KRALJEVINA SRBA, HRVATA I SLOVENACA
UPRAVA ZA ZAŠTITU
Razred 30 (6)
INDUSTRISKE SVOJINE
Izdan 1. Decembra 1926.
PATENTNI IPeS ŠT. S§§§
Elektro-Osmose Aktiengesellschaft (Graf Schwerin-Gesellschaft), Berlin.
Postopek za točenje antigenov in specifičnih cepilnih sredstev iz krvnega seruma, kakor tudi iz ekssudatov in transsudatov obolelih individuov ali rekonvalescentov.
Prijava z dne 1. junija 1925.	Velja od 1. oktobra 1925.
Zahtevana prvenstvena pravica z dne 1. julija 1924. (Nemčija.)
Znano je, da se nahajajo v krvnem serumu pacijentov po prestani infekcijski bolezni ne nebistvene množine specifičnih immu-nih snovi. Iz tega dejstva so naredili en praktični sklep s tem, da so uporabljali krvni serum individuov po prestani bolezni, torej takozvani serum rekonvalescentov, kot zaščitno sredstvo zoper dotično bolezen pri zdravih in kot zdravilo pri na isti bolezni obolelih individuih. Nadalje je znano, da se nahajajo v krvnem serumu individuov, ki bolujejo na kaki infekcijksi bolezni, snovi, ki so ali zmožne prenesli infekcijo na druge individue, ali ki morejo najmanje pri zdravih individuih povzročiti bolezenske pojave iste vrste. V prvem slučaju gre za žive snovi, torej neposredno za povzročeval-ce bolezni (bakterije in druge vrste virusov), v zadnjem slučaju za takozvane toksine, ki obično krožijo v krvi in ostali sočni struji obolelih individuov. Ve se tudi, da se iste snovi nahajajo v patoloških izlivih, namreč v ekssudatih in transsudatih, ki se nabirajo vsled infekcijskih bolezni v mnogih slučajih v telesnih votlinah obolelih individuov. Opazili pa so, da je množina antiteles in antigenov v takih patoloških izlivih nasplošno večja kakor množina teh specifičnih snovi v krvnem serumu istih pacijentov.
Razumljivo je, da istočasna prisotnost živih povzročevalcev in neživih antigenov (toksinov) poleg pravih immunih snovi prav znatno otežuje uporabo krvnega seruma in
pravtako uporabo ekssudatov in transsudatov kot zaščitno in zdravilno sredstvo pri drugih individuih, da, v mnogih slučajih popolnoma onemogoči, ker mora biti z njihovo uporabo vedno zvezana nevarnost bolezen nakopajočega učinka.
Našli so pa, da je mogoče izvesti ločitev živih povzročevalcev in takozvanih antigenov od pravih immunih snovi in dospeti po tej poti do dveh vrst preparatov, ki so silno važne za pobijanje infekcijskih bolezni, namreč prvič snovi, s pomočjo se more nuditi zdravim individuom zaščito zoper infekcijo enake vrste, in drugič pravih immunih snovi, ki morejo dalekosežno ozdravili bolezni iste vrste.
Ločitev teh dveh, po naravi docela različnih snovi, se po izumu doseže s tem, da se odvzema dotične tekočine po znani poti obolelim individuom in se izvrši v teh tekočinah ločitev beljakovin v tem smislu, da se loči euglobulin od paraglobulina in albumina. Pri tem se postopa sledeče: Dotične tekočine se najprej s centrifugiranjem ali filtriranjem ločijo od v njih se nahajajočih trdnih sestavin. Nato se denejo v srednji prostor elektroosmetičnega trice-ličnega aparata, čegar katodični diafragma sestoji iz kuterskega sukna (gosto tkane jadrovine), dočim sestoji anodični diafragma iz kromove gelatine na volni ali chi-nonskem usnju. Z elektroosmetičnim pode-lovanjem se odvzame doličnim tekočinama najprej vse elektrolite, s čimer pride ne-
raziopljivi globulin, torej euglobulin v isoe-lektrični točki do odločivanja. Razkrili so prav pomenljivo dejstvo, da se s tem eu-globulinom privedejo vsi antigeni in vsi v ekssudatih prvotno se nahajajoči povzroče-valci bolezni do odločivanja. Potem se v soli prosti tekočini loči vsediino, torej euglobulin, od tekočih sestavin s filtriranjem ali centrifugiranjem. Poslednje vsebujejo le še pseudoglobuline in albumine. S filtriranjem ali centrifugiranjem dobljena popolnoma čista tekočina se podvrže po znanih metodah solnemu oborjenju, s katerim se more izvršiti ločitev albumina in pseudo-globulina. Dobljena, iz pseudoglobulina se-sioječa usedlina se nato raztopi v vodi in iznova podvrže učinkovanju električne struje v zgoraj omenjenem triceličnem aparatu. Pri tem se dobi popolnoma čisto, soli prosto tekočino, ki vsebuje v kemičnem smislu samo pseudoglobulin v raztopini in s tem zvezano specifične immune snovi v o-bilni množini.
Primer:
V trebušni votlini tuberkuloznih pacijentov se čisto najde velike množine takozvane tekočine ascites. Ta se zbere in filtrira skozi papir, da se odstranijo trdne sestavine. 3 litri te tekočine se denejo v srednji prostor triceličnega aparata in podvržejo učinkovanju elektične struje. Napetost znaša izpočeika le 20 — 30 voltov, dočim znaša strujna jakost kakih 10	12 amperov.
Tekom kakih dveh ur pade strujna jakost na 0.05	0.1 amperov, dočim naraste na-
petost na 200 — 220 voltov. V tekočini se sedaj odločiva, in sicer pri koncentraciji vodikovih ionov od kakih 6.4 Ph, kocnjast talog, ki se zbere s pomočjo centrifuge. Ta talog se lahko ob uporabi slabo alkalične raztopine kuhinjske soli raztopi v vsakem poljubnem razmerju v kalno tekočino. Ta raztopina vsebuje poleg specifičnega tuberkuloznega antigena visoke učinkovitosti često majhne množine nepoškodovanih tuberkelskih bacilov, ki se s pomočjo fil-
tracije z bakterijskimi svečami lahko odstranijo iz tekočine. Cista, bakterij popolnoma prosta raztopina se uporablja kot antigen za zaščito zdravih individuov ali tudi za terapijo obolelih individuov.
Od usedline oproščena, popolnoma čista tekočina se nasiti s kristaliničnim magnezijevim sulfatom ali pomeša s toliko nasičene raztopine amonijevega sulfata, da se odločijo vsi pseudoglobulini. V obeh slučajih se dobi obilen talog, ki se s pomočjo centrifuge ali s filtracijo tahko loči od prestale raztopine. Talog se raztopi v malo vode in pomeša v svrho odstranitve odviš-nje žveplene kiseline na znani način z ba-rijevim acetatom in odfiltrira od odločenega barijevega sulfata. Cista tekočina se potem ponovno podvrže elektro-osmosi v zgoraj omenjenem triceličnem aparatu. Dobi se popolnoma čisto tekočino, ki se v danem slučaju lahko' koncentrira v vakuumu ob izogibanju visokih temperatur ali vpari do osušenja. Iz uporabljanih 3 litrov tekočine ascites se dobi povprečno 0.5 gr eu-globulina in približno 1 gr suhega pseudoglobulina, ki se more za uporabo kot zdravilo zoper tuberkulozo raztopiti v fiziologi-čni raztopini kuhinjske soli.
Patentni zahtev:
Postopek za sušenje antigenov in specifičnih cepilnih sredstev iz krvnega seruma, kakor tudi iz ekssudatov in transsudatov obolelih individuov, ali rekonvalescentov, označen s tem, da se izpostavi od obolelih individuov prihajajoče tekočine v srednjem prostoru triceličnega aparata učinkovanju električne ravnoslruje, zbere pri tem nastali talog s filtriranjem ali centrifugiranjem, raztopi v alkalični vodi in se loči dobljeno raztopino s svečno filtracijo od odmrlih ali živih povzročevalcev, dočim se iz od taloga oproščene raztopine odločuje pseudoglobulin z oborjenjem z nevtralnimi solmi, raztopi dobljeni talog v vodi in se ta raztopina očisti elektroosmotičnim potom.