokiral potenciale motorične ploščice (PMP; IC50 = 0,36 pM), ne da bi pri tem vplival na mirovni membranski potencial do koncentracije 3,40 pM. APS12-2 zavira tudi z ACh povzročeni tok prek membrane oocitov žabe Xenopus laevis, ki so na svoji površini izražali Torpedo (a12ß1Yö) mišični tip nikotinskih acetilholinskih receptorjev (nAChRs; IC50 = 0,0005 pM). To potrjuje večjo afiniteto proučevane snovi za nAChR električnega skata (a12ß1Yö) kot za mišje (a12ß1Y£) nAChR. Naši podatki tako prvič potrjujejo, da APS12-2 blokira živčno-mišični prenos prek nedepolarizirajočega mehanizma delovanja na postsinaptične nAChR v živčno-mišičnem stiku. Na področju biotehnike je bil ta članek uvrščen med izjemne znanstvene dosežke za leto 2012. APS12-2, a non-competitive acetylcholinesterase inhibitor, is one of the synthetic analogues of polymeric alkylpyridinium salts (poly-APS) isolated from the marine sponge Reniera sarai. It is a non-competitive acetylcholinesterase inhibitor. In the present work the effects of APS12-2 were studied on isolated mouse phrenic nerve-hemidiaphragm muscle preparations, using twitch tension measurements and electrophysiological recordings. APS12-2 in a concentration-dependent manner blocked nerve- ANG evoked isometric muscle contraction (IC50 = 0.74 pM), without affecting directly-elicited twitch tension up to 2.72 pM. We studied the influence of APS12-2 on endplate potentials in mouse diaphragm muscle fibers using intracellular microelectrode technique. The compound (0.007-3.40 pM) decreased the amplitude of miniature endplate potentials until a complete block by concentrations higher than 0.68 pM, without affecting their frequency. Full size endplate potentials, recorded after blocking voltage-gated muscle sodium channels, were inhibited by APS12-2 in a concentration-dependent manner (IC50 = 0.36 pM) without significant change in the resting membrane potential of the muscle fibers up to 3.40 pM. The compound also blocked acetylcholine-evoked inward currents in Xenopus oocytes in which Torpedo (a12ßlYö) muscle-type nicotinic acetylcholine receptors (nAChRs) have been incorporated (IC50 = 0.0005 pM) indicating a higher affinity of the compound for Torpedo (a12ßlYö) than for the mouse (a12ß1Y£) nAChR. Our data show for the first time that APS12-2 blocks neuromuscular transmission by a non-depolarizing mechanism through an action on postsynaptic nAChRs of the skeletal neuromuscular junction. This article was recognised as an oustanding scintific achivement in the field of biotechnical sciences for 2012. Objavljeno v Academic Press.; Toxicology and applied pharmacology; 2012; Vol. 265, no. 2; str. 221-228; Impact Factor: 3.975;Srednja vrednost revije / Medium Category Impact Factor: 2.768; A': 1; WoS: TU, YO; Avtorji / Authors: Grandič Marjana, Araoz Romulo, Molgo Jordi, Turk Tom, Sepčic Kristina, Benoit Evelyne, Frangež Robert Tipologija 1.01 Izvirni znanstveni članek 5. COBISS ID 3698810 Vir: COBISS.SI Naslov SLO Zdravljenje z acetazolamidom zmanjša prehajanje tekočine iz pljučnega krvnega obtoka med intenzivnim športnim naporom ANG Acetazolamide attenuates transvascular fluid flux in equine lungs during intense exercise Opis SLO Med intenzivnim športnim naporom približno 4% srčnega iztisa preide iz pljučnega krvnega obtoka v pljučni intersticij. Vzrok za to pripisujejo povišanemu transmuralnemu hidrostatičnem pritisku (Starlingove sile), povečani perfuzijski površini zaradi mobilizacije kapilar in reverzibilnim spremembam v prepustnosti kapilar. Sprememba volumna eritrocitov je pri tem zanemarjena, vendar je prav tako lahko pomembna pri dinamiki tekočine v pljučnem krvnem obtoku. Spremembe volumna eritrocitov so v veliki meri odvisne od Jacobs-Stewartove reakcije, ki skrbi za metabolizem CO2 v kapilarah sistemskega in pljučnega krvnega obtoka. V tej raziskavi smo preizkusili hipotezo, ki trdi, da je Jacobs-Stewartova reakcija pomembna pri dinamiki tekočine v pljučnem krvnem obtoku. Znatno zmanjšanje Jacobs-Stewartove reakcije smo dosegli z inhibicijo karboanhidraze, ki je pomembna pri metabolizmu CO2 v celicah. Kot inhibitor karboanhidraze smo uporabili acetazolamid. Inhibicija karboanhidraze je prekinila pretok tekočine iz pljučnega krvnega obtoka v pljučni parenhim. S tem smo dokazali da je dinamika tekočine v pljučnem krvnem obtoku bolj odvisna od Jacobs-Stewartove reakcije kot pa od sprememb v hidrostatičnem (Starlingovem) pritisku v pljučih. ANG During high intensity exercise approximately 4% of the cardiac output leaves the pulmonary circulation into the interstitium. This fluid flux has been thought to originate from plasma and attributed to an increase in pulmonary transmural hydrostatic (Starling) forces, increases in perfused microvascular surface area and reversible alterations in capillary permeability. However, fluid efflux from erythrocytes may account for a considerable fraction of fluid exiting the pulmonary circulation. Transcapillary erythrocyte volume changes are largely determined by the Jacobs-Stewart cycle, which determines CO2 metabolism in systemic and pulmonary capillaries. We tested the hypothesis that the Jacobs-Stewart cycle contributes to pulmonary transvascular fluid fluxes during exercise by inhibiting red cell carbonic anhydrase, whose activity is critical to rapid completion of the Jacobs-Stewart cycle during capillary transit. Carbonic anhydrase inhibition was achieved with treatment with acetazoamide. The results indicate that during exercise in horses, transvascular fluid fluxes in the lung appear to be dependent on the Jacobs-Stewart cycle and much less dependent upon transmural hydrostatic (Starling) forces. Objavljeno v Cambridge University Press; Journal of physiology; 2013; Vol. 591, issue 18; str. 4499-4513; Impact Factor: 4.380;Srednja vrednost revije / Medium Category Impact Factor: 2.985; A': 1; WoS: RU, UM; Avtorji / Authors: Vengušt Modest, Staempfli Henry, Viel Laurent, Swenson Erik R., Heigenhauser George Tipologija 1.01 Izvirni znanstveni članek 7.Najpomembnejši družbeno-ekonomski rezultati programske skupine6 Družbeno-ekonomski dosežek 1. COBISS ID Vir: vpis v poročilo Naslov SLO Ustanovitev novega »spin-out« podjetja Animacel, d. o. o. ANG Establishment of new spin-out company Animacel, ltd. Opis SLO Gregor Majdič je skupaj z mlado raziskovalko Katerino Čeh razvil novo metodo zdravljenja sklepnih obolenj pri psih z uporabo matičnih celic iz maščobnega tkiva. Kot nam je znano, je raziskovalna skupina Gregorja Majdiča tretja na svetu in druga v Evropi, ki je tak način zdravljenja ponudila na trgu lastnikom psov in drugih živali. Gre za novo visokotehnološko storitev, za katero je veliko povpraševanje, zato je bilo z namenom trženja te storitve v začetku leta 2011 ustanovljeno podjetje Animacel, d. o. o. Za razvoj metode smo v letu 2011 prejeli nagrado za najboljšo inovacijo v javnem sektorju v Sloveniji (podeljeno na 4. mednarodni konferenci o prenosu tehnologij) in rektorjevo nagrado za najboljšo inovacijo Univerze v Ljubljani. Ob podelitvi rektorjeve nagrade so inovacijo, ki jo na trgu ponuja podjetje Animacel, opisali s temi besedami: »Podjetje Animacel, d. o. o., s poslovno idejo »Regenerativno zdravljenje bolezni živali« ima tako rekoč vse, kar naj bi imelo perspektivno visokotehnološko podjetje - prebojno inovacijo, velik tržni potencial, razdelano poslovno strategijo, investitorja ter reference prvih zadovoljnih pacientov. Ima celo več ko to; podjetje deluje na področju uporabe matičnih celic, kjer so s svojim inovativnim postopkom uporabe in množenja matičnih celic odprli veliko področje nadaljnjih raziskav in možnosti aplikacij v veterini, kjer trenutno delujejo, in tudi v humani medicini. Upamo, da bo njihov prispevek pomembno pripomogel k višji kakovosti življenja ljudi in živali.« Težave kroničnih obolenj je bilo do zdaj mogoče reševati le z lajšanjem bolečin, naš postopek pa prvič ponuja dejansko ozdravitev živali. Glede na dosedanje izkušnje z več kot 90 pasjimi pacienti večini zdravljenih psov tri mesece po posegu ni več treba dajati protibolečinskih zdravil. Zdravljenje je za lastnike živali ekonomsko upravičeno in sprejemljivo, saj je cena našega zdravljenja podobna ceni enoletnega protibolečinskega zdravljenja. Postopek zdravljenja smo razvili samostojno v laboratoriju prof. dr. Gregorja Majdiča na Veterinarski fakulteti Univerze v Ljubljani, s katero je ustanovljeno podjetje Animacel podpisalo licenčno pogodbo. Do sredine leta 2013 smo s tem postopkom poleg 90 psov z različnimi bolezenskimi spremembami gibalnega aparata zdravili že tudi 7 konjev. Vse paciente redno spremljamo in pri vseh smo zabeležili znatno izboljšanje zdravstvenega stanja, tj. sposobnost gibanja brez bolečin. Glavni cilj podjetja Animacel je, da v sodelovanju z Veterinarsko fakulteto v Ljubljani v petih letih postane vodilna ustanova v EU na področju zdravljenja živali z matičnimi celicami in raziskav na tem področju, razširiti pa se namerava tudi na trge zunaj EU, kot so ZDA, Rusija, Bližnji vzhod in Južna Amerika. Podjetje Animacel se že pogovarja z investitorjema v ZDA in Argentini o ustanovitvi hčerinskih podjetij v teh dveh državah. ANG Gregor Majdič and young researcher Katerina Čeh have developed a new method for healing arthritis and other joint problems in dog. As far as we know, Gregor Majdič's research group is the third in the world and second in Europe that will offer such treatment commercially to dog owners. This is a new, highly technological medical method (developed purely by our own knowledge) with potentially huge market. Therefore, we established a new spin-off company called Animacel, ltd at the beginning of 2011 for commercialization of this method. For this innovation, Gregor Majdič was awarded two awards for best innovations in public sector in Slovenia in 2011. During award ceremony for the best innovation at University of Ljubljana, this innovation was described with following words: »Company Animacel with business plan »Regenerative treatment of domestic animals« has pretty much everything that perspective, highly technological company should have - important, even revolutionary innovation, huge potential market, well prepared business strategy, investor and references from the first satisfied patients. The company has even more than that. The company works in the field of stem cells, where the team behind this project has, with its innovative process for use of stem cells, opened very large area for further studies as well as applications, not just in veterinary medicine, where they are currently active, but also in human medicine. We sincerely hope that their contribution will have important impact on health and better quality of life for animals in humans." Animacel ltd. was established in February 2011. The company provides stem cell treatments for animals, what is completely novel treatment paradigm for joint and ligament problems that were until now incurable. Similar problems in dogs and horses were until now treated only with pain alleviation while our original procedure offers the healing of the pathological process for the first time. According to our experiences so far, with more than 90 dogs already treated, majority of dogs do not need any pain alleviating treatment three months after our procedure. The treatment is therefore also cost effective for the owner since the price is similar to one year supply of pain alleviating medicine. The procedure was developed autonomously in the laboratory of Professor Gregor Majdič at the Veterinary Faculty, University of Ljubljana. By the middle of 2013, we have treated more than 90 dogs and 7 horses with different problems with locomotor apparatus (arthritis, joint dysplasia, tendonitis). All patients are still regularly monitored and in all there was a marked improvement of their health/ability to walk without pain. Our aim is for Veterinary Faculty at University of Ljubljana and Animacel to become a leading European institution/company in the field of stem cell treatments in animals within 5 years, and to spread to other markets beyond EU. Šifra F.20 Ustanovitev novega podjetja ("spin off") Objavljeno v www.animacel.com Tipologija 4.00 Sekundarno avtorstvo 2. COBISS ID 3271802 Vir: COBISS.SI Naslov SLO Uvedba elektrogenske terapije (EGT) s plazmidom, ki kodira gen za humani IL-12, v veterinarsko onkologijo ANG Introduction of the electrically-assisted gene therapy (EGT) with gene encoding IL-12 in the veterinary oncology Opis SLO Predklinične študije so pokazale, da je EGT s plazmidom, ki kodira gen za humani IL-12, učinkovita metoda zdravljenja različnih tumorjev. V letu 2010 smo pridobili dovoljenje za delo z GSO ji v odprtem sistemu (št. dovoljenja: 35419-1/2009/17), ki omogoča izvajanje klinične študije »Intratumoralno injiciranje gole DNA, ki kodira gen za humani IL-12 in električno posredovani vnos tega odmerka DNA v celice psov«. Registracija odprtega sistema omogoča prenos rezultatov predkliničnih študij, izvedenih na laboratorijskih živalih, v klinično prakso, tj. izvajanje visokospecialističnega zdravljenja nekaterih tumorskih obolenj pri psih. S to metodo smo od leta 2010 zdravili okoli 30 psov. S spremljanjem pacientov smo potrdili, da je EGT s plazmidom, ki kodira gen za humani IL-12, zelo učinkovita metoda zdravljenja tumorjev. Ugotovili smo, da intramuskularna EGT pri psih izzove sistemsko izločanje IL-12 in proizvodnjo IFN-y brez klinično pomembnih stranskih učinkov. Na lokalni ravni smo ugotovili histološko zaznavne strukturne spremembe tumorskega tkiva z zmanjšanjem števila malignih celic in infiltracijo tkiva z vnetnimi celicami ter posledično vsaj delno zmanjšanje velikosti nekaterih tumorjev in podaljšano preživetje zdravljenih psov. ANG Preclinical studies have shown that the EGT with gene encoding IL-12 is effective treatment for different tumors. In 2010, we acquired the license for work with the GMOs in the open system (license No: 35419-1/2009/17) that allow us carry out the clinical study "Intratumorall injection of the naked DNA encoding human IL-12 and electrically-assisted delivery of the same amount of DNA into dogs cells". This enables us to transfer results of preclinical trials conducted on laboratory animals into clinical practice, i.e. to perform highly-specialized treatment of certain tumor diseases in dogs. Since 2010 30 dogs have been treated. Monitoring of treated dogs further confirmed effectiveness of this method. It was showed that intramuscular EGT in dogs induced systemic secretion of IL-12 and IFN-y production, without clinically significant side effects. At the local level, structural changes in tumor tissue were detected at the histological level as shown by reduced number of malignant cells and tissue infiltration with inflammatory cells resulting in at least partially reduced size of some tumors and increased survival of treated dogs. Šifra F.17 Prenos obstoječih tehnologij, znanj, metod in postopkov v prakso Objavljeno v [D. Pavlin]; 2010; 86 str., [77] pril.; Avtorji / Authors: Pavlin Darja Tipologija 2.08 Doktorska disertacija 3. COBISS ID Vir: vpis v poročilo Naslov SLO Nagrada Roberta Wiggsa Ameriškega kolegija za veterinarsko stomatologijo za najboljšega specializanta ANG The Robert Wiggs AVDC Outstanding Candidate Award Ana Nemec je leta 2013 prejela prestižno nagrado Ameriškega kolegija za veterinarsko stomatologijo (AVDC), ki jo kolegij vsako leto podeljuje najuspešnejšemu mlademu specializantu ali specialistu za dosežke, ki so izjemnega pomena za razvoj veterinarske stomatologije. Nagrada se podeljuje v čast dr. Robertu Wiggsu, ki je nesebično skrbel za razvoj veterinarske stomatologije. Nominirance predlagajo mentorji ali vodje specialističnih programov izmed tistih kandidatov, ki so uspešno opravili vse zahteve mednarodne specializacije in lahko pristopijo k mednarodnemu specialističnemu izpitu oziroma so izpit pred kratkim uspešno opravili. Nominacije prouči komisija za izbor nagrajenca, pri čemer se upoštevajo pomembni prispevki k razvoju veterinarske stomatologije, kot so javne predstavitve, predavanja, seminarji, raziskovalne in strokovne objave, uspešnost pri raziskovalnem in kliničnem delu ter promociji veterinarske stomatologije na splošno. Ana Nemec je uspešno zaključila specializacijo in Opis SLO opravila vse zahteve za pristop k specialističnemu izpitu leta 2012, leta 2013 pa je ta mednarodni izpit tudi uspešno opravila in tako postala diplomatka Ameriškega kolegija za veterinarsko stomatologijo. Ana Nemec si je nagrado prislužila z izjemno pomembnimi prispevki k razvoju veterinarske stomatologije; objavila je številne raziskovalne in strokovne prispevke v pomembnih mednarodnih znanstvenih in strokovnih revijah, svoje delo predstavila na številnih mednarodnih, domačih in internih znanstvenih in strokovnih srečanjih, ter se izkazala s svojim kliničnim delom in usposabljanjem študentov in drugih mladih strokovnjakov. Prejeto priznanje dokazuje odličnost prenosa izkušenj in znanj, pridobljenih med eksperimentalnim raziskovalnim delom s področja parodontalne medicine, v klinično raziskovalno delo. Dodaten dokaz vrhunskega dela na področju parodontalne medicine malih živali je tudi nagrada Evropskega združenja veterinarjev za male živali (FECAVA), ki jo je v letu 2011 prejel prof. Zlatko Pavlica za dolgoletno klinično in raziskovalno delo ter nagrada veterinarske klinike univerze v Kaliforniji - Davis za najboljše raziskovalno delo s področja medicine malih živali (parodontalna bolezen, parodontalno zdravljenje in sistemski dušikov oksid pri psih), ki jo je leta 2012 prejela Ana Nemec. ANG Ana Nemec was a recipient of The Robert Wiggs AVDC Outstanding Candidate Award in 2013. This is an annual award given to a young outstanding professional to honor Dr. Robert Wiggs, who has contributed selflessly to AVDC and veterinary dentistry. Nominees must have successfully completed the Credentials process of the AVDC within the past three years, and either has not yet completed the examination process or are recent Diplomates of the College. Letters of support from Mentors or Residency Directors are evaluated and criteria may include presentations, seminars, publications, research, promotion of veterinary dentistry, and contributions to veterinary dentistry in general. Ana Nemec completed her credentials process in 2012 and passed the Board examination in 2013 and become a Diplomate of the AVDC. Ana Nemec has contributed significantly to the field of veterinary dentistry as evident by several peer-reviewed publications published in international well-renown journals in the field, several presentations on international, national and internal scientific and professional meetings, and she is also considered a role model in clinical and teaching activities. The Award is the result of an excellent implementation of experience and knowledge obtained during Ana Nemec's previous and ongoing experimental basic research work in the field of periodontal medicine, to clinical research and practice. Further evidence of excellence in the field of periodontal medicine of small animals is the FECAVA award presented to Professor Zlatko Pavlica for his committed long-term clinical and research work as well as cutting-edge expertise as well as the University of California-Davis Veterinary Medical Teaching Hospital Gerald V. Ling Award - recognizing research in small animal medicine (Periodontal disease, periodontal treatment and systemic nitric oxide in dogs) presented to Ana Nemec in year 2012. Šifra E.02 Mednarodne nagrade Objavljeno v https://www.avma.org/News/JAVMANews/Pages/140201s.aspx Tipologija 4.00 Sekundarno avtorstvo 4. COBISS ID 3653754 Vir: COBISS.SI Naslov SLO Razvoj naprave za atravmatsko uvajanje sredstva v cevasti organ živega bitja ANG Device for atraumatic introduction of a material into a tubular organ of a living being Sodelavec raziskovalne skupine Primož Klinc je skupaj z Darinko Juvan Opis SLO razvil patentirano napravo za atravmatsko uvajanje sredstva v cevasti organ živega bitja (patent: SI 22782 A). Predmet izuma je naprava za atravmatsko uvajanje sredstva, prednostno cevastega, fleksibilnega predmeta, kot je npr. kateter za umetno osemenjevanje, prenos zarodkov, sterilni odvzem in aplikacijo vzorcev, v cevasti organ živega bitja. Tehnični problem, ki ga rešuje izum, je, kako zasnovati napravo, ki bo omogočila atravmatsko uvajanje sredstva do vnaprej določene izbrane oddaljene lokacije v cevastem organu, prednostno rodilih, ki bo hkrati tudi i) izključila možnost okužbe in/ali poškodbe notranjosti organa; ii) omogočila enostavno uvedbo učinkovine (npr. minimalne količine semenske tekočine pri umetni osemenitvi) in iii) omogočila izvajanje postopkov v notranjosti cevastih organov. ANG Research group member Primož Klinc has in colaboration with Darinka Juvan developed a patented device for atraumatic introduction of a means of tubular organ of a living being (patent: SI 22782 A). Device is intended for atraumatic introduction of a means, preferably of a tubular, flexible means like a catheter, e.g. a catheter for artificial insemination, transfer of embryos, sterile taking and application of samples into a tubular organ of a living being. A technical problem solved by the present invention is how to design a device that would allow for atraumatic introduction of a means to a predefined distant spot in a tubular organ, preferably reproductive tract, that would also i) exclude a possibility of an infection and/or damage of the interior of a tubular organ, ii) allow for a simple and uncomplicated introduction of an optional active agent into the interior of said tubular organ, e.g. seminal fluid in minimal quantities in the method of artificial insemination and iii) enable to perform procedures in the interior of said tubular organ. Šifra F.33 Patent v Sloveniji Objavljeno v Urad Republike Slovenije za intelektualno lastnino; 2009; 8 f., 2 f. pril.; Avtorji / Authors: Klinc Primož, Juvan Darinka Tipologija 2.24 Patent 5. COBISS ID 3340154 Vir: vpis v poročilo Naslov SLO Urednica pri Frontiers in Molecular and Structural Endocrinology ANG Associate editor of Frontiers in Molecular and Structural Endocrinology Opis SLO Milka Vrecl je bila najprej gostujoča urednica, v letu 2012 pa je postala urednica pri Frontiers in Molecular and Structural Endocrinology, ki je posebno podpodročje pri Frontiers in Endocrinology. Objavlja pomembne rezultate temeljnih raziskav s področja molekulskih in mehanističnih vidikov delovanja in izločanja hormonov, rastnih faktorjev in citokinov, s poudarkom na povezavi med strukturo in funkcijo. Indeksirana je med drugim tudi v PubMed. Frontiers je spletna platforma, ki znanstvenikom omogoča objavo prosto dostopnih člankov. Leta 2013 je Frontiers vstopil v strateško zavezništvo z Nature Publishing Group (NPG) za pospešitev globalnega gibanja za odprto znanost. Leta 2013 je bila Milka Vrecl izvoljena za slovenskega ambasadorja za bazično znanost pri Evropskem endokrinološkem društvu. ANG Milka Vrecl was at first guest-associated editor and in year 2012 she became an associate editor of Frontiers in Molecular and Structural Endocrinology. Frontiers in Molecular and Structural Endocrinology is a special section of Frontiers in Endocrinology. It publishes significant basic research findings on molecular and mechanistic aspects of hormone, growth factor and cytokine action and secretion, with special emphasis on the link between structure and function and is indexed among others in PubMed. Frontiers is an online platform for the scientific community to publish open-access articles and in 2013 Frontiers has joined Nature Publishing Group (NPG) in a strategic alliance to advance the global open science movement. In 2013 Milka Vrecl was also elected as a national basic science ambassador by the European Society for Endocrinology. Šifra C.04 Uredništvo mednarodne revije Objavljeno v Lausanne: Frontiers Research Foundation. ISSN 1664-2392. http://www.frontiersin.org/endocrinology Tipologija 4.00 Sekundarno avtorstvo 8.Drugi pomembni rezultati programske skupine7 Drugi pomembni dosežki članov programske skupine so: Bojan Zorko - direktor mednarodne zveze veterinarskih radiologov (International Veterinary Radiology Association (IVRA)) za Slovenijo in Vzhodno Evropo ( 2012-2015). Zlatko Pavlica - častni član evropskega kolegija za veterinarsko stomatologijo (EVDC; European Veterinary Dental College). Ana Nemec - predavanja na veterinarski kliniki univerze v Kaliforniji - Davis na tečajih iz oralne kirurgije (course VSR413-001-W12) in parodontologije (course VSR413-001-W12); članica upravnega odbora EVDC in članica komisije za oceno kandidatov za Ameriški specialistični kolegij (American Veterinary Dental College Credentials Committee). Marinka Drobnič Košorok - izvedenka evropskega združenja organizacij za veterinarsko izobraževanje (European Association of Establishments for Veterinary Education (EAEVE)) za akreditacijo študijskih programov. Nataša Tozon, Alenka Seliškar in Darja Pavlin - članice upravnega odbora SZVMŽ (Slovensko združenje veterinarjev za male živali) Alenka Seliškar - podpredsednica SZVMŽ. Valentina Kubale Dvojmoč - urednica univerzitetnega učbenika za delo s poskusnimi živalmi: Poskusne živali v biomedicinskih raziskavah: 1. izd., Ljubljana: Veterinarska fakulteta, 2012, str. 211-215. ISBN 978 961 6199 60-5. Gregor Majdič - glavni urednik revije Slovenian Veterinary Research in član uredniškega odbora pri Endocrinology. Jelka Zabavnik Piano - vodja Nacionalnega veterinarskega inštituta (NVI) v obdobju 20092012. Laboratoriji NVI izkazujejo zanesljivost svojega delovanja z akreditacijsko listino Slovenske akreditacije (PT021). Jelka Zabavnik Piano - organiziranje srečanja predstavnikov veterinarskih laboratorijev iz področja Aple - Adria; 3rd VetLab Conference of Alpe Adria Region (Ljubljana, november 2013). Nina Čebulj Kadunc - vodja Infrastrukturnega centra za sonaravno rekultiviranje Vremščica, ki deluje v okviru mreže infrastrukturnih centrov UL. 9.Pomen raziskovalnih rezultatov programske skupine8 9.1.Pomen za razvoj znanosti9 SLO Programska skupina izvaja temeljne raziskave, ki so osrednjega pomena za razvoj znanosti ter izhodišče za načrtovanje in izvedbo aplikativnih raziskav. S pridobljenimi rezultati prispevamo k napredku v veterinarski medicini oz. na širšem biomedicinskem področju ter uspešno prenašamo temeljna teoretična znanja v prakso, tj. v optimizacijo in razvoj diagnostičnih in prognostičnih pokazateljev ter terapevtskih metod in učinkovin. Zelo pomembna z vidika zmanjševanja števila laboratorijskih poskusnih živali sta tudi ovrednotenje in uporaba živalskih modelov spontanih bolezni, kar ima veliko vrednost tudi v primerjavi s humano medicino. Aktualnost raziskovalne problematike nam omogoča sodelovanje pri domačih in mednarodnih raziskovalnih projektih in mreženje z vrhunskimi raziskovalnimi ustanovami, kliničnimi centri in vodilnimi farmacevtskimi podjetji. Rezultat vključenosti programske skupine v mednarodne raziskovalne tokove so odmevne skupne objave, organiziranja mednarodnih znanstvenih srečanj, možnost prenosa bazičnih znanj v prakso in izmenjave podiplomskih študentov. ANG The main scope of the research group is to carry out cutting-edge basic research, fundamental for the advancement of science and for planning/performing the applied research. The results obtained contribute to the advancement of veterinary medicine and biomedical field. They are also successfully implemented into daily use i.e. optimization/development of diagnostic and prognostic markers as well as therapeutic methods and agents. In view of reduction of experimental animals use, evaluation and use of animal models of naturally occurring diseases (clinical cases) is of utmost importance. This data are also of great value in comparative medicine. Contemporary state of the research topics enables us to participate in the international research projects, scientific networking with top scientists and research institutions as well as leading pharmaceutical companies. The results of this successful international collaboration are highprofile joint publications, organization of international scientific meetings, the ability to translate basic science into practice and the possibility to exchange postgraduate students. 9.2.Pomen za razvoj Slovenije10 SLO Izvajanje kakovostnega znanstvenoraziskovalnega dela ter objave in predstavitve rezultatov na mednarodnih znanstvenih in strokovnih srečanjih prispevajo k napredku veterinarske stroke in promociji države. Člani programske skupine svoje znanje uspešno uporabljajo pri pedagoškem delu, vključeni so v izvajanje dodiplomskega, podiplomskega in specialističnega študija, so mentorji mladim raziskovalcem in dodiplomskim študentom, ki opravljajo študentske raziskovalne naloge. Na ta način skrbijo za kakovost študijskega procesa in popularizacijo raziskovalnega dela med dodiplomskimi študenti. Z uvajanjem in razvojem novih diagnostičnih, prognostičnih in terapevtskih metod pridobljena temeljna znanja uspešno prenašamo in uporabljamo v praksi. S tem prispevamo k dobrobiti živali, bolj kompetentni izvedbi nekaterih laboratorijskih preiskav in povečani konkurenčnosti kliničnih storitev na trgu. Razvoj novih diagnostičnih metod in biotehnoloških postopkov nam omogoča tudi patentne prijave. Poznavanje dejavnikov, ki pomembno vplivajo na nastanek medoperativnih zapletov, lahko uspešno uporabimo pri obravnavi kirurških in hospitaliziranih pacientov, tako v veterinarski kot humani medicini. Pridobljena znanja so tudi podlaga za izdelavo priporočil za usmerjeno selekcijo genotipov živali, ki služijo pripravi rejskih programov in načrta ukrepov ob pojavu določenih bolezni, npr. transmisivnih spongiformnih encefalopatij. Eden od temeljev vizije razvoja kmetijstva v EU je pridelava za potrošnika varne hrane. Rezultati naših študij prispevajo k pripravi smernic za prihodnji razvoj sistemov mlečne proizvodnje v Sloveniji, in k uvajanju trajnostne in okoljsko naravnane reje domačih živali za mlečno proizvodnjo. Podobno so lahko spoznanja o bioloških posebnosti mišičnih vlaken pri prašiču, predvsem na težke miozinske verige vezane sposobnosti hipertrofije in posledičnih škodljivih vplivov na kakovost mesa, uporabna pri načrtovanju rejskih programov in selekcije za namensko proizvodnjo prašičev za določene vrste mesnih izdelkov, kar je še posebej pomembno za ustrezno plasiranje avtohtone pasme krškopoljski prašič. Take reje pa bodo ne nazadnje prispevale tudi k ozaveščanju prebivalstva o pomenu avtohtonih pasem in ohranjanju kulturne krajine. ANG High quality research published in major international scientific journals and presented at the international scientific and professional meetings contributes to the advancement of veterinary profession and promotion of Slovenia. Members of the research program group are involved in the university graduate and postgraduate study programs as lecturers and supervisors of PhD and graduate students. In this way, they contribute to the quality and improvement of the teaching process and to the popularization of research work among graduate students. Research program group also has the ability to implement science into laboratory and clinical practice as evident from the number of applied projects that take place outside the funding scheme of Slovenian Research Agency i.e. implementation of target research and development projects and regulated tasks for the Ministry of Agriculture, Forestry and Food and other contract work for customers, particularly in the area of reproduction of domestic animals. Improvement of existing or development of new diagnostic, prognostic and therapeutic approaches increase the competency of laboratory testing and competitiveness of our clinical services and contribute to animal welfare. Development of novel diagnostic methods and biotechnology protocols has the potential of patent proposals. Data about factors influencing perioperative complications development can be used in development of new protocols for inpatients care that can benefit veterinary as well as human patients. Knowledge obtained can also serve as a basis for guidelines preparation on animal selection towards specific genotypes, that can be used in breeding programs and action plans in case of disease breakout (e.g. transmissible spongiform encephalopathies). One of the cornerstones in advancement of agriculture in EU is food safety. Results of our selected studies will be used to prepare guidelines on future dairy industry development in Slovenia to ensure safety of milk and dairy products focused on more conventional dairy. Similarly, data on biologic characteristics of porcine muscle fibers, and specifically heavy miosyn chain-based hyperthrophy potential of muscle fibers that affect meat quality, may be used to better plan breeding programs towards selected breeds of pigs that can be raised for specific purposes. This may prove the autochthonous pig breed "krškopoljski prašič" to be of superior quality for selected purposes. Additionally, such breed selection is important in raising public awareness about autochthonous breeds and environment protection. 10.Zaključena mentorstva članov programske skupine pri vzgoji kadrov v obdobju 1.1.2009-31.12.2013— 10.1. Diplome12 vrsta usposabljanja število diplom bolonjski program - I. stopnja bolonjski program - II. stopnja univerzitetni (stari) program 5 10.2. Magisterij znanosti in doktorat znanosti13 Šifra raziskovalca Ime in priimek Mag. Dr. MR 0 Elizabeta Hozjan © o □ 25587 Ana Nemec O © 0 26570 Alenka Hrovat o © 0 0 Zlatko Jenko o © □ 29835 Tomaž Budefeld o © □ 24507 Darja Pavlin o © 0 24933 Tina Roškar o © □ 22770 Blanka Premrov Bajuk o © □ 24348 Neža Grgurevič o © 0 0 Alja Plevnik o © □ 26571 Katerina Čeh o © 0 0 Javid Hosseini Tabrizi O © □ 29350 Urška Ravnik o ® 0 0 Sara Jagrič Munih o © □ 31862 Marjana Grandič o ® 0 Legenda: Mag. - Znanstveni magisterij Dr. - Doktorat znanosti MR - mladi raziskovalec ll.Pretok mladih raziskovalcev - zaposlitev po zaključenem usposabljanju14 Šifra raziskovalca Ime in priimek Mag. Dr. Zaposlitev 25587 Ana Nemec O ® D - Javni zavod 26570 Alenka Hrovat o ® E - Tujina 24507 Darja Pavlin o ® D - Javni zavod d 24348 Neža Grgurevič O ® D - Javni zavod 26571 Katerina Čeh O ® C - Gospodarstvo 29350 Urška Ravnik O © D - Javni zavod 31862 Marjana Grandič o © D - Javni zavod Legenda zaposlitev: A - visokošolski in javni raziskovalni zavodi B - gospodarstvo C - javna uprava D - družbene dejavnosti E - tujina F - drugo 12.Vključenost raziskovalcev iz podjetij in gostovanje raziskovalcev, podoktorandov ter študentov iz tujine, daljše od enega meseca, v obdobju 1.1.2009-31.12.2013 Šifra raziskovalca Ime in priimek Sodelovanje v programski skupini Število mesecev 0 Lazo Pendovski C - študent - doktorand 8 Maja Mandic C - študent - doktorand 30 0 Legenda sodelovanja v programski skupini: A - raziskovalec/strokovnjak iz podjetja B - uveljavljeni raziskovalec iz tujine C - študent - doktorand iz tujine D - podoktorand iz tujine 13.Vključevanje v raziskovalne programe Evropske unije in v druge mednarodne raziskovalne in razvojne programe ter drugo mednarodno sodelovanje v obdobju 1.1.2009-31.12.2013 z vsebinsko obrazložitvijo porabe dodeljenih sredstev iz naslova dodatnega letnega sofinanciranja mednarodnega sodelovanja na podlagi pozivov za EU vpetost.15 SLO Projekt FP7-zdravje: Development of antibiofilm coatings for implants (278425 COATIM). G. Majdič, sodelavec na projektu (1. 1. 2012-31. 12. 2015). V letu 2012 in 2013 je bila P4-0053 prejemnica sredstev iz naslova dodatnega letnega sofinanciranja raziskovalnega programa zaradi mednarodnega sodelovanja (sodelovanja v projektih okvirnih programov Evropske unije). V letu 2012 smo prejeli 1326,12 EUR (897,84 EUR za stroške blaga in storitev ter 428,28 EUR za stroške amortizacije) v letu 2013 pa 933,97 EUR (632,48 EUR za stroške blaga in storitev ter 301,49 EUR za stroške amortizacije). Dodatna sredstva smo uporabili za sofinanciranje raziskav uporabe matičnih celic v veterinarski medicini. Projekt NIH R01 (Colorado State University): Cellular differentiation in developing preoptic area. G. Majdič, vodja (1. 4. 2007-31. 3. 2012). Projekt: Bone turnover markers in canine oral tumors. School of Veterinary Medicine, University of California, Davis, ZDA; A. Nemec, sonosilka (2012-2014). Projekt: Systemic nitroxidative stress in dogs undergoing periodontal treatment. School of Veterinary Medicine, University of California, Davis, ZDA; A. Nemec, specializantka (20102012). Projekt: Networking to enhance the use of economics in animal health education, research and policy making in Europe and beyond. Financer: Education, Audovisual and Culture Executive Agency, Lifelong Learning: Erasmus (No. 527855-LLP-1-2012-1-UK-ERASMUS-ENW). J. Zabavnik Piano, sodelavka na projektu (2012-2015). Projekt Evropskega socialnega sklada (ESS) (Kakovost - Univerza v Ljubljani (KUL)). . Marinka Drobnič Košorok, sodelavka na projektu (2013-2015). Operativni program IPA Slovenija-Hrvaška 2007-2013: Čezmejna pobuda za zaščito in revitalizacijo biološke raznovrstnosti okolja z rejo avtohtonih pasem. N. Čebulj Kadunc, koordinatorka na VF. Akcija COST FA 0702: Maternal interaction with gametes and embryos. P. Klinc, koordinator za Slovenijo (9. 1. 2008-27. 2. 2012). Akcija COST FA 1002: Farm animal proteomics. P. Zrimšek, koordinator za Slovenijo (24. 11. 2010-23. 11. 2014). Akcija COST Action FA1201, EPICONCEPT, Epigenetics and Periconception Environment, P. Klinc in M. Kosec, člana MC (4. 10. 2012-3. 10. 2016). Akcija COST CM 1207: GLISTEN: GPCR-Ligand Interactions, Structures, and Transmembrane Signalling: a European Research Network; M. Vrecl, članica MC (21. 11. 2012-20. 11. 2016). Projekt: Systemic nitroxidative stress in dogs undergoing periodontal treatment. Financer: School of Veterinary Medicine, University of California - Davis, ZDA; A. Nemec, specializantka (5. 4. 2010-31. 12. 2012). Projekt: Furosemide influence on pulmonary transmural forces with relation to EIPH. Financer: University of Guelph, Kanada; M. Vengušt, sodelavec na projektu (1. 2. 2007-31. 1. 2012). Projekt: Acid base changes across the lung during exercise. Financer: Canadian institutes of health research; M. Vengušt, sodelavec na projektu (1. 2. 2007-31. 1. 2012). Projekt: Influence of acetazolamide on acid base changes across the lung during exercise and recovery. Financer: McMaster University Medical Centre, Kanada. M. Vengušt, sodelavec na projektu (1. 1. 2009-31. 1. 2013). Projekt: Effect of inhaled salbutamol on pulmonary transvascular fluid fluxes. Financer: Swedish University of Agricultural Sciences. M. Vengušt, sodelavec na projektu (1. 1. 2009-31. 1. 2013). 14.Vključenost v projekte za uporabnike, ki v so obdobju trajanja raziskovalnega programa (1. 1. 2009 - 31. 12. 2013), potekali izven financiranja ARRS16 SLO Razvojna naloga za Ministrstva za kmetijstvo, gozdarstvo in prehrano (MKGP) Republike Slovenije: Izolacija nukleinskih kislin iz arhivskih in obdelanih materialov. Nosilka naloge prof. dr. Jelka Zabavnik Piano. Razvojna naloga za MKGP: Študija o pojavnosti prašičjega reprodukcijska in respiratornega sindroma (PRRS) v Sloveniji v letu 2010. Sodelavca na nalogi: prof. dr. Jelka Zabavnik Piano in dr. Marko Cotman. Ukrepi V Republiki Sloveniji - sofinancerja EU in MKGP: Genotipiziranje gena PRNP pri ovcah za ugotavljanje dovzetnosti na praskavec. Sodelavca na nalogi: prof. dr. Jelka Zabavnik Piano (odgovorna oseba za izvedbo ukrepa) in dr. Marko Cotman. Razvojna naloga za Ministrstva za kmetijstvo, gozdarstvo in prehrano (MKGP) Republike Slovenije: Preverjanje identitete vzorcev od vzorčenja do izdajanja rezultata v poročilu (2011). Sodelavca na nalogi: prof. dr. Jelka Zabavnik Piano (odgovorna oseba za izvedbo ukrepa) in dr. Marko Cotman. Sodelovanje med Veterinarsko fakulteto in: - Biotehniško fakulteto Pogodba o hranjenju genetskih rezerv, 2009 - 2016. P. Klinc, koordinator. - KGZS Zavod Ptuj in KGZS Zavod Ljubljana Pogodbe VF/KRK o preverjanju zdravstvene ustreznosti živalskega semena 2009-2013. P. Klinc, koordinator. - KGZS Zavod MURSKA SOBOTA Pogodba VF/KRK o preverjanju zdravstvene ustreznosti živalskega semena, 2013. P. Klinc, koordinator. - Ministrstvom za kmetijstvo, gozdarstvo in prehrano Pogodbe o financiranju izvajanja Programov za izvedbo skupnega temeljnega rejskega programa na področju govedoreje, prašičereje in reje drobnice, 2008-2010. M. Kosec, koordinator. Pogodbe o financiranju izvajanja Programov za izvedbo skupnega temeljnega rejskega programa na področju govedoreje, prašičereje, reje drobnice in konjereje, 2011-2012, J. Mrkun, koordinator (razen za konjerejo). - GPZ (Govedorejsko poslovno združenje) Pogodba o preverjanju zdravstvene ustreznosti živalskega semena, 2010-2012. P. Klinc, koordinator. - Kobilarno Lipica Pogodba o razvojno raziskovalnem sodelovanju, nedoločen čas. M. Kosec, koordinator. - Kmetijo Mis Pogodba o sodelovanju na področju reprodukcije govedi, do preklica. J. Mrkun, koordinator. - GO-KO; d.o.o. Pogodba o sodelovanju pri izvajanju pedagoškega procesa na farmi v Kočevju, do preklica. M. Kosec, koordinator. - Tovarno zdravil KRKA, d.d. Pogodba med Veterinarsko fakulteto in tovarno zdravil KRKA, d.d. za Študijo detekcije toksičnosti s testom inhibicije gibljivosti merjaščevih semenčic, 2011. J. Mrkun in P. Zrimšek, koordinatorja. - Podjetjem Animacel d.o.o. Metoda avto-transplantacije matičnih celic iz maščobnega tkiva za zdravljenje sklepnih obolenj pri psih. G. Majdič, koordinator. - Podjetjem Pfizer Testiranje vakcine za imuno-kastracijo pujskov (Improvac) v sodelovanju s Kmetijskim inštitutom Slovenije in Farmo Ihan. G. Fazarinc, sodelavec na projektu. 15.Ocena tehnološke zrelosti rezultatov programa in možnosti za njihovo implementacijo v praksi (točka ni namenjena raziskovalnim programom s področij humanističnih ved)17 SLO Razvoj presejalnega testa za kanabionidni receptor 1 (CB1R) V sodelovanju s podjetjem 7TM Pharma A/S smo razvili BRET beta-arestinski presejalni test specifično prilagojen za CB1R, ki je pomembna tarča v farmakoterapiji debelosti. Povezava med CB1R in beta-arestinom 2 (beta-arr2) je šibka; zaradi tega je bila obstoječa presejalna platforma neuporabna. Zmogljivost vezave CB1R z beta-arr2 smo povečali s konstrukcijo himerskih receptorjev CB1R, pri katerih je C-terminalni repek CB1R zamenjan s C-terminalnim koncem receptorjev za vasopressin V2 ali bombesin BRS3, ki oba močno vežeta beta-arr2. S tem pristopom smo presejali manjšo knjižnico in identificirali 21 antagonistov in inverznih agonistov CB1R z IC50 in EC50 vrednostmi med 0,3 nM in 7,5 ^M. Eden od identificiranih zadetkov je bil leta 2010 uvrščen v fazo I kliničnega preizkušanja. Bibliografska referenca (COBISS.SI-ID): 3060346 Uvedba elektrogenske terapije (EGT) s plazmidom, ki kodira gen za humani IL-12, v veterinarsko onkologijo V letu 2010 smo pridobili dovoljenje za delo z genetsko spremenjenimi organizmi (GSO) v odprtem sistemu (št. dovoljenja: 35419-1/2009/17), ki omogoča izvajanje klinične študije "Intratumoralno injiciranje gole DNA, ki kodira gen za humani IL-12 in električno posredovani vnos tega odmerka DNA v celice psov". Registracija odprtega sistema omogoča prenos rezultatov predkliničnih študij, izvedenih na laboratorijskih živalih v klinično prakso tj. izvajanje visoko-specialističnega zdravljenja nekaterih tumorskih obolenj pri psih. Bibliografska referenca (C0BISS.SI-ID):1383803 Rezultati testiranj cepiva za imunsko kastracijo prašičev V sodelovanju s Kmetijskim inštitutom Slovenije in Farmo Ihan smo testirali cepivo za imunsko kastracijo pujskov (Improvac, Pfizer Animal Health). Proučili smo vpliv različnih časovnih intervalov med drugo vakcinacijo in zakolom na raven spolnih hormonov in substanc (androstenon, skatol), ki povzročajo vonj po merjascu, ter spremembe morfoloških in histoloških lastnosti spolnih organov. Cepljenje s sintetičnim peptidnim analogom gonadoliberina (GnRH) povzroči imunološko zaviranje delovanja mod pri prašičih, ki naj bi bila začasna, in se uporablja kot alternativa kirurški kastraciji za zmanjšanje vonja po merjascu. Proizvajalec priporoča dvakratno cepljenje v razmiku 4 tednov in zakol v 4 do 6 tednih po drugem cepljenju. Če je zakol pozneje, več kot 10 tednov po drugem odmerku, proizvajalec priporoča cepljenje s tretjim odmerkom. Naši rezultati so pokazali, da tudi 8 tednov po drugi vakcinaciji ni bilo znakov morfološke in funkcionalne obnove spolnih organov. To potrjuje, da je učinek vakcine Improvac daljši, kot je napovedano v navodilih za uporabo. To je zelo pomemben podatek za prašičerejce, ki lahko v primeru težav/zamud pri načrtovani prodaji, opustijo vakcinacijo s tretjim odmerkom in tako zmanjšajo stroške reje. Bibliografska referenca (COBISS.SI-ID): 3945064 16.Ocenite, ali bi doseženi rezultati v okviru programa lahko vodili do ustanovitve spin-off podjetja, kolikšen finančni vložek bi zahteval ta korak ter kakšno infrastrukturo in opremo bi potrebovali možnost ustanovitve spin-off podjetja DA NE potrebni finančni vložek ocena potrebne infrastrukture in opreme18 17.Izjemni dosežek v 201313 17.1. Izjemni znanstveni dosežek V okviru raziskav bioloških vplivov in mehanizmov delovanja sintetičnih biološko aktivnih molekul smo v letu 2013 končali raziskavo, v okviru katere smo proučili fiziološke, farmakološke in toksične učinke sintetičnih polimernih alkilpiridinijevih soli (APS) na sesalski organizem. Te snovi so kandidatne molekule za zdravljenje nedrobnoceličnega pljučnega karcinoma. V letu 2013 smo v reviji Toxicology (IF=4,017) objavili članek o delovanju APS3. Dokazali smo, da blokira živčno-mišični prenos prek nedepolarizirajočega mehanizma delovanja na postsinaptične nikotinske acetilholinske receptorje (nAChR) v živčno mišičnem stiku in vivo in in vitro. Vendar je v primerjavi z drugimi poučenimi APS-i ugotovljena toksičnost APS3 relativno majhna, APS3 tudi nima hemolitičnega delovanja, zato ima kljub nekoliko nižji učinkovitosti, predklinični potencial. 17.2. Izjemni družbeno-ekonomski dosežek Ana Nemec je leta 2013 prejela prestižno nagrado Ameriškega kolegija za veterinarsko stomatologijo (AVDC), ki jo kolegij podeljuje vsako leto najuspešnejšemu mlademu specializantu ali specialistu za dosežke, ki so izjemnega pomena za razvoj veterinarske stomatologije. Ana Nemec je po opravljeni specializaciji na Univerzi Davis v Kaliforniji leta 2013 uspešno opravila mednarodni specialistični izpit in postala diplomatka AVDC, kasneje pa še diplomatka Evropskega kolegija za veterinarsko stomatologijo (EVDC). Prejeta nagrada dokazuje pomemben prispevek Ane Nemec k razvoju veterinarske stomatologije, ki ga izkazuje z objavljenimi prispevki v uglednih mednarodnih revijah, predstavitvami na mednarodnih, domačih in internih znanstvenih in strokovnih srečanjih, ter s svojim kliničnim delom in usposabljanjem študentov ter drugih mladih strokovnjakov tako na Veterinarski fakulteti Univerze v Ljubljani, kakor tudi na Univerzi Davis v Kaliforniji. C. IZJAVE Podpisani izjavljam/o, da: • so vsi podatki, ki jih navajamo v poročilu, resnični in točni • se strinjamo z obdelavo podatkov v skladu z zakonodajo o varstvu osebnih podatkov za potrebe ocenjevanja in obdelavo teh podatkov za evidence ARRS • so vsi podatki v obrazcu v elektronski obliki identični podatkom v obrazcu v papirnati obliki • so z vsebino poročila seznanjeni in se strinjajo vsi izvajalci raziskovalnega programa Podpisi: zastopnik oz. pooblaščena oseba JRO . vodja raziskovalnega programa: in/ali RO s koncesijo: i Univerza v Ljubljani, Veterinarska Milka Vrecl fakulteta ZIG Kraj in datum: Ljubljana |9.4.2014 Oznaka prijave: ARRS-RPROG-ZP-2014/23 1 Napišite povzetek raziskovalnega programa v slovenskem jeziku (največ 3.000 znakov vključno s presledki - približno pol strani, velikost pisave 11) in angleškem jeziku (največ 3.000 znakov vključno s presledki - približno pol strani, velikost pisave 11). Nazaj 2 Napišite kratko vsebinsko poročilo, v katerem predstavite raziskovalno hipotezo in opis raziskovanja. Navedite ključne ugotovitve, znanstvena spoznanja, rezultate in učinke raziskovalnega programa in njihovo uporabo ter sodelovanje s tujimi partnerji. Največ 12.000 znakov vključno s presledki (približno dve strani, velikosti pisave 11). Nazaj 3 Realizacija raziskovalne hipoteze. Največ 3.000 znakov vključno s presledki (približno pol strani, velikosti pisave 11). Nazaj 4 V primeru bistvenih odstopanj in sprememb od predvidenega programa dela raziskovalnega programa, kot je bil zapisan v predlogu raziskovalnega programa oziroma v primeru sprememb, povečanja ali zmanjšanja sestave programske skupine v zadnjem letu izvajanja raziskovalnega programa, napišite obrazložitev. V primeru, da sprememb ni bilo, to navedite. Največ 6.000 znakov vključno s presledki (približno ena stran, velikosti pisave 11). Nazaj 5 Navedite znanstvene dosežke (največ pet), ki so nastali v okviru tega programa. Raziskovalni dosežek iz obdobja izvajanja programa (do oddaje zaključnega poročila) vpišete tako, da izpolnite COBISS kodo dosežka - sistem nato sam izpolni naslov objave, naziv, IF in srednjo vrednost revije, naziv FOS področja ter podatek, ali je dosežek uvrščen v A'' ali A'. Nazaj 6 Navedite družbeno-ekonomske dosežke (največ pet), ki so nastali v okviru tega programa. Družbeno-ekonomski dosežek iz obdobja izvajanja programa (do oddaje zaključnega poročila) vpišete tako, da izpolnite COBISS kodo dosežka - sistem nato sam izpolni naslov objave, naziv, IF in srednjo vrednost revije, naziv FOS področja ter podatek, ali je dosežek uvrščen v A'' ali A'. Družbeno-ekonomski dosežek je po svoji strukturi drugačen kot znanstveni dosežek. Povzetek znanstvenega dosežka je praviloma povzetek bibliografske enote (članka, knjige), v kateri je dosežek objavljen. Povzetek družbeno-ekonomskega dosežka praviloma ni povzetek bibliografske enote, ki ta dosežek dokumentira, ker je dosežek sklop več rezultatov raziskovanja, ki je lahko dokumentiran v različnih bibliografskih enotah. COBISS ID zato ni enoznačen, izjemoma pa ga lahko tudi ni (npr. prehod mlajših sodelavcev v gospodarstvo na pomembnih raziskovalnih nalogah, ali ustanovitev podjetja kot rezultat programa ... - v obeh primerih ni COBISS ID). Nazaj 7 Navedite rezultate raziskovalnega programa iz obdobja izvajanja programa (do oddaje zaključnega poročila) v primeru, da katerega od rezultatov ni mogoče navesti v točkah 6 in 7 (npr. ker se ga v sistemu COBISS ne vodi). Največ 2.000 znakov vključno s presledki (približno 1/3 strani, velikost pisave 11). Nazaj 8 Pomen raziskovalnih rezultatov za razvoj znanosti in za razvoj Slovenije bo objavljen na spletni strani: http://sicris.izum.si/ za posamezen program, ki je predmet poročanja. Nazaj 9 Največ 4.000 znakov vključno s presledki. Nazaj 10 Največ 4.000 znakov vključno s presledki. Nazaj 11 Upoštevajo se le tiste diplome, magisteriji znanosti in doktorati znanosti (zaključene/i v obdobju 1. 1. 2009 - 31. 12. 2013), pri katerih so kot mentorji sodelovali člani programske skupine. Nazaj 12 Vpišite število opravljenih diplom v času trajanja raziskovalnega programa glede na vrsto usposabljanja. Nazaj 13 Vpišite šifro raziskovalca in/ali ime in priimek osebe, ki je v času trajanja raziskovalnega programa pridobila naziv magister znanosti in/ali doktor znanosti ter označite doseženo izobrazbo. V primeru, da se je oseba usposabljala po programu Mladi raziskovalci, označite MR. Nazaj 14 Za mlade raziskovalce, ki ste jih navedli v tabeli 11.2. točke (usposabljanje so uspešno zaključili v obdobju od 1. 1. 2009 do 31. 12. 2013), ustrezno označite, kje so se zaposlili po zaključenem usposabljanju. Nazaj 15 Navedite naslove projektov in ime člana programske skupine, ki je bil vodja/koordinator navedenega projekta. Točko izpolnijo tudi izvajalci raziskovalnega programa, prejemniki sredstev iz naslova dodatnega letnega sofinanciranja raziskovalnega programa zaradi mednarodnega sodelovanja (sodelovanja v projektih okvirnih programov Evropske unije). Izvajalec, ki je na podlagi pogodbe prejel sredstva iz navedenega naslova, vsebinsko opiše porabo prejetih sredstev za financiranje stroškov blaga in storitev ter amortizacije, nastalih pri izvajanju tega raziskovalnega programa. V primeru, da so bili v okviru raziskovalnega programa prejemniki sredstev različni izvajalci, vsak pripravi vsebinsko poročilo za svoj delež pogodbenih sredstev. Vodja raziskovalnega programa poskrbi, da je vsebinsko poročilo, ločeno za vsakega izvajalca, vključeno v navedeno točko poročila. Največ 6.000 znakov vključno s presledki (približno ena stran, velikosti pisave 11). Nazaj 16 Navedite naslove projektov, ki ne sodijo v okvir financiranja ARRS (npr: industrijski projekti, projekti za druge naročnike, državno upravo, občine idr.) in ime člana programske skupine, ki je bil vodja/koordinator navedenega projekta. Največ 3.000 znakov vključno s presledki (približno pol strani, velikosti pisave 11). Nazaj 17 Opišite možnosti za uporabo rezultatov v praksi. Opišite izdelke oziroma tehnologijo in potencialne trge oziroma tržne niše, v katere sodijo. Ocenite dodano vrednost izdelkov, katerih osnova je znanje, razvito v okviru programa oziroma dodano vrednost na zaposlenega, če jo je mogoče oceniti (npr. v primerih, ko je rezultat izboljšava obstoječih tehnologij oziroma izdelkov). Največ 3.000 znakov vključno s presledki (približno pol strani, velikosti pisave 11). Nazaj 18 Največ 1.000 znakov vključno s presledki (približno 1/6 strani, velikost pisave 11) Nazaj 19 Navedite en izjemni znanstveni dosežek in/ali en izjemni družbeno-ekonomski dosežek raziskovalnega programa v letu 2013 (največ 1000 znakov, vključno s presledki, velikost pisave 11). Za dosežek pripravite diapozitiv, ki vsebuje sliko ali drugo slikovno gradivo v zvezi z izjemnim dosežkom (velikost pisave najmanj 16, približno pol strani) in opis izjemnega dosežka (velikost pisave 12, približno pol strani). Diapozitiv/-a priložite kot priponko/-i k temu poročilu. Vzorec diapozitiva je objavljen na spletni strani ARRS http://www.arrs.gov.si/sl/gradivo/, predstavitve dosežkov za pretekla leta pa so objavljena na spletni strani http://www.arrs.gov.si/sl/analize/dosez/. Nazaj Obrazec: ARRS-RPROG-ZP/2014 v1.00a AC-1C-5E-89-A3-0D-FB-C2-1F-FC-D5-C9-5A-27-75-04-3A-31-9C-08 Priloga 1 4. BIOTEHNIKA 4.04 Veterina Dosežek: Nagrada Roberta Wiggsa Ameriškega kolegija za veterinarsko stomatologijo za najboljšega specializanta ^/i MFRirAN VFrMrN S tj v DENTAL COLLEGE IRoßert }Vw(is Outstanding (av didate Award «s^g^ Presented to i XT Ur /Vrici iNemec October 3rd, 2013 P n: Aide nt Secretary Awards Chinr AVDC Dr. Paul Mitchell, Dipl. AVDC, Zoetis in doc. dr. Plaketa nagrade Roberta Wiggsa. Ana Nemec, Dipl. AVDC, EVDC na podelitvi nagrad. • Nagrado Roberta Wiggsa podeljuje letno Ameriški kolegij za veterinarsko stomatologijo (AVDC) najboljšemu mlademu specializantu ali specialistu za dosežke, ki so izjemnega pomena za razvoj veterinarske stomatologije. • Prejeta nagrada, ki jo AVDC podeli po proučitvi dela nominirancev, dokazuje pomemben prispevek Ane Nemec k razvoju veterinarske stomatologije, ki ga dosega s številnimi raziskovalnimi in strokovnimi prispevki v pomembnih mednarodnih znanstvenih in strokovnih revijah, predstavitvami na mednarodnih, domačih in internih znanstvenih in strokovnih srečanjih, ter s svojim kliničnim delom in usposabljanjem študentov ter drugih mladih strokovnjakov. • Ana Nemec je po opravljeni specializaciji na Univerzi v Kaliforniji-Davis leta 2013 uspešno opravila mednarodni specialistični izpit in tako postala diplomatka AVDC, kasneje pa še diplomatka Evropskega kolegija za veterinarsko stomatologijo (EVDC). Klinično in raziskovalno dela na Veterinarski fakulteti Univerze v Ljubljani, tesno pa ostaja vpeta v raziskovalno delo na Univerzi v Kaliforniji-Davis kot raziskovalna sodelavka, ter v dejavnosti AVDC in EVDC. Priloga 2 4. BIOTEHNIKA 4.04 Veterina Dosežek: Biološki učinki in mehanizmi delovanja APS3 na sesalske organizme. Vir: Grandič M., Araoz R., Molgo J., Turk T, Sepčic K., Benoit E., Frangež R. Toxicology 2013, vol. 303, no. 1, str. 25-33 (IF = 4,017) s ? is il l 1 1 1 1 i I II 50 6D rtigftearAPSi c Z 75 o 5 £ 60-i ID5O = 37,25 Mg/Kg 50- 25- 3 S 0 r,^^ * Stimulation by nerve \ Direct stimulation 30 40 SO APS3 (rmg/kgi : 20,3 mM 1D-5 APS3 (M) Slika 1: Učinki kumulativnih odmerkov APS3 na posredno izzvano enostavno izometrično mišično kontrakcijo sprednje golenična mišice in vivo. Slika 2: Inhibicijska krivulja v odvisnosti od koncentracije APS3 za posredno in neposredno izzvano mišično kontrakcijo mišje hemidiafragme. Slika 3: (A) Učinek APS3 na amplitudo potencialov motorične ploščice (PMP). (B) Inhibicijska krivulja v odvisnosti od koncentracije APS3 za amplitudo PMP v mišičnih vlaknih mišje hemidiafragme. 100-. .2 80- "e u- 60- o o-- c 40- o i- □ o 20- 0- 0.i,.a|_ 171.33 nMAPS3-5ÜMMAa b-SOMMAChfJ. spp.) c-50 mM ACh [1-app.) 10 0,19 mM TTTT|- 10-6 i i r 11 10-4 Slika 4: Antagonistični učinek APS3 na nAChRs, izražene v membrani oocitov žabe Xenophus laevis (inhibicijska krivulja za transmembranski ionski tok, izzvan z ACh v odvisnosti od koncentracije APS3). Pod krivuljo: primer ionskega toka, povzročenega z ACh (c) skozi nAChRs in kombinacijo ACh in APS3 (a) ter po spiranju (b). aps3 (m) Proučevali smo farmakološke in toksične učinke sintetičnih polimernih alkilpiridinijevih soli (APS), ki so kandidatne molekule za zdravljenje nedrobnoceličnega pljučnega karcinoma. Prvi smo dokazali, da APS3 zavira krčenje skeletnih mišic in vivo (Sl. 1) in in vitro (Sl. 2) z ID50= 37,25 jMin IC50= 20,3 jiM. Zmanjšana moč kontrakcije je posledica zmanjšanja amplitude potencialov motorične ploščice (Sl. 3A) v odvisnosti od koncentracije (Sl. 3B). Mehanizem blokade živčno-mišičnega prenosa na molekulski ravni je blokada postsinaptičnih nikotinskih acetilholinskih receptorjev (nAChR) (Sl. 4) v živčno-mišičnem stiku. Natančno poznavanje mehanizmov delovanja kandidatnih molekul je temelj za načrtovanje kliničnih raziskav in obvezen podatek pri morebitni registraciji zdravila. IC 50