Začetni razvoj protikovidnih cepiv Zbornik povzetkov Molekularna biotehnologija Magistrski študijski program Biokemija UL FKKT Ljubljana, 2021 Začetni razvoj protikovidnih cepiv – zbornik povzetkov Izdajatelj Univerza v Ljubljani, Fakulteta za kemijo in kemijsko tehnologijo, Katedra za biokemijo Ljubljana, december 2021 Urednik izr. prof. dr. Marko Dolinar Oblikovanje in slike Jerneja Nimac Slike so bile pripravljene s programoma BioRander.com in Adobe Illustrator. Avtorica opisov tipov cepiv in primerjalnih preglednic Jerneja Nimac Avtorji besedila: Katja Doberšek, Karin Dobravc Škof, Marko Dolinar, Željka Erić, Urška Fajdiga, Luka Gnidovec, Paula Horvat, Urban Hribar, Jernej Imperl, Anže Karlek, Eva Keber, Ernestina Lavrih, Martina Lokar, Urša Lovše, Nina Lukančič, Ana Maklin, Mirsad Mešić, Jerneja Nimac, Neža Pavko, Urška Pečarič Strnad, Klementina Polanec, Andrej Race, Matija Ruparčič, Saša Slabe, Peter Škrinjar, Almina Tahirović, Liza Ulčakar, Nika Zaveršek, Mateja Žvipelj. 1. spletna izdaja, 2021 Dostopno na http://web.fkkt.uni-lj.si/biokemija/Protikovidna2021.pdf © (2021) avtorji Kataložni zapis o publikaciji (CIP) pripravili v Narodni in univerzitetni knjižnici v Ljubljani COBISS.SI-ID 94906627 ISBN 978-961-7078-22-0 (PDF) Predgovor Obdobje pandemije koronavirusa SARS-CoV-2 je vsem težavam navkljub za učitelje molekularnih ved o življenju tudi priložnost, da mehanizme okužbe, replikacije virusa in odgovora človeka na okužbo izrabimo pri izvedbi študija. S tem so pojmi, ki se sicer zdijo morda abstraktni, dobili bolj oprijemljivo podobo. Hkrati je na primeru SARS-CoV-2 mogoče vsakodnevno spremljati, kako pomemben je prispevek raziskovalcev za razumevanje virusa in s tem za premagovanje bolezni. Pri izbirnem strokovnem predmetu Molekularna biotehnologija na magistrskem študijskem programu Biokemija smo na Univerzi v Ljubljani, Fakulteti za kemijo in kemijsko tehnologijo, spomladi 2021 izvedli serijo kratkih seminarjev, na katerih so študentje predstavili zasnovo protikovidnih cepiv, njihov način proizvodnje in rezultate kliničnih testiranj. Nekatera od predstavljenih cepiv smo v času obravnave na seminarjih že uporabljali v Sloveniji, o drugih se je govorilo, tretja so bila še v fazi poskusne proizvodnje, a sem jih vključil v seminarje zaradi drugačnega principa delovanja. Vesel sem bil, da so študentje sami predlagali, da bi povzetke seminarjev izdali tudi kot brošuro. Ker smo se nadejali, da bodo med bralci tudi številni nebiokemiki, smo se odločili, da povzetke seminarjev napišemo nekoliko bolj poljudno kot bi jih sicer, hkrati pa nismo želeli bistveno širiti obsega, zato nekateri celični in imunski procesi niso natančneje razloženi. Upam, da prispevki v zborniku ne bodo prezahtevno branje in da boste po pregledu brošure bolje razumeli, kako so posamezna cepiva sestavljena, kako delujejo in kako učinkovita so. Brošura, ki je pred vami, povzema poznavanje cepiv sredi meseca maja 2021, a se je urejanje žal zavleklo do konca leta. V prihodnjih mesecih in letih bo na tem področju zagotovo veliko novega, saj se bodo pojavljale nove variante virusa in izboljšane verzije cepiv. Za zdaj pa je to verjetno najbolj celovit pregled cepiv proti virusu SARS-CoV-2 v slovenščini. Marko Dolinar Vsebina Splošno o virusih in variantah SARS-CoV-2 .......................................................................... 5 Molekularnobiološke značilnosti SARS-CoV-2 in prvi aktualni mutanti .................................. 6 Interakcija SARS-CoV-2 s tarčno celico ................................................................................ 8 RNA-cepiva ........................................................................................................................... 9 Značilnosti cepiva proizvajalca Moderna ...........................................................................10 Rezultati kliničnih testiranj cepiva proizvajalca Moderna ...................................................11 Značilnosti cepiva proizvajalca Pfizer / BioNTech .............................................................12 Rezultati kliničnih testiranj cepiva proizvajalca Pfizer / BioNTech ......................................13 Primerjava mRNA-cepiv ....................................................................................................14 Vektorska cepiva ..................................................................................................................15 Značilnosti cepiva proizvajalca AstraZeneca .....................................................................16 Rezultati kliničnih testiranj cepiva proizvajalca AstraZeneca .............................................17 Značilnosti cepiva proizvajalca Johnson & Johnson / Janssen ..........................................18 Značilnosti cepiva proizvajalca Gamaleya .........................................................................19 Značilnosti cepiva proizvajalca CanSino ...........................................................................21 Primerjava vektorskih cepiv ..............................................................................................22 Inaktivirana cepiva ................................................................................................................23 Značilnosti cepiv proizvajalcev Sinopharm in Sinovac .......................................................24 Značilnosti cepiva proizvajalca Bharat Biotech ..................................................................25 Primerjava inaktiviranih cepiv ............................................................................................26 Cepiva iz delov patogena .....................................................................................................27 Značilnosti cepiva proizvajalca Novavax ...........................................................................28 Značilnosti cepiva proizvajalca Vector ..............................................................................30 Značilnosti cepiva proizvajalca VBI Vaccines ....................................................................31 Primerjava cepiv iz delov patogena ...................................................................................32 Uporabnost obstoječih cepiv proti novim variantam virusa SARS-CoV-2 ..............................33 Opuščena cepiva ..................................................................................................................35 Viri ........................................................................................................................................37 Seznam kratic in okrajšav ACE2 angiotenzin konvertaza 2 APC antigen predstavitvene celice CAR receptor za coxsackieviruse in adenoviruse CoV koronavirus COVID-19 koronavirusna bolezen 2019 DNA deoksiribonukleinska kislina DSPC 1,2-distearoil- sn-glicero-3-fosfoholin EMA Evropska agencija za zdravila ER endoplazemski retikulum eVLP virusom podobni delec z ovojnico HBCD 2-hidroksipropil-β-ciklodekstrin HEK293 človeške embrionalne ledvične celice 293 ITR obrnjene končne ponovitve MBP vezavni protein za maltozo MHC poglavitni histokompatibilnostni kompleks mRNA informacijska RNA ORF odprt bralni okvir PEG polietlienglikol PER.C6 človeške embrionalne celice mrežnice RBD receptor vezavna domena RNA ribonukleinska kislina SARS hudi akutni respiratorni sindrom TMPRSS2 transmembranska serinska proteaza 2 VLP virusom podobni delec WHO Svetovna zdravstvena organizacija Splošno o virusih in variantah SARS-CoV-2 Marko Dolinar Virusi so sestavljeni iz virusne ovojnice in v njej aminokisline in na koncu nova aminokislina, shranjene nukleinske kisline (DNA ali RNA). Ta npr. D614G pomeni, da je aminokislina D zapisuje proteine, potrebne za vstop virusa v (asparaginska kislina) na mestu 614 zamenjana tarčno celico in njegovo razmnoževanje. Virusu z aminokislino G (glicin). Uporabljamo namreč rečemo tudi virusni delec ali virion. enočrkovne oznake aminokislin, sicer pa obstajajo tudi tričrkovne (npr. Asp za Ovojnica je pri številnih virusih sestavljena asparaginsko kislino, Gly za glicin). samo iz proteinov, pri drugih pa je lahko zunanji ovoj iz dvojne plasti lipidov, med katere so Svetovna zdravstvena organizacija (WHO) vstavljeni proteini. Virus SARS-CoV-2 ima stalno spremlja viruse, ki predstavljajo grožnjo lipidno ovojnico, ki izhaja iz celičnih membran za zdravje večjega števila ljudi. Pri virusu celic, v katerih se je virus predhodno namnožil. SARS-CoV-2, ki je sprožil koronavirusno Med virusnimi proteini ovojnice je pri pandemijo, vemo, da imajo mutirane variante SARS-CoV-2 še posebej pomemben protein virusa lahko precej drugačne lastnosti kot sprva bodice (označujemo ga s črko S), s katerim se opisane različice. WHO za vsako od variant, za virus pripne na tarčni protein (receptor) na katero sumijo, da bi lahko bila nevarna, površini človeških celic, kar predstavlja prvo določijo status 'pozornost vzbujajoče različice' stopnjo okužbenega cikla. (angl. variant of concern, VOC). Na te so potem epidemiologi še posebej pozorni in spremljajo Proteini so sestavljeni iz več deset, največkrat njihovo širitev, kot je to trenutno aktualno z pa nekaj sto aminokislin, ki so nanizane v različico omikron. Poleg pozornost vzbujajočih zaporedje in se zvijejo v tridimenzionalno različic WHO vodi tudi seznam 'zanimanje strukturo. Zaporedje aminokislin določa, v vzbujajočih različic' (angl. variant of interest, kakšno obliko se bo protein zvil in prav oblika VOI). proteina je tista, ki omogoča njegovo pravilno delovanje. Pri virusih proteine običajno Več kot eno leto od pojava epidemije virusa označujemo s kratkimi oznakami, ki jih SARS-CoV-2 smo variante (lahko jih imenujemo uporabljamo tudi za poimenovanje genov, ki te tudi 'sevi') tega virusa poimenovali po državah, proteine zapisujejo. Pri na novo opisanih kjer so jih prvič opazili, oziroma od koder so se organizmih in virusih včasih gene razširile v druge države po svetu. Poleg teh poimenujemo tudi z oznako ORF in številko. Pri oznak so variante imele še številske kode, ki so tem ORF pomeni 'odprt bralni okvir', to je del bile za isto različico virusa v različnih genoma, ki ga celica lahko prebere kot podatkovnih bazah lahko različne. Konec maja zaključeno celoto in na njegovi osnovi 2021 pa je WHO sprejel odločitev o sintetizira protein. poimenovanju različic. Po novem so jih, tudi za nazaj, poimenovali po grških črkah. Prva Pri virusih, ki ob hitrem razmnoževanju tudi opisana (kitajska oz. vuhanska) različica ni mutirajo, se postopno spreminjajo posamezne dobila posebnega imena. Tako imenovana aminokisline v zaporedju. Ko prvič določimo britanska (oz. angleška) različica je dobila aminokislinsko zaporedje nekega proteina, bi oznako alfa, južnoafriška beta, brazilska gama, to lahko označili kot prvotno zaporedje. Ko se indijska pa delta. V tem biltenu, ki vključuje na nekem mestu v zaporedju zaradi mutacije podatke, relevantne maja 2021, uporabljamo pojavi spremenjena aminokislina, ta mutirana še oznake, ki so bile v veljavi takrat. mesta označimo tako, da navedemo najprej prvotno aminokislino, sledi zaporedna številka 5 Molekularnobiološke značilnosti SARS-CoV-2 in prvi aktualni mutanti Anže Karlek in Saša Slabe Splošne značilnosti SARS-CoV-2 Koronavirusi (CoV) spadajo v družino Po vstopu viriona v tarčno celico se genomska Coronaviridae, ki se deli na dve poddružini, RNA prevede v poliproteina 1a in 1ab, ki se Letovirinae in Orthocoronavirinae. Slednja ima razcepita v 16 nestrukturnih proteinov. Ti štiri rodove, in sicer alfakoronaviruse, skupaj tvorijo replikacijsko-transkripcijski betakoronaviruse, gamakoronaviruse in kompleks, ki se nahaja v veziklih z dvojno deltakoronaviruse. SARS-CoV-2, ki povzroča membrano. V teh veziklih potečeta replikacija koronavirusno bolezen COVID-19, spada med in transkripcija virusne RNA. Nastala mRNA betakoronaviruse. služi kot matrica za sintezo virusnih strukturnih proteinov. Nukleotidno zaporedje genoma Koronavirusi pri ljudeh povzročajo predvsem SARS-CoV-2 je 80-odstotno identično dihalna obolenja, pri živalih pa prebavna. Pri zaporedju virusa SARS-CoV(-1), ki je povzročil ljudeh so simptomi v glavnem blagi, izjema so epidemijo leta 2002, in 54-odstotno identično z imunokompromitirane osebe, pri katerih se virusom MERS-CoV, ki je povzročil epidemijo lahko razvije pljučnica ali bronhitis. Vse do prve leta 2012. epidemije leta 2003, ki jo je povzročil SARS-CoV, so okužbe s koronavirusi veljale za Protein bodice nesmrtonosne. SARS-CoV-1 je prešel na Protein bodice (S) je glikoprotein virusne človeka z živali (najverjetneje netopirjev) – ovojnice, ki sodeluje v patogenezi COVID-19. torej gre za zoonotski prenos. Celoten protein bodice sestavlja 1273 Struktura genoma SARS-CoV-2 aminokislinskih ostankov, ki so organizirani v dve področji, S1 in S2, med njima pa je Genom SARS-CoV-2 je enoverižna, pozitivno cepitveno mesto. usmerjena RNA, dolga 29 903 nt. Sestavlja jo 14 odprtih bralnih okvirjev (ORF), ki zapisujejo 29 Virus se veže na protein ACE2 na površini proteinov (slika 1). Molekula RNA vsebuje 3'- in tarčnih celic z receptor vezavno domeno (RBD), 5'- neprevajajoči se regiji (3'- in 5'-UTR), 5'-kapo ki je del področja S1. Domena RBD velja za in poli(A)-rep na 3'-koncu. Na 5'-koncu najbolj variabilen del proteina S. kodirajoče regije je ORF1a/b, ki obsega velik del Sledi cepitev med S1 in S2, vendar obe genoma in zapisuje poliprotein 1a (pp1a) ter podenoti ostaneta prostorsko blizu. Podenota poliprotein 1ab (pp1ab). Ostali odprti bralni S2 sodeluje pri spojitvi viriona in membrane okvirji zapisujejo strukturne proteine: protein tarčne celice. Postopek vezave virusa na tarčno bodice (S), membranski protein (M), protein celico je podrobneje opisan v naslednjem ovojnice (E) in protein nukleokapside (N). poglavju. Slika 1: Shematski prikaz genoma virusa SARS-CoV-2. Molekula RNA vsebuje 5'-kapo, vodilno zaporedje (L), poliA rep in 3'- ter 5'- neprevajajoči se regiji (UTR). Kodirajoče zaporedje sestavljajo ORF1a, ORF1b, zapis za protein bodice (S), ORF3a, zapis za protein ovojnice (E), zapis za membranski protein (M), ORF6, ORF7a, ORF7b, ORF8, zapis za protein nukleokapside (N) in ORF10. 6 Prvi aktualni mutanti in njihov pomen povzroči močnejše povezovanje ter tako večjo verjetnost okužbe. Druge pomembne mutacije Pri podvojevanju virusne RNA v okuženi celici so še delecija ∆69/70, ki prav tako spremeni stalno prihaja do napak, ki se zaradi odsotnosti interakcijo z ACE2, in P681H, ki pripomore k učinkovitih popravljalnih mehanizmov ne hitrejšemu nastajanju proteina bodice v popravijo. Tako nastanejo mutacije, s tem pa celicah. novi sevi, ki imajo lahko pomembne posledice za globalno zdravstvo. Novi mutanti Južnoafriški sev se je prvič pojavil v oktobru SARS-CoV-2 se lahko hitreje širijo med ljudmi, 2020. Trenutno ni dokazov, ki bi kazali, da je lahko povzročajo spremenjeno obliko bolezni, povezan s težjim potekom bolezni, vendar pa se izognejo nekaterim diagnostičnim testom in se, zaradi mutacij v regiji za vezavo na receptor, zmanjšajo učinkovitost tarčnih zdravil in/ali lahko izogne protitelesom proti nemutirani cepiv. obliki. Poleg mutacije N501Y, ki je enaka kot pri britanskem sevu, ima še dve pomembni Virus SARS-CoV-2 sodi med viruse z dednim mutaciji v regiji proteina bodice, ki se povezuje zapisom v obliki RNA, za katere sicer v z receptorjem – K417N in E484K. Kombinacija splošnem velja, da pri vsaki podvojitvi pridobijo teh mutacij spremeni obliko vezavnega dela in približno eno napako. Vendar pa koronavirusi poveča možnost za pobeg imunskemu sistemu. zaradi prisotnosti popravljalnega encima ekso- ribonukleaze mutirajo s polovično hitrostjo Brazilski sev so prvič opisali v januarju 2021 in virusa gripe in četrtino hitrosti virusa HIV. ima 17 mutacij, najbolj značilne pa so mutacije, ki so prisotne tudi pri drugih sevih – K417T, Že v januarju 2020 se je pojavila mutacija E484K in N501Y. Različica je zelo podobna D614G, ki se je hitro razširila po svetu in do južnoafriškemu sevu in ima spremenjeno junija 2020 nadomestila sev, ki so ga prvič vezavo na receptor ACE2, hkrati pa analize identificirali na Kitajskem in katerega izvor še ni kažejo na večjo možnost ponovne okužbe po že natančno preučen. Ta mutacija omogoča preboleli koronavirusni bolezni. hitrejše in učinkovitejše pritrjevanje virusa na receptor na človeških celicah. Nigerijski sev so odkrili avgusta 2020. Zanj je značilna mutacija P681H, ki je prisotna tudi pri Britanski sev se je pojavil septembra 2020 v britanskem sevu, a nima nobene druge Angliji in je povezan s hitrejšim širjenjem mutacije, značilne za britansko varianto, pač pa bolezni, ki pa ne poteka v težji obliki. Sev nekatere druge. Trenutno ni nobenih dokazov, definira 23 mutacij, od katerih je da bi se ta sev širil hitreje, povzročal težjo najpomembnejša N501Y na mestu, kjer se bolezen, ali vplival na delovanje cepiv. protein bodice veže na receptor ACE2 in 7 Interakcija SARS-CoV-2 s tarčno celico Urban Hribar Virus SARS-CoV-2 je sestavljen iz več predvsem proteaza TMPRSS2. Alternativni komponent. Genetski zapis nosi nukleinska način aktivacije pa poteka v primerih, ko celica kislina RNA, ki znotraj gostiteljske celice z endocitozo "pogoltne" virusni delec in sicer omogoča nastanek novih virusov. Virus tako, da virus obda z lipidnim ovojem, ki ga sestavljajo tudi lipidna membrana, enaka tistim ločuje od notranjosti celice. Tako obdan virus na gostiteljskih celicah, in štiri vrste strukturnih lahko napade encim katepsin L, za katerega je proteinov. Eden izmed teh je protein bodice, ki znano, da se pogosto izloča iz celičnih kot trimer (tri enake molekule skupaj), zasidran organelov lizosomov. Proteaza katepsin L cepi v virusno membrano, štrli iz virusa in mu protein bodice in ga s tem aktivira, tako da omogoča interakcijo s tarčnimi celicami. pride do zlivanja lipidnega ovoja z virusom in lizosoma. Sledi delna razgradnja virusa, pri Pri okužbi s SARS-CoV-2 se virusni protein čemer RNA pobegne iz ovojnice in se sprosti v bodice veže na receptorski protein ACE2 na notranjost celice. površini tarčnih celic. Encimi tarčne celice cepijo protein bodice na točno določenem Razumevanje mehanizma vstopa virusa v celico mestu, kar omogoči njegovo aktivacijo. nam razkriva možne tarče za razvoj Aktivacija povzroči spremembo zgradbe protivirusnih zdravil. Širjenje okužbe v telesu bi proteina bodice, hkrati pa se virusna lahko zaustavili z inhibicijo proteaz, ki membrana zlije s celično membrano in virusna omogočajo aktivacijo proteina bodice ter vstop RNA se sprosti v notranjost celice (slika 2). Tam virusne RNA v notranjost celice. Pri tem se virusna RNA začne podvojevati, sočasno pa moramo upoštevati oba mehanizma aktivacije se sintetizirajo tudi virusni proteini. proteina bodice ter dejstvo, da nekatere celice najpogosteje uporabljajo prvi mehanizem Aktivacija proteina bodice poteka najpogosteje aktivacije, nekatere pa drugega. na celični membrani, kjer protein cepi Slika 2: Interakcija virusa SARS-CoV-2 s tarčno celico. Virus SARS-CoV-2 se s proteinom bodice na svoji površini veže na celični receptor ACE2. V naslednjem koraku proteaza TMPRSS2 cepi protein bodice na točno določenem mestu, kar omogoči njegovo aktivacijo. Aktivacija povzroči spremembo zgradbe proteina in zlivanje virusne membrane s celično membrano. Poleg tega načina vstopa obstaja še alternativni način, pri katerem sodeluje proteaza katepsin L. 8 RNA-cepiva RNA-cepiva so cepiva, ki temeljijo na molekuli mRNA in predstavljajo nov tip cepiv z velikim potencialom. Molekula mRNA vsebuje zapis za protein, ki je značilen za patogen, proti kateremu je cepivo namenjeno. Proteinu, proti kateremu nastanejo protitelesa, na splošno rečemo antigen. V primeru cepiv proti COVID-19, ki jih proizvajata Moderna in Pfizer / BioNTech, molekula mRNA nosi zapis za protein bodice virusa SARS-Cov-2, ta pa je zapakirana v lipidne nanodelce. Po vstopu v celico lipidni delec razpade, pri tem pa se molekula mRNA sprosti v citoplazmo, kjer poteče sinteza proteina bodice. To vodi v aktivacijo imunskega sistema, pri čemer nastanejo protitelesa in imunske celice (slika 3), ki tuji protein prepoznajo in uničijo. V človeškem telesu se tako shranijo navodila, kako se boriti s SARS-CoV-2, kar omogoča, da imunski sistem ob kasnejši okužbi z virusom zazna proteine bodice na njegovi površini in prepreči njegovo razmnoževanje, s tem pa razvoj bolezni. Slika 3: Mehanizem delovanja mRNA-cepiv. Lipidni nanodelci v procesu endocitoze vstopajo v celice (1, 2). V celici razpadejo (3), molekula mRNA pa se sprosti v citoplazmo. V citoplazmi se nato sintetizira protein bodice (4), ki se kasneje razgradi v proteasomu (5), del pa se prenese na površino celic (6). Peptidi, ki nastanejo po razgradnji proteina bodice, se na celični površini pojavijo vezani na molekule poglavitnega histokompatibilnostnega kompleksa I (MHC I). V primeru, da antigen z endocitozo vstopi v celice brez lipidov, se predstavi na površini s posredovanjem molekul MHC II (7). Sprožita se T-celični in B-celični imunski odziv. 9 Značilnosti cepiva proizvajalca Moderna Martina Lokar in Mateja Žvipelj Cepivo proizvajalca Moderna je namenjeno V drugem delu postopka tako nastale mRNA, ki preprečevanju bolezni COVID-19, ki jo povzroča so v vodnem okolju, pomešamo z lipidno fazo. virus SARS-CoV-2. V prvi vrsti je namenjeno Zaradi neugodnih interakcij med vodo in lipidi ljudem, starejšim od 18 let. Osnovano je na se slednji uredijo v kroglaste strukture (lipidne molekuli mRNA, ki nosi informacijo za sintezo nanodelce), ki v svojo notranjost sprejmejo proteina bodice, ki je v naravi prisoten na molekule mRNA. Take lipidne nanodelce lahko površini virusnega delca. Za učinkovito dostavo pripravimo relativno enostavno in hitro. Z molekule mRNA do tarčnih celic jo v procesu dodatkom pomožnih snovi za uravnavanje pH, proizvodnje zapakirajo v ovoj, zgrajen iz štirih povečanje stabilnosti in lažje injiciranje različnih lipidov. Lipidni ovoj nima samo pripravijo končno obliko cepiva, primerno za transportne vloge, ampak hkrati tudi zagotovi uporabo. zaščito molekule mRNA pred razgradnjo in ji Cepivo je potrebno injicirati v mišico tako omogoči, da v celicah opravi svojo (intramuskularno); en odmerek volumna 0,5 ml funkcijo. vsebuje 100 μg mRNA. Za dosego polne Po vnosu molekule mRNA v celico pride do zaščitenosti, ki jo to cepivo nudi (splošno velja, sinteze proteina bodice, ki sam po sebi ni da zaščita ni 100 %), je potrebno prejeti 2 nevaren, je pa za telo tuj in zato sproži imunski odmerka v priporočenem razmiku 28 dni. odziv. Pri tem nastajajo protitelesa, ki so Cepljena oseba je v polni meri zaščitena po 14 sposobna prepoznati protein bodice, dneh od prejema drugega odmerka. posledično pa tudi virus SARS-Cov-2. Cepivo torej ne vsebuje virusa, ampak samo Protitelesa, ki jih človek po cepljenju razvije, informacijo za sintezo ene izmed njegovih omogočijo hitrejše in bolj učinkovito uničenje komponent, kar pomeni, da se po cepljenju virusnih delcev, ki bi lahko zašli v telo. Tako bolezen COVID-19 ne more razviti. Poleg tega osebo zaščitijo pred okužbo oziroma razvojem je molekula mRNA dokaj nestabilna in se v bolezni COVID-19. telesu kmalu razgradi. Dodatno varnost pri Priprava cepiva poteka v dveh glavnih korakih. uporabi tega cepiva zagotavljajo lastnosti Najprej je potrebno sintetizirati molekule mRNA, saj ne more spremeniti dednega mRNA, kar poteka brez uporabe celic, in sicer s materiala človeka (ki je DNA), ali kako drugače procesom in vitro transkripcije. Pri tem procesu toksično vplivati na telo. Pomembne prednosti v reakcijsko mešanico vnesemo potrebne mRNA-cepiv so med drugim tudi hiter razvoj in gradnike, encime in matrico (DNA), ki izdelava, cena proizvodnje je nizka, hkrati pa predstavlja navodilo za sintezo molekul mRNA. lahko proizvedemo velike količine cepiva. 10 Rezultati kliničnih testiranj cepiva proizvajalca Moderna Katja Doberšek Zasnova kliničnih študij – kako je cepivo Varnost mRNA-1273 pridobilo dovoljenje za uporabo Najpogostejši neželeni učinki, ki so se pojavili Trenutno potekajo tri klinične študije cepiva pri večini testiranih prostovoljcev, so bili mRNA-1273 podjetja Moderna, ena izmed njih bolečina na mestu injiciranja (91,6 %), je v tretji fazi. Poteka od julija 2020 in glede na utrujenost (68,5 %), bolečine v mišicah (59,6 %) vmesne rezultate je v ZDA decembra 2020 in sklepih (44,8 %) ter mrazenje (43,4 %). Od pridobila dovoljenje EUA (angl . »Emergency tega je 0,2–9,7 % ljudi potrebovalo zdravila ali Use Authorization«). To dovoljenje omogoča zdravniško pomoč. Resni neželeni učinki, ki so uporabo učinkovine v primeru kemične, zahtevali zdravniško pomoč, so bili redki (1 %). biološke, radiološke ali jedrske grožnje, kar Neželeni učinki so bili pogostejši po prejemu vključuje tudi kužne bolezni. drugega odmerka cepiva in manj pogosti pri starejših od 65 let. Rezultati študije P301 Česa še ne vemo? Učinkovitost Glede na dostopne podatke še nimamo Cepivo po dveh odmerkih zagotavlja 95- informacij o trajanju zaščite tako po enem kot odstotno zaščito proti pojavu COVID-19 pri po dveh prejetih odmerkih cepiva. V mlajših od 65 let in 86-odstotno zaščito preiskovano skupino so bili vključeni starejših od 65 let. Po enem odmerku posamezniki, starejši od 18 let, zato še ne zagotavlja 80-odstotno zaščito, zaščita pred poznamo učinkovitosti in varnosti cepiva za hudim potekom bolezni pa je 100-odstotna. otroke. Študije na nosečnicah še niso bile Odstopanj glede na spol in prisotnost kroničnih izvedene. Zaradi premajhnega števila testiranih bolezni niso opazili. ni znano, kakšna je učinkovitost cepiva proti prenašanju okužbe in ali preprečuje tudi pojav asimptomatske oblike COVID-19. 11 Značilnosti cepiva proizvajalca Pfizer / BioNTech Jerneja Nimac in Peter Škrinjar Cepivo pod lastniškim imenom Comirnaty plazmidno DNA. Ta poleg zapisa za protein (BNT162b2, nelastniško: Tozinameran) sta v bodice vsebuje še promotor T7, 5'- in sklopu projekta 'Svetlobna hitrost' razvili 3'-neprevajajoči se regiji ter poli(A) rep. farmacevtski podjetji BioNTech in Pfizer. Plazmidno DNA je po uspešni izolaciji potrebno Cepivo spada med mRNA-cepiva za linearizirati z ustreznim encimom. preprečevanje COVID-19, ki jo povzroča virus Temu sledi drugi korak, in sicer in vitro SARS-CoV-2. transkripcija z RNA-polimerazo T7, ki izolirano Ključna komponenta cepiva Comirnaty je matrično DNA prepiše v aktivno učinkovino spremenjena molekula mRNA, ki je ujeta v tega cepiva – mRNA. Zaradi večje stabilnosti majhne kroglaste strukture – lipidne molekule mRNA se v procesu transkripcije nanodelce. Molekula mRNA nosi navodila za hkrati doda analog 5'-kape. Na koncu sledi sintezo mutiranega proteina bodice virusa pakiranje molekul mRNA v lipidne nanodelce, ki SARS-CoV-2. Zapis za ta protein tako ni nudijo zaščito in olajšan transport v celice. Da popolnoma enak tistemu, ki ga najdemo na dobimo končni produkt, je potrebno lipidnim površini virusnega delca – nekoliko je nanodelcem dodati še ostale komponente, ki spremenjen, kar izboljša lastnosti cepiva. Po uravnavajo pH in povečajo stabilnost cepiva. prejemu odmerka cepiva molekula mRNA, ki je Cepivo Comirnaty je dobavljivo v obliki ujeta v lipidni nanodelec, vstopi v človeške sterilnega koncentrata, ki se tik pred celice, lipidni nanodelec zaradi pogojev v celici intramuskularnim vnosom razredči z razpade, molekula mRNA pa se v citoplazmi 0,9-odstotnim natrijevim kloridom. En prevede v virusni protein bodice(slika 3). Ta odmerek vsebuje 30 µg mRNA. Za pridobitev protein telo prepozna kot tujega, aktivira se zaščite sta potrebna dva odmerka v razmaku 21 imunski odziv, to pa sproži nastanek protiteles dni, zaščita pa se razvije 7 dni po prejemu proti virusu oz. omenjenemu virusnemu drugega odmerka. Cepivo je do uporabe proteinu. Ob naslednji okužbi s SARS-CoV-2 potrebno shranjevati na ultra nizki temperaturi bodo ta protitelesa ščitila telo, saj bodo (to je med –80 °C in –60 °C), dva tedna pa ga je prepoznala virusni protein na površini in mogoče shranjevati tudi med –25 °C in –15 °C. nevtralizirala virus, še preden bi se ta lahko Prednost tega cepiva je, da se molekula mRNA namnožil. v gostiteljski celici ne podvojuje, prav tako se Postopek priprave cepiva Comirnaty razdelimo ne more vključiti v dedni material in ga na tri dele. V prvem koraku je potrebno v spremeniti. V celicah je prisotna kratek čas, celicah E. coli namnožiti ustrezno sestavljeno nato pa se razgradi. 12 Rezultati kliničnih testiranj cepiva proizvajalca Pfizer / BioNTech Ana Maklin in Nika Zaveršek Klinična testiranja Anafilaktična reakcija Proizvajalca Pfizer / BioNTech sta začetno Pri masovnem cepljenju so se pojavile redke klinično testiranje v Nemčiji (BNT162-01) anafilaktične reakcije na BNT162b2, za kar je začela s 4 kandidati: BNT162a1, BNT162b1, verjetno kriv PEG (polietilen glikol) 2000, ki BNT162b2 in BNT162c2 ter 486 sodelujočimi. V sestavlja lipidni delec, v katerega je ujeta 1. fazo kliničnega testiranja večje študije mRNA. (C4591001) sta se uvrstila 2 kandidata za Učinkovitost cepiva cepivo – BNT162b1 (zapis za domeno RBD proteina bodice) in BNT162b2 (zapis za celoten Učinkovitost cepiva so 12 dni po prvem protein bodice). V 1. fazi je sodelovalo 195 odmerku določili na 52-odstotno v primerjavi s prostovoljcev starih 1885 let, ki so prejeli 10, 20 placebom, 7 dni po drugem odmerku pa na ali 30 μg enega izmed 2 kandidatov. Rezultati 95-odstotno v primerjavi s placebom. Cepivo se so pokazali podobno učinkovitost in je izkazalo za učinkovito tudi pri študiji na veliki imunogenost obeh kandidatov. Zaradi manjše populaciji v Izraelu, kjer so dokazali, da cepivo reaktogenosti in sistemskih odzivov so izbrali v zadostni meri prepreči hujšo obliko bolezni in cepivo BNT162b2, ki je prešlo v fazo 2/3 da zadovoljivo zaščiti proti britanskem sevu kliničnih testiranj na večji populaciji. (B.1.1.7). Fazo 2/3 kliničnih testiranj so za BNT162b2 Nosečnice in otroci izvedli kot večnacionalno s placebom kontrolirano in dvojno slepo študijo. V študijo Trenutno poteka faza 2/3 kliničnih testiranj so bili vključeni kandidati, starejši od 16 let, z tudi pri nosečnicah in mladih v starosti 12–15 mediano starosti pri 52 letih. Veliko jih je imelo let, načrtujejo pa tudi testiranje otrok starih tudi kronične bolezni, kot so HIV, hepatitis C in 5–11 let in mlajših od 5 let. hepatitis B. V testih niso smeli sodelovati Osvežitveni odmerek in nove variante posamezniki z oslabljenim imunskim odzivom, vključno s tistimi, ki so prejemali Pri prejemnikih 2. odmerka iz 1. faze bodo imunosupresive. 43 548 kandidatov so razdelili testirali še učinkovitost, varnost in približno na polovico: 21 720 so jih cepili z imunogenost 3. odmerka cepiva po 6 ali 12 mRNA, 21 728 pa je prejelo placebo. mesecih. Zaradi širjenja novih sevov virusa so testirali nevtralizacijsko sposobnost vzorcev Prostovoljci, vključeni v študijo, so poročali o serumov cepljenih prostovoljcev na blagih in srednjih lokalnih ter sistemskih rekombinantnih virusih z mutacijami novih stranskih učinkih. Poročani lokalni stranski sevov. Vsi serumski vzorci so bili deloma učinki so bili manjši pri placebo skupini in se sposobni nevtralizacije novih variant. niso povečali po drugem odmerku. Beležili so Nevtralizacija južnoafriške variante B.1.351 je predvsem bolečino na mestu vboda. Sistemski bila kar za 2/3 slabša od nevtralizacije stranski učinki so se povečali po drugem originalnega seva. Potekajo tudi klinična odmerku cepiva. Beležili so izčrpanost, testiranja modificiranega cepiva, ki bi bolje glavobol, mrazenje, bolečino v mišicah in delovalo proti varianti B.1.351. sklepih ter vročino. Mladi so v vseh primerih poročali več stranskih učinkov kot starejši (> 55 let). 13 Primerjava mRNA-cepiv V Evropski uniji sta na voljo sta dve RNA-cepivi, ki sta si v marsičem podobni, vseeno pa so med njima tudi pomembne razlike, kakor je razvidno iz tabele 1. Tabela 1: Primerjava mRNA-cepiv (stanje maja 2021). Moderna Pfizer / BioNTech Ime mRNA-1273 BNT162b2, Comirnaty, tozinameran Tip cepiva mRNA mRNA Način v mišico (intramuskularno) v mišico (intramuskularno) injiciranja Redčenje tik pred uporabo: redčenje z 0,9 % / raztopino NaCl dve dozi po 100 µg dve dozi po 30 µg Doza (druga doza po 28 dneh) (druga doza po 21 dneh) Zaščita 14 dni po prejemu drugega odmerka 7 dni po prejemu drugega odmerka Shranjevanje –20 °C (do 6 mesecev) v temi –70 °C (do 6 mesecev) v temi Učinkovitost 94,1 % 95 % Starost 18 let in več 16 let in več Odobreno v da da EU Stabilizator: saharoza. Stabilizator: saharoza. Pomožne snovi: trometamol (Tris), Pomožne snovi: NaCl, KCl, KH Tris/HCl, ocetna kislina (CH 2PO4, Sestava 3COOH), Na natrijev acetat (CH 2HPO4. 3COONa). Lipidi: holesterol, DSPC, ALC-0315, Lipidi: holesterol, DSPC, SM-102, ALC-0159. PEG2000-DMG. Molekula mRNA ne more spremeniti dednega materiala. Opomba Nudita 100-odstotno zaščito pred hudim potekom bolezni COVID-19. 14 Vektorska cepiva Vektorska cepiva so cepiva, ki za vnos zapisa za določen antigen v celico izkoriščajo za človeka nenevarne viruse. Primer takšnih virusov so adenovirusi. Te spremenijo tako, da jim izbrišejo gene, ki so pomembni za podvajanje in prepisovanje adenovirusne DNA, vstavijo pa zapis za antigen. V primeru cepiv proti COVID-19 (AstraZeneca / Oxford University, Johnson & Johnson / Janssen, Sputnik V in CanSino) vstavijo zapis za protein bodice. Tako spremenjeni adenovirusi po cepljenju vstopijo v celice in rekombinantno DNA sprostijo v jedro. DNA se prepiše v mRNA, ta se prenese v citoplazmo, kjer se sintetizira protein bodice (slika 4). Prisotnost tega proteina povzroči močan imunski odgovor. Ta je tako celični kot humoralni. Izraz celični imunski odziv pomeni, da nastanejo imunske celice (limfociti T), ki so sposobne prepoznati okužene celice in jih uničiti. Humoralni odziv pa se nanaša predvsem na razvoj protiteles v limfocitih B. Protitelesa nato krožijo po krvi in vežejo tuje proteine (kot je npr. protein bodice), proti katerim so se razvila. Slika 4: Mehanizem delovanja vektorskih cepiv. Gensko spremenjeni adenovirusi se vežejo na receptor CAR in vstopijo v človeške celice, kjer v jedro sprostijo rekombinantno DNA. Tam v procesu transkripcije nastane mRNA, ki nosi zapis za virusni protein bodice. Molekula mRNA se nato transportira v citoplazmo, kjer se prične sinteza proteina bodice. 15 Značilnosti cepiva proizvajalca AstraZeneca Karin Dobravc Škof in Matija Ruparčič Cepivo britansko-švedskega farmacevtskega adenovirusa ChAdOx1 izbrisali gen E1, ki je podjetja AstraZeneca so zasnovali raziskovalci ključen za aktivacijo vseh ostalih adenovirusnih Univerze v Oxfordu (Velika Britanija). genov, na njegovo mesto pa so umestili gen, ki Namenjeno je zaščiti pred okužbo z virusom vsebuje informacijo za sintezo glikoproteina SARS-CoV-2, ki povzroča bolezen COVID-19. bodice. Poleg tega so izbrisali tudi gen E3, ki za Deluje po principu vektorskega sistema z pripravo gensko spremenjenjih adenovirusov adenovirusom. Cepivo vsebuje gensko ni potreben, del gena E4 pa so zamenjali z spremenjen šimpanzji adenovirus ChAdOx1, ki ekvivalentom iz človeškega adenovirusa zapisuje glikoprotein bodice virusa HuAd5. SARS-CoV-2. Adenovirusu so predhodno Tako pripravljeno DNA so nato vnesli v gensko izbrisali gene, ki so ključni za podvajanje in spremenjene človeške embrionalne ledvične prepisovanje adenovirusne DNA. celice (HEK293), ki v genomu vsebujejo gen E1 Gensko spremenjeni adenovirusi po cepljenju iz adenovirusa HuAd5. S tem pristopom (trans- vstopijo v človeške celice, kjer v jedro sprostijo komplementacije) dosežejo nastajanje rekombinantno DNA. Tam nato v procesu rekombinantnih adenovirusov, ki jih izolirajo z prepisovanja nastane mRNA z zapisom za ultracentrifugiranjem v gradientu CsCl. protein bodice, nato pa se mRNA transportira v Izoliranim virusom za konec dodajo še citoplazmo, kjer se prične sinteza proteina. pomožne snovi, ki služijo kot emulgatorji, uravnalci pH in prezervativi. Nastali glikoprotein bodice sam po sebi ni nevaren, vendar pa ga celica prepozna kot Cepivo se injicira v mišico (intramuskularno), in tujega in zato sproži imunski odgovor, pri sicer v odmerku 0,5 mL. Če želimo doseči čemer nastanejo protitelesa, ki specifično največjo možno zaščito, ki jo cepivo nudi, se je prepoznajo ter nevtralizirajo protein. Cepljenje potrebno po 12 tednih cepiti še z drugim omogoča telesu vzpostaviti dovolj veliko zalogo odmerkom; s tem dosežemo 82-odstotno protiteles in imunskih celic, ki bodo ob zaščito. Cepivo je namenjeno osebam, morebitni okužbi prepoznali proteine bodice starejšim od 18 let. Zaradi adenovirusnega na virusu SARS-CoV-2 in ga pravočasno uničile, proteinskega ovoja (nukleokapside), ki ščiti preden bi prišlo do razvoja bolezni. rekombinantno DNA, vektorskih cepiv ni potrebno hraniti pri zelo nizkih temperaturah, Priprava cepiva se začne s sintezo zato jih hranimo v hladilniku (2–8 °C), kjer so rekombinantne adenovirusne DNA. S obstojna nekaj mesecev. homologno rekombinacijo so iz DNA naravnega 16 Rezultati kliničnih testiranj cepiva proizvajalca AstraZeneca Andrej Race Zasnova kliničnih študij in učinkovitost AstraZeneca je 7. decembra 2020 objavila tudi z večjim intervalom med odmerki. rezultate 4 kliničnih študij svojega cepiva Ugotovitev, da je 12-tedenski interval med AZD1222. Te so vključevale 17 177 udeležencev odmerki najuspešnejši, podpira to hipotezo. v Veliki Britaniji, Braziliji in Južni Afriki. Rezultati Varnost in stranski učinki so pokazali 76-odstotno učinkovitost cepiva in 67-odstotno zmanjšanje prenosa virusa. Dne Poleg običajnih stranskih učinkov, ki se 22. marca 2021 so objavili rezultate tretje faze pojavljajo tudi po cepljenju z drugimi cepivi, se klinične študije v ZDA, kjer trdijo, da je je pri tem pojavilo še možno povečano tveganje učinkovitost cepiva 79-odstotna, čeprav za nastanek krvnih strdkov. Evropska agencija neodvisna komisija zdravstvenih strokovnjakov za zdravila (EMA) je objavila, da te povezave ni, trdi, da je do deset odstotkov manjša. vendar se je izkazalo, da je cepivo lahko povezano z zelo redkimi primeri nastanka Povečana učinkovitost z daljšim intervalom krvnih strdkov v povezavi s trombocitopenijo. med odmerki Pri 20 milijonih cepljenih v Veliki Britaniji in v Opazili so, da je učinkovitost večja Evropski uniji so zabeležili skupaj 25 primerov (90-odstotna) pri osebah, ki so prejele te bolezni. Odbor je menil, da dokazana polovično prvo dozo. Do tega verjetno pride, učinkovitost cepiva pri preprečevanju ker manjša prva doza omogoča hitrejši razvoj hospitalizacije in smrti zaradi COVID-19 spominskih imunskih celic, pri čemer to lahko odtehta zelo majhno verjetnost za razvoj te dosežemo redke bolezni. 17 Značilnosti cepiva proizvajalca Johnson & Johnson / Janssen Mirsad Mešić Cepivo Johnson & Johnson / Janssen (JNJ- genoma adenovirusa, ki pa ima izbrisano regijo 78436735 ali Ad26.COV2.S) je enodozno E3 in spremenjen odprti bralni okvir 6 regije E4 virusno vektorsko cepivo, osnovano na (E4orf6). Cepiva na osnovi vektorjev Ad26 človeškem adenovirusu 26. Ta je spremenjen izdelujejo z uporabo gojenih embrionalnih celic tako, da vsebuje gen za protein bodice virusa mrežnice (PER.C6), človeške celične linije, ki SARS-CoV-2 v stabilizirani konformaciji. omogoča nastanek adenovirusov, ki sami niso Stabilizirana različica proteina bodice vključuje sposobni replikacije. Celice namreč vsebujejo dve mutaciji. Običajno prisotni aminokislini na gen E1, ki pri rekombinantnih adenovirusih ni mestih 986 in 987 sta zamenjani s prolinom prisoten, da se virus po prejemu cepiva ne (K986P, V987P), uvedena pa je še mutacija more več razmnoževati. mesta cepitve s furinom (R682S, R685G). Cepivo Janssen COVID-19 vključuje naslednje Po injiciranju cepiva v telo se adenovirusi sestavine: rekombinantni adenovirus tipa 26, ki vežejo na proteine na površini celic. Celica virus ni sposoben podvojevanja in nosi zapis za zajame v mehurček in ga potegne vase. Ko protein bodice virusa SARS-CoV-2, monohidrat vstopi v celico, adenovirus pobegne iz citronske kisline, trinatrijev citrat dihidrat, endosoma in potuje do jedra ter vanj potisne etanol, 2-hidroksipropil-β-ciklodekstrin svojo DNA. V jedru pride do sinteze mRNA za (HBCD), polisorbat 80 in natrijev klorid. protein bodice, čemur sledi prenos mRNA v Klinične študije so pokazale, da je imel en citoplazmo in prevajanje RNA v protein. Nastali odmerek cepiva v ZDA 72-odstotno proteini bodice se prenesejo na celično učinkovitost in nižjo učinkovitost (66 % v površino. Štrleče bodice in fragmentirane Latinski Ameriki, 57 % v Južni Afriki) v državah, proteine lahko potem prepozna imunski kjer so razširjene bolj nalezljive različice. Cepivo sistem. nudi 85-odstotno učinkovitost pri zaščiti pred Genom adenovirusa je linearna, hospitalizacijo v vseh delih sveta. nesegmentirana, dvoverižna molekula DNA z Cepivo se injicira v nadlaktno mišico, imunost obrnjenimi zaporedji končnih ponovitev (ITR) se razvije dva tedna po cepljenju. Cepivo se na obeh koncih. Vektorski sistem za shranjuje v hladilniku pri temperaturi med 2 °C razmnoževanje Ad26 je sestavljen iz in 8 °C. Najpogostejši neželeni učinki, ki se adapterskega plazmida in kozmida. Adapterski običajno pojavijo v enem ali dveh dneh po plazmid vsebuje levi konec genoma (levi ITR in prejemu cepiva, so: rdečina na mestu signal za pakiranje), namesto regije E1 pa injiciranja, oteklina, utrujenost, glavobol, vsebuje zapis za protein bodice. Navzdol od bolečine v mišicah. ZDA so cepivo odobrile za regije E1 je zaporedje dolžine 2,5 kb in nujno uporabo 27. februarja 2021, EU pa omogoča homologno rekombinacijo s 11. marca 2021. kozmidom. Kozmid vsebuje večino preostalega 18 Značilnosti cepiva proizvajalca Gamaleya Paula Horvat in Almina Tahirović Sputnik V je vektorsko cepivo proti Predklinična in klinična testiranja cepiva SARS-CoV-2, ki so ga razvili na Raziskovalnem Sputnik V inštitutu za epidemiologijo in mikrobiologijo Pred začetkom kliničnih testiranj so cepivo Gamaleya v Rusiji. Je prvo registrirano cepivo Sputnik V testirali na poskusnih živalih. Te so proti SARS-CoV-2 na svetu, ime pa je dobilo po najprej cepili, nato pa okužili z virusom prvem sovjetskem vesoljskem satelitu. Cepivo SARS-CoV-2 in ugotovili, da jih je cepivo je na voljo v dveh oblikah, in sicer v tekoči in zaščitilo pred okužbo s tem virusom. liofilizirani. Liofilizirano različico cepiva je lažje prevažati, saj je ni potrebno shranjevati pri Faze I in II nizki temperaturi. Po podatkih Ministrstva za zdravje Ruske federacije naj bi cepivo Prva faza kliničnih testiranj je potekala med zagotavljalo imunost proti virusu SARS-CoV-2, 18. junijem in 3. avgustom 2020 ter vključevala ki povzroča COVID-19, do dve leti. 76 prostovoljcev. Najpogostejši neželeni učinki, o katerih so poročali prostovoljci, so bili Z vektorskimi cepivi lahko v celico vnesemo in bolečina na mestu vboda (58 %), povišana izrazimo gene z zapisi za antigene, ki jih želimo telesna temperatura (50 %), glavobol (42 %), predstaviti imunskemu sistemu. Ruski utrujenost (28 %) in bolečina v mišicah ter raziskovalci so kot vektor uporabili adenovirus. sklepih (24 %). Resnih neželenih učinkov niso Adenovirusom so izbrisali gen E1, ki je zabeležili. Neželeni učinki so bili pogostejši po odgovoren za aktivacijo vseh ostalih prejemu drugega odmerka. Na podlagi adenovirusnih genov, na njegovo mesto pa rezultatov so zaključili, da je cepivo varno in vstavili zapis za protein bodice. Takšen sproži močan humoralni in celični imunski adenovirus ne more povzročiti bolezni, lahko odziv. pa z njim vnesemo v celice zapis za koronavirusni protein S. Celice, v katere vstopi Faza III tako prirejen adenovirus, na osnovi zapisa Tretja faza kliničnih testiranj se je začela sintetizirajo protein bodice, imunski sistem pa 7. septembra 2020. Poteka v 25 bolnišnicah in ga nato prepozna kot tujek in sproži nastanek poliklinikah v Moskvi. V študijo je vključenih protiteles, ki nas varujejo pred okužbo. 21 977 posameznikov, starejših od 18 let, ki so Sputnik V je cepivo z dvema odmerkoma. Prvi jih naključno razdelili v dve skupini, pri čemer je odmerek vsebuje adenovirusni vektor 26 ena skupina prejela cepivo, druga pa placebo. (Ad26; 1 x 1011 virusnih delcev) z vstavljenim Vsi vključeni so podpisal informirano soglasje in zapisom za protein bodice. Ponovno cepljenje opravil zdravniški pregled. Iz študije so izključili se izvede 21 dni po prejemu prvega odmerka. bolnike s HIV, hepatitisom B in C ter sifilisom, Drugi odmerek vsebuje adenovirusni vektor 5 prav tako v študiji niso sodelovali posamezniki, (Ad 5; 1 x 1011 virusnih delcev), ki ga pripravijo ki so že preboleli COVID-19, prejemali na enak način kot Ad26. Takšen režim cepljenja imunosupresivno terapijo v zadnjih treh naj bi najučinkoviteje aktiviral imunski sistem in mesecih, darovali kri v zadnjih dveh mesecih, zagotavljal dolgotrajno imunost. Približna cena zbolelih za anoreksijo, v preteklosti odvisnih od cepiva je 7,5 USD na odmerek in se priporoča alkohola in tistih, ki so na mestu injiciranja imeli za osebe, ki so starejše od 18 let. Cepivo veliko tetovažo. Sputnik V poleg aktivne učinkovine vključuje naslednje sestavine: tris-(hidroksimetil)- aminometan, natrijev klorid, saharozo, Učinkovitost magnezijev klorid heksahidrat, dinatrijev EDTA dihidrat, polisorbat 80, etanol in vodo. 19 Cepivo naj bi po dveh odmerkih zagotavljalo Sputnik V – AstraZeneca: preskusi cepiv proti 91,6-odstotno zaščito proti COVID-19. Zaščita COVID-19 naj bi veljala za vse starostne skupine, vključno Sklad RDIF (Russian Direct Investment Fund), s starejšimi od 60 let. inštitut Gamaleya, AstraZeneca in R-Pharm so Varnost 21. decembra 2020 podpisali sporazum o razvoju in izvajanju programa kliničnih raziskav Neželeni učinki cepiva, ki so se pojavili, so bili za oceno imunogenosti in varnosti kombinirane običajno blagi. Največkrat se je pojavila uporabe ene od komponent cepiva Sputnik V, bolečina na mestu injiciranja, utrujenost in ki ga je razvil inštitut Gamaleya, in ene od rahlo povišana telesna temperatura. Tekom komponent cepiva AZD1222, ki sta ga razvili izvajanja študije so zabeležene štiri smrti, tri v AstraZeneca in Univerza v Oxfordu. cepilni skupini, eno pa v skupini, ki je prejemala placebo. Nobena smrt naj ne bi bila povezana s cepljenjem. 20 Značilnosti cepiva proizvajalca CanSino Urška Fajdiga in Ernestina Lavrih Ad5-nCoV oz. Convidecia je cepivo proti okužbi Imunogenost in učinkovitost so sprva preverjali z novim koronavirusom, ki so ga razvili v na miših in dihurjih, pri čemer so različne kitajskem podjetju CanSino Biologics v skupine prejemale različno visoke odmerke sodelovanju s Pekinškim inštitutom za cepiva intranazalno (v nosnico) ali biotehnologijo in kitajsko Vojaško medicinsko intramuskularno (v mišico). Po cepljenju so jih akademijo. Je vektorsko cepivo na osnovi okužili s SARS-CoV-2 in ugotovili, da so bili okvarjenega adenovirusnega vektorja tipa 5, ki odmerki zadostni za zaščito pred okužbo s nosi zapis za protein bodice virusa SARS-CoV-2. koronavirusom, pri čemer se je intranazalno odmerjanje izkazalo kot bolj učinkovito. Cepivo naj bi 28 dni po cepljenju zagotavljalo 65-odstotno zaščito pred okužbo. Cepivo se V 1. fazi klinične študije je sodelovalo 108 injicira v mišico; posameznik prejme en zdravih prostovoljcev, starih med 18 in 60 let. odmerek cepiva s 5 × 1010 virusnimi delci. Razdeljeni so bili v 3 skupine, vsaka je prejela Hranimo ga v hladilniku (2–8 °C). Najprej je bilo višji odmerek cepiva intramuskularno v roko: odobreno na Kitajskem, Madžarskem, v 5 × 1010 virusnih delcev/0,5 mL; 1 × 1011 Pakistanu, Mehiki in Čilu (stanje aprila 2021). virusnih delcev/mL; 1,5 × 1011 virusnih delcev/1,5 mL. Po vseh odmerkih se je že 14 dni Uporabljenemu adenovirusu Ad5 so izbrisali po cepljenju pojavila zadostna imunost. Ker ni zgodnje gene, ki so v regijah E1 in E3. V bilo prijavljenih hudih negativnih stranskih odsotnosti genov E1 se virus ne more učinkov, so lahko nadaljevali z 2. fazo kliničnih razmnoževati, z izbrisom regije E3 pa je študij. onemogočena razgradnja gostiteljske celice. V rekombinantni vektor so vstavili gen za protein V 2. fazi je sodelovalo 508 zdravih bodice, ki so mu dodali zapis za signalni peptid prostovoljcev: 253 oseb je prejelo cepivo z tkivnega aktivatorja plazminogena za povečano 1 × 1011 virusnih delcev, 129 oseb cepivo s izražanje v sesalskih celicah. 5 × 1010 virusnih delcev, 126 oseb pa je prejelo placebo. Cepivo so prejeli intramuskularno v Po cepljenju gensko spremenjeni adenovirusi roko. Stranski učinki, o katerih so poročali vstopijo v gostiteljske celice, kjer v jedro udeleženci, so bili blagi do zmerni - sprostijo rekombinantno DNA. Nastanejo najpogosteje povišana telesna temperatura, proteini bodice, ki jih celice predstavijo glavobol in/ali bolečina na mestu injiciranja. imunskemu sistemu. Manjši odmerek (5 × 1010 virusnih delcev) je V primeru predhodne okužbe z adenovirusi se spodbudil zadosten imunski odziv in malenkost pojavi problem predobstoječe imunosti. blažje stranske učinke, zato so ta odmerek tudi Adenovirusi so imunogeni že sami po sebi, zato določili kot varnega in učinkovitega. Tretja faza so po okužbi z njimi prisotne spominske celice. kliničnih študij še poteka – ko bodo znani Nevtralizirajoča protitelesa proti rezultati, bomo več vedeli o dejanski adenovirusom že v majhnih koncentracijah učinkovitosti cepiva na dolgi rok in sposobnosti okrnijo privzem vektorja v gostiteljske celice, preprečevanja prenosa okužbe. kar posledično pomeni zmanjšano učinkovitost cepiva. 21 Primerjava vektorskih cepiv Tabela 2: Primerjava vektorskih cepiv (stanje maja 2021). Johnson & AstraZeneca Sputnik V CanSino Johnson / Janssen COVID-19 Vaccine Sputnik V, Ad5-nCoV, Ime Vaxzevria, Covishield Janssen Gam-COVID-Vac Convidecia Tip cepiva ChAdOx1-S Ad26.COV2.S Ad26-S in Ad5-S Ad5-S Način v mišico v mišico v mišico v mišico injiciranja (intramuskularno) (intramuskularno) (intramuskularno) (intramuskularno) Redčenje / / / / Dve dozi. Prva vsebuje Ad26 Dve dozi, vsaka (1 × 1011 virusnih vsebuje najmanj Ena doza, ki vsebuje Ena doza, ki delcev), druga pa Doza 2,5 × 108 virusnih 5 × 1010 virusnih vsebuje 5 × 1010 Ad5 (1 × 1011 delcev (druga doza delcev. virusnih delcev. virusnih delcev). po 12 tednih). Drugi odmerek sledi 21 dni po prvem. Zaščita 15 dni po prejemu 14 dni po prejemu 28 dni po prejemu N/A drugega odmerka odmerka odmerka med 2 °C in 8 °C (do med 2 °C in 8 °C –18 °C (6 mesecev) Shranjevanje med 2 °C in 8°C 6 mesecev) v temi (6 mesecev) v temi v temi 72 % (ZDA), 66 % Učinkovitost 82 % (Latinska Amerika), 91,6 % 65,7 % 57 % (Južna Afrika) Starost 18 let in več Odobreno v ne (izjema: da da v postopku EU Madžarska) L-histidin, L- 2-hidroksipropil-β- Tris-(hidroksimetil)- histidinijev klorid ciklodekstrin (HBCD), aminometan, monohidrat, monohidrat citronske natrijev klorid, magnezijev klorid kisline, klorovodikova saharoza, heksahidrat, kislina, polisorbat 80, Sestava magnezijev klorid N/A polisorbat 80 (E433), natrijev klorid, heksahidrat, etanol, saharoza, natrijev hidroksid, dinatrijev EDTA NaCl, dinatrijev EDTA trinatrijev citrat dihidrat, polisorbat dihidrat, voda za dihidrat, voda za 80, etanol in voda injiciranje injiciranje ChAdOx1-S Ad26.COV2-S pridobivanje v celični pridobljen v celični pridobljen v celični N/A liniji HEK293 Opomba liniji HEK293 liniji PER.C6 TetR Dedni material človeka se ne spremeni, nudijo 100-odstotno zaščito pred hudim potekom bolezni COVID-19. N/A - ni podatka 22 Inaktivirana cepiva Inaktivirana cepiva so cepiva, ki vsebujejo onesposobljenega povzročitelja bolezni. Inaktivacijo povzročitelja dosežemo s toplotno ali kemično obdelavo. Zaradi inaktivacije virus izgubi zmožnost razmnoževanja in ni sposoben povzročiti okužbe. Takšna cepiva največkrat sprožijo le humoralno imunost (slika 5), ne pa tudi celične. Slika 5: Mehanizem delovanja inaktiviranih cepiv. Antigen predstavitvene celice (APC) v procesu fagocitoze sprejmejo inaktiviran virus, ki ostane obdan z lipidno membrano. Taki membranski strukturi rečemo fagosom. Ta se postopno spreminja in sprejema druge molekule, med drugim proteine MHC II in encime, odgovorne za razgradnjo proteinov. Ti encimi razgradijo virusne proteine do peptidov, ki se nato vežejo na molekule MHC II in preselijo na celično membrano. S tem APC na svoji površin predstavijo peptide (antigenske epitope) T-celicam pomagalkam, ki v nadaljevanju sprožijo aktivacijo limfocitov B, ključnih za delovanje humoralne komponente imunskega odziva. ER – endoplazemski retikulum 23 Značilnosti cepiv proizvajalcev Sinopharm in Sinovac Luka Gnidovec in Liza Ulčakar CoronaVac sprejemov v intenzivno nego in za 80 % število smrti. Cepivo, ki ga je proti virusu SARS-CoV-2 razvilo kitajsko farmacevtsko podjetje Sinovac BBIBB-CorV Biotech, se imenuje CoronaVac. Pripravljeno je Cepivo BBIBP-CorV je eno izmed dveh na klasičen način, in sicer gre za inaktivirano inaktiviranih cepiv, ki ga je razvilo kitajsko virusno cepivo. Za pripravo cepiva CoronaVac farmacevtsko podjetje Sinopharm Group. je bil izbran eden izmed vzorcev SARS-CoV-2 s Pripravljeno je na podoben način kot Kitajske. Virusne delce so namnožili v ledvičnih CoronaVac; izbrani sev iz vzorca pacientke so celicah afriške zelene opice (celice Vero), nato namnožili v celicah Vero in v naslednjih korakih pa so jih inaktivirali z β-propiolaktonom. Kot virusne delce inaktivirali ter odstranili možne adjuvant so uporabili aluminijev hidroksid. nečistoče. Kot adjuvant so tudi v tem primeru Cepivo je treba shranjevati pri 2–8 °C. uporabili aluminijev hidroksid. Prvo in drugo fazo kliničnih študij so izvajali na V prvi fazi kliničnih testiranj je 192 zdravih posameznikih, starih med 18 in 59 let, posameznikov prejelo različne količine cepiva v kasneje tudi na starejših od 60 let. razmaku 28 dni. Najpogostejši stranski učinek Najpogostejši stranski učinek je bila bolečina na je bila bolečina na mestu vboda, najpogostejši mestu vboda, ostale reakcije so bile redkejše in sistemski stranski učinek pa vročina. Resnih blage. Jakost imunskega odziva ni kazala stranskih učinkov niso zaznali. Protitelesa so se bistvene odvisnosti od doze (3 μg/0,5 mL ali pojavila pri vseh posameznikih po 42 dneh. 6 μg/0,5 mL raztopine aluminijevega Vsebnost (titer) protiteles je bila primerljiva pri hidroksida), očitna pa je bila odvisnost od osebah, ki so prejele 4 μg ali 8 μg doze cepiva, časovnega razmika med prvim in drugim pri tistih, ki so prejeli 2 μg cepiva, pa je bila cepljenjem. Boljše rezultate so dosegli, če so nižja. drugi odmerek injicirali po 28 dneh kot po 14 dneh. V drugi fazi je sodelovalo 448 prostovoljcev, starih med 18 in 59 let. Prejeli so en 8 μg Tretja faza kliničnih študij poteka v sedmih odmerek ali dva 4 μg odmerka v razmaku 14, 21 državah. Podatki o učinkovitosti iz različnih ali 28 dni. Vsi neželeni stranski učinki so bili držav so zelo različni, kar naj bi bila posledica blagi ali zmerni. Največ protiteles po 28 dneh prisotnosti različnih sevov virusa v različnih od prejema drugega odmerka so imele osebe, državah, nereprezentativnosti nekaterih skupin ki so prejele dva odmerka v razmaku 21 dni. prostovoljcev in različnih kriterijev za ocenjevanje obolelosti pacientov. Kljub temu Tretja faza kliničnih testiranj poteka skupno v so uporabo cepiva CoronaVac odobrili že v 22 Združenih arabskih emiratih, Bahrajnu, Egiptu neevropskih državah, med njimi tudi v Čilu, kjer in Jordaniji. Sinopharm Group je v svoji izjavi so nato opravili še študijo na splošni populaciji. 30. decembra 2020 navedel 79-odstotno Rezultati so pokazali, da je cepivo v primeru učinkovitost cepiva. Uradnih objav o tretji fazi 28-dnevnega razmaka med prvim in drugim kliničnih testiranj v znanstvenih revijah še ni. odmerkom 67-odstotno učinkovito pri Poleg tega cepivo testirajo tudi v Peruju, preprečevanju simptomatskih okužb, Argentini in Maroku. 85-odstotno učinkovito pri preprečevanju hospitalizacij, za 89 % se zmanjša število 24 Značilnosti cepiva proizvajalca Bharat Biotech Eva Keber in Urška Pečarič Strnad Covaxin (tudi BBV152) je prvo indijsko cepivo Rezultati kliničnih študij proti COVID-19, ki ga proizvaja biotehnološko Faza 1: V prvi fazi kliničnih testiranj je podjetje Bharat Biotech. Je inaktivirano cepivo sodelovalo 375 ljudi, starih med 18 in 55 let. in temelji na dobro uveljavljeni in preizkušeni Cepivo so injicirali v dveh dozah z zamikom 14 platformi v svetu tehnologije cepiv, saj takšna dni. Skupaj je samo 15 % ljudi poročalo o cepiva obstajajo že desetletja. Inaktivirani stranskih učinkih (bolečina na mestu vboda, virusi se ne razmnožujejo, zato ne povzročajo glavobol in utrujenost). Kasnejše raziskave so bolezni, vseeno pa omogočijo, da imunski pokazale, da cepivo sproži humoralno in tudi sistem sproži obrambno reakcijo proti okužbi. celično imunost. Za izdelavo cepiva so uporabili virusni sev Faza 2: Cepivo so preizkusili na 380 ljudeh, NIV-2020-770, ki so ga izolirali v Indiji. Viruse so starih med 12 in 65 let. Drugo dozo so prejeli namnožili v ledvičnih celicah afriške zelene 28 dni po prvi. Po pričakovanjih so sodelujoči opice (Vero CCL-18). Po namnožitvi v razvili protitelesa proti SARS-CoV-2. V krvi so bioreaktorju so virusne delce očistili in jih nato zaznali T-celice pomagalke, specifične za ta inaktivirali z ß-propiolaktonom, ki se med virus. Izkazalo se je, da 6 µl adjuvanta drugim najverjetneje veže na virusno RNA, kar Algel-IMDG sproži boljši imunski odziv, zato so prepreči nadaljnje razmnoževanje virusa, tega preverjali v tretji fazi kliničnih študij. hkrati pa proteini ostanejo večinoma nespremenjeni. Faza 3: Cepivo BBV152 so v tretji fazi preizkusili na 25 800 osebah; polovica jih je prejela cepivo, Za klinične študije so pripravili 3 različice polovica pa placebo. Sodelujoči so bili stari od cepiva, ki so se razlikovale v koncentraciji 18 do 98 let. Pri vseh testiranih so opravili tri antigena (3 µg in 6 µg) in vrsti adjuvanta (Algel tipe analiz: in Algel-IMDG). Določili so, da je cepivo najbolj stabilno pri temperaturi med 2 in 8 °C. Covaxin  pojav simptomov, ki so se pojavili po poleg inaktiviranih virusnih delcev SARS-CoV-2 cepljenju; in adjuvantov vsebuje še konzervans ter pufer,  ugotavljanje števila simptomatskih in ki uravnava pH. Cepivo injiciramo asimptomatskih okužb; intramuskularno. Ko vstopi v telo, antigen  spremljanje razvoja odpornosti proti predstavitvene celice fagocitirajo virusne koronavirusu. delce, nato pa fragmente virusa izpostavijo na svoji površini. T-celice pomagalke nato zaznajo Za testiranje učinkovitosti so analizirali odziv te fragmente in aktivirajo B-celice, ki nato 130 ljudi, ki so se minimalno 14 dni po prejemu proizvedejo protitelesa proti koronavirusu in druge doze okužili s SARS-CoV-2. Rezultati so predstavljajo zaščito pred okužbo. pokazali, da je učinkovitost cepiva 81-odstotna. Covaxin je učinkovit tudi proti angleškemu sevu. 25 Primerjava inaktiviranih cepiv Tabela 3: Primerjava inaktiviranih cepiv (stanje maja 2021). Sinopharm Sinovac Biotech Bharat Biotech Ime BBIBP-CorV CoronaVac Covaxin, BBV152 Tip cepiva inaktivirano Način v mišico (intramuskularno) injiciranja Redčenje / / / Dve dozi, ena doza Dve dozi, ena doza Dve dozi, en doza vsebuje 4 µg vsebuje 3 µg vsebuje 6 µg Doza inaktiviranega virusa inaktiviranega virusa inaktiviranega virusa SARS- SARS-CoV-2 SARS-CoV-2 CoV-2, seva NIV-2020-770 (druga doza po 21 dneh) (druga doza po 28 dneh) (druga doza po 28 dneh) Zaščita 14 dni po prejemu 14 dni po prejemu drugega N/A drugega odmerka odmerka Shranjevanje med 2 °C in 8 °C med 2 °C in 8 °C med 2 °C in 8 °C Učinkovitost 79 % 50 % 81 % Starost 18 let in več Odobreno v ne (izjema: Madžarska) ne ne EU aluminijev hidroksid, agonist aluminijev hidroksid, aluminijev hidroksid, TLR 7/8 (imidazokinolinon), Sestava fosfatni pufer fosfatni pufer 2-fenoksietanol, fosfatni pufer Virusne delce so namnožili v ledvičnih celicah afriške Virusne delce so namnožili v ledvičnih celicah afriške zelene opice (Vero CCL-18) Opomba zelene opice (Vero) inaktivirali z β-propiolaktonom. in inaktivirali z β-propiolaktonom. Nudijo 100-odstotno zaščito pred hudim potekom bolezni COVID-19. N/A – ni podatka 26 Cepiva iz delov patogena V to skupino cepiv uvrščamo cepiva, ki ne vsebujejo celotnega povzročitelja bolezni, ampak le njegove dele (npr. proteinska cepiva, peptidna cepiva in virusom podobni delci). Pri rekombinantnih proteinskih cepivih za sprožitev imunskega odgovora uporabimo virusni protein, ki ga pripravimo s tehnologijo rekombinantne DNA. Peptidna cepiva vsebujejo manjše peptide, ki predstavljajo izpostavljene dele proteina, ki je del virusne ovojnice. Cepiva, ki vsebujejo virusom podobne delce, pa vsebujejo virusne delce brez genskega materiala. Antigen predstavitvene celice v procesu fagocitoze sprejmejo virusne delce ali njihove proteinske komponente in jih razgradijo. Iz proteinov tako nastanejo peptidi, ki jih celice predstavijo na svoji površini T-celicam pomagalkam (slika 6). Slika 6: Mehanizem delovanja cepiv iz delov patogena. Antigen predstavitvene celice (APC) v procesu fagocitoze sprejmejo proteine, peptide ali virusom podobne delce. Encimi v fagosomu virusne delce ali proteinske komponente razgradijo na peptide, ki se vežejo na proteine MHC in prenesejo na celično površino. Tako jih predstavijo T-celicam pomagalkam, ki sprožijo humoralno in celično komponento imunskega odziva. ER – endoplazemski retikulum 27 Značilnosti cepiva proizvajalca Novavax Jernej Imperl in Klementina Polanec Cepivo NVX-CoV2373 proizvaja ameriško se lahko zasidrajo proteini bodice. Tako podjetje Novavax. Temelji na nanodelcih z nastanejo nanodelci, veliki okoli 30 nm, ki lahko rekombinantnim proteinom bodice virusa vsebujejo do 14 proteinov bodice. Ker SARS-CoV-2. V času pisanja cepivo še ni nanodelec predstavlja večjo strukturo kot sam odobreno v Evropi. protein bodice, in navzven celo spominja na virus, sproži močnejši imunski odziv in poveča Cepivo proizvajalca Novavax vsebuje tri ključne učinkovitost cepiva. sestavine: rekombinantni protein bodice, polisorbat 80 in adjuvant Matrix-M. Cepivo se Matrix-M lahko hrani pri temperaturi 2–8 °C do Adjuvanti so sestavine cepiva, ki spodbudijo 6 mesecev. imunski sistem in povečajo učinkovitost cepiva. Rekombinantni protein bodice Cepivu Novavax je dodan adjuvant Matrix-M, ki je sestavljen iz saponina južnoameriške Protein bodice je antigen, ki ga s cepivom drevesne vrste Quillaja saponaria, holesterola želimo predstaviti imunskemu sistemu. S tega in fosfolipidov. Tvori mehurčke podobne vidika je to cepivo podobno konkurenčnim velikosti kot nanodelci s proteinom bodice. cepivom, vendar pa je cepivo Novavax eno redkih, ki uporablja očiščen protein Klinična testiranja cepiva neposredno v cepivu (namesto mRNA ali Prva preizkušanja varnosti in imunogenosti virusnega vektorja). V protein so uvedli dva cepiva Novavax so potekala na miših in seta mutacij. Najprej so spremenili tarčno pavijanih. Po prejemu dveh odmerkov cepiva zaporedje za cepitev (682-QQAQ-685), kar so živali proizvedle protitelesa proti proteinu onemogoči aktivacijo proteina v našem telesu, bodice, ki so bila sposobna nevtralizirati z naslednjo spremembo (K986P in V987P) pa so SARS-CoV-2. Zaradi vezave protiteles na povečali stabilnost proteinske strukture. protein bodice se virus ni mogel vezati na Prilagojeni protein je stabilen pri različnih receptorje na površini celic in jih okužiti. S tem pogojih in je primeren za vzpostavitev imunosti so raziskovalci potrdili delovanje in varnost proti SARS-CoV-2. cepiva, s čimer so prešli na klinična Za pridobivanje proteina bodice so izbrali preizkušanja na ljudeh. kulture celic Sf9 ameriške koruzne sovke (vrsta 1. faza kliničnega preizkušanja se je začela maja vešče) Spodoptera frugiperda, saj omogočajo 2020 v Avstraliji. Sodelovalo je 131 zdravih pridobivanje proteina bodice v velikih količinah prostovoljcev, starih od 18 do 59 let. Prvi in in s pravilno prostorsko zgradbo. V celice so drugi odmerek so prejeli 21 dni narazen, pri vnesli gen za mutiran protein bodice s pomočjo čemer jih je 83 prejelo cepivo z adjuvantom, 25 insektnega virusa. Prišlo je do sinteze brez adjuvanta in 23 placebo. Najpogostejša rekombinantnega proteina, ki so ga očistili in lokalna stranska učinka sta bila bolečina in uporabili za pripravo cepiva. oteklina na mestu vboda, sistemski stranski Polisorbat 80 učinki pa utrujenost, glavobol in bolečine v mišicah. Stranski učinki so bili v glavnem Polisorbat 80 je neionski detergent, ki se kratkotrajni in blagi. Cepivo z adjuvantom je uporablja v živilski industriji, proizvodnji sprožilo močnejši imunski odziv in spodbudilo kozmetike in zdravil. V vodnih raztopinah nastanek večje količine protiteles, kot so jih polisorbat 80 spontano tvori micele – 10 nm zaznali v krvi posameznikov, ki so preboleli velike lipidne strukture v obliki valja. V cepivu COVID-19. Zaznali so tudi močan odziv T-celic Novavax ti miceli služijo kot ogrodje, v katerega pomagalk tipa 1. 28 2. fazo kliničnega preizkušanja so začeli avgusta znanstvenega članka, je pa podjetje Novavax 2020 v ZDA in Avstraliji. Sodelovalo je 1256 sporočilo, da učinkovitost cepiva proti prostovoljcev, starih od 18 do 84 let, pri čemer originalnemu sevu virusa znaša 96,4 %, proti jih je 45 % predstavljajo skupino starejših britanski različici pa 86,3 %. Cepivo nudi (60–84 let). Sodelujoče so razdelili v 5 skupin, 100-odstotno zaščito pred hudim potekom od tega so 4 prejele različne doze cepiva z bolezni COVID-19. adjuvantom, 1 pa placebo. Rezultati 2. faze so Ostala klinična testiranja bili v glavnem enaki kot rezultati 1. faze. Ugotovili so, da je cepivo varno tudi za starejšo  Rezultati faze 2b iz Južnoafriške republike populacijo. Stranski učinki so bili pri starejših so pokazali, da je učinkovitost cepiva proti redkejši in blažji, imunski odziv na cepivo pa je južnoafriški različici 55,4 % bil nekoliko slabši zaradi staranja imunskega (za HIV-negativno populacijo). sistema. Ugotovili so, da je nižja doza cepiva  V ZDA in Mehiki poteka 3. faza kliničnega (5 µg) bolj primerna kot višja (25 µg), saj pri preizkušanja, v kateri sodeluje okoli cepljenih povzroči manj stranskih učinkov, 30.000 prostovoljcev starejših od razvije pa se približno enaka količina protiteles. 18 let.  3. faza kliničnega preizkušanja se je začela Februarja 2021 se je v Združenem septembra 2020 v Združenem kraljestvu. kraljestvu začela raziskava, v kateri so Sodelovalo je več kot 15.000 prostovoljcev, od prostovoljce cepili s kombinacijo različnih tega 27 % starih nad 65 let. Polovica cepiv (AstraZeneca, Pfizer, Moderna in sodelujočih je prejela dva odmerka cepiva, Novavax). Prvi in drugi odmerek sta druga polovica dva odmerka placeba. Rezultati predstavljali enako ali pa različni cepivi. preizkušanja še niso objavljeni v obliki 29 Značilnosti cepiva proizvajalca Vector Urša Lovše Cepivo EpiVacCorona je peptidno cepivo bakterijskega izvora in proteina N ruskega raziskovalnega centra Vector (Državno (nukleokapside) virusa SARS-CoV-2. Za prvim raziskovalno središče za virologijo in delom proteina (MBP) je zaporedje 6 biotehnologijo). Temelji na treh kemijsko histidinov, ki omogoča izolacijo sintetiziranih peptidih, ki predstavljajo rekombinantnega proteina z afinitetno imunogene dele (epitope) proteina bodice. kromatografijo na imobiliziranih nikljevih ionih. Peptidi so kovalentno vezani na proteinski Zaradi vezave na nosilno molekulo so dosegli nosilec, cepivo pa poleg sintetiziranih peptidov povečano stabilnost in imunogenost peptidov, in nosilnega proteina vsebuje še adjuvant ki so jo še dodano povečali z adjuvantom aluminijev hidroksid. aluminijevim hidroksidom. Izdelava cepiva Pripravljeno cepivo vsebuje v eni dozi 260 µg Peptide, ki so jih v nadaljevanju sintetizirali, so aktivne učinkovine, aplicira pa se v dveh dozah, izbrali na podlagi znanih podatkov o prostorski intramuskularno z 21- do 28-dnevnim zgradbi in aminokislinskem zaporedju proteina zamikom. Cepivo shranjujemo v hladilniku bodice. Izbrali so tri ustrezne peptide, dolge (2–8 °C). med 20 in 31 aminokislinskih ostankov, ki so Klinične študije podobni epitopom virusnega proteina bodice, in jih prepoznavajo limfociti B (B-celice). 1. in 2. klinična faza sta potekali do oktobra Izbrane peptide so proizvedli s standardnimi 2020 v Rusiji. Sodelovalo je 100 prostovoljcev, kemijskimi postopki za sintezo peptidov s trdno starih med 18 in 60 let. V 3. klinično fazo je fazo. Tako pripravljene peptide so kovalentno vključenih okoli 3000 ljudi, predvidoma pa naj vezali na proteinski nosilec, ki so ga kot bi trajala do avgusta 2021. Cepivo je že rekombinantni protein pripravili v odobreno za uporabo v Rusiji in laboratorijskem sevu bakterij Escherichia coli. Turkmenistanu. Proteinski nosilec je fuzijski protein, sestavljen iz vezavnega proteina za maltozo (MBP), ki je 30 Značilnosti cepiva proizvajalca VBI Vaccines Željka Erić VBI Vaccines je biofarmacevtsko podjetje, ki je je zasnovano tako, da spodbudi nastanek usmerjeno predvsem v razvoj in proizvodnjo nevtralizirajočih protiteles proti proteinu cepiv, predvsem za preprečevanje in bodice. VBI-2902a se injicira intramuskularno, zdravljenje nalezljivih bolezni. Z inovativnim vsebuje do 10 μg proteina bodice, kot adjuvant pristopom pri pripravi virusom podobnih pa mu je dodan aluminijev fosfat. delcev (VLP), vključno s tehnologijo VLP z Klinične študije ovojnico (eVLP), razvija kandidate za cepiva, ki posnemajo strukturo virusa in tako sprožijo S kliničnimi študijami prve in druge faze bodo močan imunski odziv. ovrednotili varnost, učinkovitost, doziranje (5 μg ali 10 μg proteina bodice) ter Cepivo VBI-2902a imunogenost cepiva VBI-2902a, in sicer v VBI-2902a je kandidat za cepivo, ki vsebuje VLP režimu enega in dveh odmerkov glede na z modificirano predfuzijsko obliko proteina placebo (fiziološka raztopina). V klinične študije bodice SARS-CoV-2. VLP so strukturno podobni faze 1/2 je vključenih 780 zdravih virusu SARS-CoV-2, ne vsebujejo pa genskega prostovoljcev, ki so starejši od 18 let. materiala, zato se ne morejo razmnoževati in Začetna študija faze 1/2 VBI-2902a se je začela povzročiti nastanka bolezni COVID-19. Cepivo 15. marca 2021 in naj bi bila končana junija 2022. 31 Primerjava cepiv iz delov patogena Tabela 4: Primerjava cepiv iz delov patogena (stanje maja 2021). Lastnost Novavax Vector VBI Vaccines Ime NVX-CoV2373 EpiVacCorona VBI-2902a Tip cepiva proteinsko cepivo peptidno cepivo virusom podobni delci Način v mišico (intramuskularno) injiciranja Redčenje / / / Dve dozi, ena doza Dve dozi, ena doza vsebuje vsebuje Doza 260 µg aktivne učinkovine N/A 5 µg aktivne učinkovine (druga doza po 21-28 dneh). (druga doza po 21 dneh). Zaščita N/A N/A N/A med 2 °C in 8 °C Shranjevanje med 2 °C in 8 °C med 2 °C in 8 °C (6 mesecev) Učinkovitost 96, 4 % N/A N/A Starost 18 let in več 18 let in več N/A Odobreno v ne ne ne EU nosilni fuzijski protein, sestavljen iz vezavnega polisorbat 80, matrix-M protein za maltozo in Sestava amonijev fosfat (adjuvant) koronavirusnega proteina N, aluminijev hidroksid (adjuvant) pridobivanje v kulturi celic vešče Spodoptera klinične študije so v teku frugiperda (Sf9) kemijska sinteza peptidov s (prvi podatki bodo na Opomba trdno fazo voljo predvidoma junija nudi 100 % zaščito pred 2022) hudim potekom bolezni COVID-19 N/A – ni podatka 32 Uporabnost obstoječih cepiv proti novim variantam virusa SARS-CoV-2 Marko Dolinar V času od začetka razvoja cepiv proti virusu Z mutacijami v proteinu bodice - proti temu je SARS-CoV-2 se je pojavila množica novih usmerjena večina protiteles, ki se razvijejo po virusnih variant. V prvih mesecih pandemije so cepljenju s trenutno odobrenimi cepivi - se zaznali po eno mutirano varianto mesečno, spremeni tudi prostorska zgradba tega kasneje, ko je bilo okuženih vedno več ljudi proteina. Protitelesa proti proteinu bodice, (izredno pa se je povečalo tudi število analiz), kakršen je bil prisoten pri začetni (vuhanski) pa je bilo opisanih variant vedno več. Teh je različici SARS-CoV-2, prepoznajo samo po obliki danes verjetno že več deset tisoč, a so jih zelo podobne proteine. Večinoma mutacije večino opazili le pri posameznih pacientih. Do povzročijo majhne razlike v obliki proteina (npr. mutacij pride v času, ko se virus v okuženem ko se ena aminokislina zamenja z drugo človeku razmnožuje, in to predvsem zaradi podobno aminokislino), lahko pa so razlike tudi napak, ki jih encim RNA-polimeraza naredi pri velike, če je zamenjava s strukturno različno sintezi nove kopije genoma. Pri pacientih z aminokislino, predvsem na površini proteina, dolgotrajno okužbo se lahko v virusnem ali če se zamenja več aminokislin. Na srečo pa genomu nabere več mutacij, tudi več kot 20. zelo spremenjena zgradba proteina bodice ne bi več omogočala vezave na površino tarčnih Vsaka mutacija v virusnem genomu ne celic. Angleški sev ima na primer v proteinu predstavlja nujno večjega tveganja za paciente, bodice 7 aminokislin spremenjenih, 3 pa pa tudi za virus večina mutacij ne predstavlja manjkajo. Kljub tolikim spremembam njegova nobene prednosti. Ohranijo se in prevladajo le celokupna oblika ni bistveno spremenjena in redke različice – tiste, ki se širijo hitreje –, pri protitelesa proti vuhanski različici še vedno tem pa ni nujno, da povzročijo tudi močnejše dokaj dobro prepoznajo angleško različico. bolezenske znake. Nekatere različice SARS-CoV-2 so opisane v drugem poglavju. Glede kompatibilnosti v Sloveniji uporabljanih cepiv z najpogostejšimi variantami virusa V Sloveniji smo prvi primer angleške različice SARS-CoV-2 je nemogoče podati zanesljive (B.1.1.7) odkrili januarja, južnoafriško (B1.351) podatke, ki bi veljali za paciente. Sistematične konec februarja, brazilski sev (P1 oz. B.1.1.28) analize še niso bile objavljene, številni podatki marca, indijskega (B1.617) pa maja 2021. Od o učinkovitosti pa temeljijo na predvidevanjih, afriških sevov je bil sicer pri nas najpogostejši ki upoštevajo strukturo mutiranega proteina nigerijski (B1.525), ki smo ga prvič zaznali bodice, ter na nekaterih biokemijskih poskusih, januarja 2021. Že v dobrih dveh mesecih od ni pa na voljo rezultatov kliničnih testov. prvega pojava v Sloveniji je angleški sev povsem zasenčil prvotno prevladujoči sev Za angleško različico je znano, da je cepivo B1.258.17 in v začetku maja je bil njegov delež AstraZeneca nekoliko manj učinkovito kot za že skoraj 98-odstoten*. V prvih 18 tednih leta vuhansko različico in za njeno evropsko 2021 so v Sloveniji zaznali kar 55 različnih varianto (z mutacijo D614G, ki je omogočila variant virusa SARS-CoV-2. bistveno hitrejše širjenje virusa po svetu). Cepiva proizvajalcev Moderna, Janssen in Pfizer naj bi dokaj dobro zaščitila pred angleško različico. 33 Južnoafriška različica je nekoliko težje hitrejšo uporabo in s tem hitrejšo omejitev prepoznavna protitelesom, ki nastanejo po širjenja. cepljenju z RNA-cepivom Moderna in Proizvajalci že pripravljajo prilagojena cepiva za DNA-cepivom Janssen, ter bistveno težje poživitvene odmerke (torej v večini primerov prepoznavna tistim, ki se razvijejo po cepljenju tretje cepljenje). Za te variante cepiv kaže, da z adenovirusnim cepivom proizvajalca naj bi bili sposobni pripraviti v večjih količinah AstraZeneca. Preliminarni rezultati s cepivom do jeseni 2021. proizvajalca Pfizer so dobri. Moderna je že pripravila prilagojeno različico cepiva proti tej varianti; trenutno je v 1. fazi kliničnega testiranja. Za brazilsko različico velja podobno kot za angleško, da je cepivo AstraZeneca nekoliko manj učinkovito, kar velja tudi za Pfizerjevo cepivo in cepivo proizvajalca Moderna. Janssenovo cepivo je nekoliko uspešnejše proti ---- brazilski kot proti južnoafriški različici. * Inštitut za mikrobiologijo in imunologijo Indijska različica se odziva na cepivo Medicinske fakultete Univerze v Ljubljani je proizvajalcev Pfizer in AstraZeneca po dveh 15. 12. 2021 sporočil, da so odkrili prve primere dozah, a nekoliko slabše kot angleška različica. okužbe z različico omikron v vzorcih, odvzetih med 29. novembrom in 5. decembrom. Ta različica Učinkovitost obeh cepiv po eni dozi je bila vsebuje 26 zamenjav aminokislin, 3 delecije in 1 dokaj slaba (približno 30 %). Tudi Modernino insercijo in velja za najbolj kužno varianto doslej. S cepivo naj bi bilo dokaj učinkovito proti svojim proteinom bodice se zelo močno veže na indijskemu sevu. receptorski protein, zato bi bilo možno, da se bo virus težje prebil v notranjost celice in bo zato Za nigerijsko varianto je zaenkrat še premalo morda povzročil blažji potek bolezni. podatkov. Poročilo NLZOH z dne 20. 12. 2021 pa vključuje Ker se tako proizvajalci cepiv kot epidemiologi podatek o skupaj 143 različicah virusa, ki so jih zavedajo, da bo virus SARS-CoV-2 mutiral, vse zaznali v Sloveniji v tem letu. Do zaključka redakcije dokler bo krožil med obolelimi, razmišljajo o te brošure so bili zadnji podatki o razširjenosti razvoju cepiv proti novim oblikam. Zaenkrat še različice omikron z dne 22. 12. 2021, ko je bilo ni jasno, ali bi bila za taka prilagojena cepiva znanih 28 primerov. Skupaj so v letu 2021 določili potrebna pred odobritvijo ponovna klinična zaporedje več kot 25.000 vzorcem, odvzetim v testiranja oziroma v kakšnem obsegu, saj bi se Sloveniji, od tega je bilo več kot 99 % različice delta. cepiva od prvotnih izredno malo razlikovala. Manj obveznih testiranj bi seveda omogočilo 34 Opuščena cepiva Nina Lukančič in Neža Pavko V590 – Merck, IAVI bodice v njegovi predfuzijski konformaciji, torej v obliki, ki je prisotna v virusnem delcu še pred To cepivo temelji na rekombinantnih pritrditvijo na receptor tarčne celice. Kot oslabljenih virusnih delcih vezikularnega objemko so uporabili fragmente glikoproteina stomatitisa (rVSV), ki so jim gen za plaščni 41 (gp41), ki je protein virusne ovojnice virusa glikoprotein zamenjali z genom za protein HIV. Raziskovalci so poleg objemke cepivu bodice virusa SARS-CoV-2. Zaradi te zamenjave dodali tudi adjuvant MF59. Junija 2020 so začeli imajo rekombinantni virusni delci podobne s 1. fazo kliničnega testiranja, v kateri je lastnosti vstopa v celice kot sam virus sodelovalo 216 prostovoljcev. V teku te faze SARS-CoV-2. V 1. fazi kliničnih študij so po testiranja so ugotovili, da so udeleženci razvili intramuskularni aplikaciji cepiva ugotovili, da protitelesa proti fragmentom gp41, kar je se osebe na cepivo dobro odzivajo, vendar povzročilo lažno pozitivne rezultate presejalnih njihov imunski odziv ni tako močan kot pri testov za HIV. To je bil razlog, da niso osebah, ki so okužbo s COVID-19 že prebolele, nadaljevali z naslednjo fazo kliničnih testiranj. ali bile cepljene z enim izmed registriranih cepiv. Cepivo Imperial College London V591 – Merck, Themis, Institut Pasteur To cepivo temelji na samoojačevalni RNA, ki zapisuje protein bodice virusa SARS-CoV-2. To cepivo temelji na že dobro uveljavljenem Samoojačevalna RNA vsebuje poleg zapisa za cepivu proti ošpicam. Oslabljenim virusom protein, proti kateremu naj bi nastala ošpic so v genom vstavili gen za protein bodice protitelesa, še zapise za štiri proteinske virusa SARS-CoV-2. Oslabljeni virusni delci molekule, ki se spontano uredijo v aktiven ošpic okužujejo antigen predstavitvene celice. encim z imenom od RNA odvisna RNA- Ob razmnoževanju rekombinantnih virusov se polimeraza. Ta encim je sposoben na osnovi v okuženih celicah sintetizira tudi protein RNA v cepivu sintetizirati v celicah, v katere bodice, ki v cepljeni osebi sproži imunski odziv RNA vstopi, dodatne kopije RNA. To pomeni, da proti proteinu bodice virusa SARS-CoV-2. bi za cepljenje uporabili bistveno manj RNA, Cepivo so po 1. fazi kliničnih študij opustili vendar bi bila ta daljša zaradi dodanih zapisov zaradi enakih razlogov kot cepivo V590. za dele encima. UQ-CSL V451 – University of Queensland, CSL Glede na število že odobrenih drugih cepiv Limited proti temu virusu so se odločili, da z njihovim Cepivo so pripravili s tehnologijo molekulske ne nadaljujejo kliničnih testiranj, so pa svoje objemke. Molekulska objemka je polipeptid, ki raziskave osredotočili na prilagoditev se uporablja za ohranjanje oblike proteinov. tehnologije novim različicam SARS-CoV-2. Ta Univerza v Queenslandu je tehnologijo sposobnost bi lahko bila osrednja pri razvoju zasnovala tako, da objemka stabilizira protein cepiv druge generacije proti COVID-19. 35 Viri SARS-CoV-2 Variants vs. Vaccines; dostopno na https://asm.org/Articles/2021/February/SARS-CoV-2- Variants-vs-Vaccines (datum dostopa 9. 3. 2021.). Science Brief: Emerging SARS-CoV-2 Variants | CDC; dostopno na https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/more/science- Splošno o virusih in variante SARS-CoV-2 and-research/scientific-brief-emerging-variants.html (datum WHO announces simple, easy-to-say labels for SARS-CoV-2 dostopa 9. 3. 2021). Variants of Interest and Concern; dostopno na X. Li in sod. »Emergence of SARS-CoV- https://www.who.int/news/item/31-05-2021-who-announces- 2 through recombination and strong purifying selection.« simple-easy-to-say-labels-for-sars-cov-2-variants-of-interest- Science 2020, 6(27), eabb9153. and-concern (datum dostopa 22. 12. 2021). Y. Chen, Q. Liu in D. Guo. »Emerging coronaviruses: Genome structure, replication, and pathogenesis.« Journal of Medical Molekularnobiološke značilnosti SARS-CoV-2 in prvi Virology 2020, 92(4), 418–423. aktualni mutanti Coronavirus Variants and Mutations ; dostopno na Interakcija SARS-CoV-2 s tarčno celico https://www.nytimes.com/interactive/2021/health/coronavirus -variant-tracker.html (datum dostopa 9. 3. 2021). J. Shang in sod. »Cell entry mechanisms of SARS-CoV-2.« Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2020, 117, 11727–11734. D. Kim in sod. »The Architecture of SARS-CoV-2 Transcriptome.« Cell 2020, 181(4), 914-921.e10. N. Murgolo in sod. »SARS-CoV-2 tropism, entry, replication, and propagation: Considerations for drug discovery and E. J. Snijder in sod. »Ultrastructure and Origin of Membrane development«. PLoS Pathogens 2021, 17. Vesicles Associated with the Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus Replication Complex.« Journal of P. V’kovski, A. Kratzel, S. Steiner, H. Stalder in V. Thiel. Virology 2006, 80(12), 5927–5940. »Coronavirus biology and replication: implications for SARS- E.G. Holmes in A. Rambaut. CoV-2.«. Nature Reviews Microbiology 2021, 19, 155–170. »Viral evolution and the emergence of SARS coronavirus.« Philosophical Transactions of the Royal Society B: Biological Scie RNA-cepiva nces 2004, 1059–1065. A. Wadhwa, A. Aljabbari, A. Lokras, C. Foged in A. Thakur. F. Fratev. »The SARS-CoV-2 »Opportunities and Challenges in the Delivery of mRNA-Based S1 spike protein mutation N501Y alters the protein interactions Vaccines.« Pharm. 2020 , 12, 102. with both hACE2 and human derived antibody: A Free energy of perturbation study«, bioRxiv 2020. J. R. Teijaro in D. L. Farber. COVID-19 vaccines: modes of immune activation and future challenges. Nat. Rev. Immunol. H. Wang in sod . »The genetic sequence, origin, and diagnosis of 2021 , 21, 195–197. SARS-CoV-2.« European Journal of Clinical Microbiology and Infectious Diseases 2020, 39(9), 1629–1635. Meet the mRNA vaccine rookies aiming to take down COVID-19 J. D. Fernandes in sod. »The UCSC SARS-CoV-2 Genome | CAS; dostopno na https://www.cas.org/resource/blog/covid- Browser.« Nature Genetics 2020, 52(10), 991–998. mrna-vaccine (datum dostopa 30. 3. 2021). J. D. Ramírez in sod. »Will the emergent SARS‐CoV2 B.1.1.7 lineage affect molecular diagnosis of COVID‐ Značilnosti cepiva proizvajalca Moderna 19?«, Journal of Medical Virology 2021. A. M. Reichmuth, M. A. Oberli, A. Jeklenec, R. Langer, in D. L. Alanagreh, F. Alzoughool in M. Atoum. »The human Blankschtein. »mRNA vaccine delivery using lipid coronavirus disease covid-19: Its origin, characteristics, and nanoparticles.« Ther. Deliv. 2016, 7, 319–334. insights into potential drugs and its mechanisms.« Pathogens 2020, 9(5). C. for M. P. for H. U. (CHMP): Assessment report COVID-19 Vaccine Moderna; dostopno na M. J. Van Hemert in sod. »SARS-coronavirus https://www.ema.europa.eu/en/documents/assessment- replication/transcription complexes are membrane-protected and need a host factor for activity in vitro.« PLoS Pathogens report/covid-19-vaccine-moderna-epar-public-assessment- 2008, 4(5). report_en.pdf (datum dostopa 14. 3. 2021) M. Ramanathan in sod. »SARS-CoV-2 D. Tripathi, G. Yi in R. Vankayalapati. »COVID-19: An update on B.1.1.7 and B.1.351 Spike variants bind human vaccine development.« Indian J. Rheumatol. 2020, 15, 70–72. ACE2 with increased affinity.« bioRxiv 2021. I. Staffans: Annex I. Evid. Eur. Asylum Proced. 2012, 269–269. S. Chakraborty. M. D. Buschmann in sod. »Nanomaterial delivery systems for »Evolutionary and structural analysis elucidates mutations on mrna vaccines.« Vaccines 2021, 9, 1–30. SARS-CoV2 spike protein with altered human ACE2 binding affinity.« Biochemical and Biophysical Research Co N. A. C. Jackson, K. E. Kester, D. Casimiro, S. Gurunathan in F. mmunications 2021, 534, 374–380. DeRosa. »The promise of mRNA vaccines: a biotech and industrial perspective.« npj Vaccines 2020, 5, 3–8. S. F. Elena in R. Sanjuán. »Adaptive Value of High Mutation Rates of RNA Viruses: Separa N. Pardi, M. J. Hogan, F. W. Porter in D. Weissman. »mRNA ting Causes from Consequences.« Journal of Virology 2005, vaccines-a new era in vaccinology.« Nat. Rev. Drug Discov. 79(18), 11555–11558. 2018, 17, 261–279. S. Satarker in M. Nampoothiri. »Structural Proteins in Severe Y. H. Chung, V. Beiss, S. N. Fiering in N. F. Steinmetz. »Covid-19 Acute Respiratory Syndrome Coronavirus-2.« Archives of vaccine frontrunners and their nanotechnology design.« ACS Medical Research 2020, 51(6), 482–491. Nano 2020, 14, 12522–12537. 37 Y. Huang, C. Yang, X. feng Xu, W. Xuc in S. wen Liu. »Structural and functional properties of SARS-CoV-2 spike protein: potential Rezultati kliničnih testiranj cepiva proizvajalca Pfizer / antivirus drug development for COVID-19.« Acta Pharmacol. BioNTech Sin. 2020, 41, 1141–1149. BioNTech and Pfizer announce completion of dosing for first Y. Wang, Z. Zhang, J. Luo, X. Han, Y. Wei in X. Wei. »mRNA cohort of Phase 1/2 trial of COVID-19 vaccine candidates in vaccine: a potential therapeutic strategy.« Mol. Cancer 2021, Germany. Pfizer; dostopno na 20, 33. https://investors.pfizer.com/investor-news/press-release- details/2020/BioNTech-and-Pfizer-announce-completion-of- Rezultati kliničnih testiranj dosing-for-first-cohort-of-Phase-1-2-trial-of-COVID-19-vaccine- cepiva proizvajalca candidates-in-Germany/default.aspx (datum dostopa Moderna 30. 3. 2021). A. Ihan: Delovanje cepiv proti covid-19. NIJZ, 2021; dostopno na https://www.nijz.si/files/uploaded/004- Clinical data. EMA; dostopno na cepiva_gradivo_za_strokovno_javnost_29122020.pdf (datum https://clinicaldata.ema.europa.eu/web/cdp/home (datum dostopa 14. 3. 2021). dostopa 30. 3. 2021) Vaccines and Related Biological Products Advisory Committee Cominary: EPAR – Public assessment report). EMA; dostopno na December 17, 2020 Meeting Briefing Document - FDA. FDA, https://www.ema.europa.eu/en/documents/assessment- 2020; dostopno na report/comirnaty-epar-public-assessment-report_en.pdf https://www.fda.gov/media/144434/download (datum dostopa (datum dostopa 30. 3. 2021). 14. 3. 2021). E. E. Walsh in sod. »RNA-based COVID-19 vaccine BNT162b2 C. for M. P. for H. U. (CHMP): Assessment report COVID-19 selected for a pivotal efficacy study.« N Engl J Med. 2020, 383. Vaccine Moderna; dostopno na F. P. Polack in sod. »Safety and Efficacy of the BNT162b2 RNA https://www.ema.europa.eu/en/documents/assessment- COVID-19 Vaccine.« N Engl J Med. 2020, 383. report/covid-19-vaccine-moderna-epar-public-assessment- K. A. Swanson in sod. »Neutralizing activity of BNT162b2- report_en.pdf (datum dostopa 14. 3. 2021). elicited serum.« N Engl J Med. 2021. Značilnosti cepiva proizvajalca Pfizer / BioNTech M. C. Castells, E. J. Phillips. »Maintaining Safety with SARS-CoV- 2 Vaccine.« N Engl J Med. 2021, 384. A. B. Vogel in sod . »Immunogenic BNT162b vaccines protect rhesus macaques from SARS-CoV-2.« Nature 2021, 1–7. N. Dragan in sod. »BNT162b2 mRNA COVID-19 Vaccine in a Nationwide Mass Vaccination Setting.« N Engl J Med. 2020. Background document on the mRNA vaccine BNT162b2 (Pfizer- BioNTech) against COVID-19; dostopno na Pfizer and BioNTech Commence Global Clinical Trial to Evaluate https://www.who.int/publications/i/item/background- COVID-19 Vaccine in Pregnant Women. Pfizer; dostopno na document-on-mrna-vaccine-bnt162b2-(pfizer-biontech)- https://investors.biontech.de/news-releases/news-release- against-covid-19. (datum dostopa 30. 3. 2021) details/pfizer-and-biontech-commence-global-clinical-trial- evaluate (datum dostopa 30. 3. 2021) CHMP. Committee for Medicinal Products for Human Use (CHMP) Assessment report Comirnaty Common name: COVID- Pfizer and BioNTech Initiate a Study as Part of Broad 19 mRNA vaccine (nucleoside-modified); dostopno na Development Plan to Evaluate COVID-19 Booster and New https://www.ema.europa.eu/en/documents/assessment- Vaccine Variants. Pfizer; dosotpno na report/comirnaty-epar-public-assessment-report_en.pdf. https://investors.biontech.de/news-releases/news-release- (datum dostopa 30. 3. 2021) details/pfizer-and-biontech-initiate-study-part-broad- development-plan (datum dostopa 30. 3. 2021). EMA Approves New Storage Option for Pfizer-BioNTech Scientists study mass vaccination in Austrian district hit hard by Vaccine, Easing Distribution and Storage of Doses Across European Union | Pfizer; dostopno na South African COVID variant. Euronews; dostopno na https://www.pfizer.com/news/press-release/press-release- https://www.reuters.com/article/us-health-coronavirus-austria- detail/ema-approves-new-storage-option-pfizer-biontech- idUSKBN2AV1CF?fbclid=IwAR2zPLPS101Q8n2BoQfnjbcTeEmbX vaccine (datum dostopa 30. 3. 2021). KOUTzjYnqRLd0snB5KFeMA55WrLODE (datum dostopa 30. 3. 2021). N. A. C. Jackson, K. E. Kester, D. Casimiro, S. Gurunathan in F. DeRosa. »The promise of mRNA vaccines: a biotech and Vektorska cepiva industrial perspective.« NPJ Vaccines 2020, 5, 1–6. J. R. Teijaro in D. L. Farber. COVID-19 vaccines: modes of N. C. Kyriakidis, A. López-Cortés, E. V. González, A. B. Grimaldos immune activation and future challenges. Nat. Rev. Immunol. in E. O. Prado. »SARS-CoV-2 vaccines strategies: a comprehensive review of phase 3 candidates.« NPJ vaccines 2021 , 21, 195–197. 2021, 6, 28. S. Singh, R. Kumar in B. Agrawal. »Adenoviral Vector-Based Project Lightspeed – Public | BioNTech; dostopno na Vaccines and Gene Therapies: Current Status and Future https://biontech.de/covid-19-portal/project-lightspeed (datum Prospects.« Adenoviruses 2019. dostopa 30. 3. 2021) U. Sahin, K. Krikó in Ö Türeci. »mRNA-based therapeutics- Značilnosti cepiva proizvajalca AstraZeneca developing a new class of drugs.« Nature Reviews Drug Discovery 2014, 13, 759–780. A. Almuqrin, A. Davidson, M. K. Williamson, P. Lewis, K. Heesom, S. Morris, S. Gilbert in D. Matthews. »SARS-CoV-2 Y. N. Lamb. »BNT162b2 mRNA COVID-19 Vaccine: First candidate vaccine ChAdOx1 nCoV-19 infection of human cell Approval.« Drugs 2021, 81, 495–501. lines reveals a normal low range of viral backbone gene Y. Wang in sod. »mRNA vaccine: a potential therapeutic expression alongside very high levels of SARS-CoV-2 S strategy.« Mol. Cancer 2021, 20, 33. glycoprotein expression.« Genome Med. 2020, 1–17. 38 P. L. Abbink, e. Angelique in sod. »comparative seroprevalence and immunogenicity of six rare serotype recombinant adenovirus vaccine vectors from subgroups b and d.« journal of Assessment report COVID-19 Vaccine AstraZeneca; dostopno na virology 2007, 81, 4654-63. https://www.ema.europa.eu/en/medicines/human/EPAR/covid -19-vaccine- N. B. Mercado, r. Zahn, f. Wegmann in sod. »single-shot ad26 astrazeneca?fbclid=IwAR081Lvs179VBlNzxf0OOvZoJZliM9818O vaccine protects against sars-cov-2 in rhesus macaques.« nature RbuliEiytkH-gGVi0MouiDAZs#authorisation-details-section 2020, 586, 583–588. (datum dostopa 19. 3. 2021). L. G. Sadoff j, g. Shukarev in sod. »interim results of a phase 1- M. D. J. Dicks, A. J. Spencer, N. J. Edwards, G. Wadell, K. Bojang, 2a trial of ad26.cov2.s covid-19 vaccine.« n engl j med. 2021. S. C. Gilbert, A. V. S. Hill in M. G. Cottingham »A novel Doi: 10.1056/nejmoa2034201. chimpanzee adenovirus vector with low human seroprevalence: Janssen investigational covid-19 vaccine: interim analysis of Improved systems for vector derivation and comparative phase 3 clinical data released; dostopno na immunogenicity.« PLoS One 2012, 7(7). https://www.nih.gov/news-events/news-releases/janssen- N. van Doremalen in sod. »ChAdOx1 nCoV-19 vaccine prevents investigational-covid-19-vaccine-interim-analysis-phase-3- SARS-CoV-2 pneumonia in rhesus macaques.« Nature 2020, clinical-data-released (datum dostopa 5. 4. 2021). 586(7830), 578–582. Fact sheet for recipients and caregivers’ emergency use P. M. Folegatti in sod. »Safety and immunogenicity of the authorization (eua) of the janssen covid-19 vaccine to prevent ChAdOx1 nCoV-19 vaccine against SARS-CoV-2: a preliminary coronavirus disease 2019 (covid-19) in individuals 18 years of report of a phase 1/2, single-blind, randomised controlled trial.« age and older; dostopno na Lancet 2020, 396(10249), 467–478. https://www.fda.gov/media/146305/download (datum dostopa 5. 4. 2021). S. Singh, R. Kumar in B. Agrawal. »Adenoviral Vector-Based Vaccines and Gene Therapies: Current Status and Future Johnson & johnson covid-19 vaccine authorized by u.s. fda for Prospects.« Adenoviruses 2019. emergency use - first single-shot vaccine in fight against global pandemic; dostopno na https://www.jnj.com/johnson-johnson- covid-19-vaccine-authorized-by-u-s-fda-for-emergency-usefirst- Rezultati kliničnih testiranj cepiva proizvajalca single-shot-vaccine-in-fight-against-global-pandemic (datum AstraZeneca dostopa 5. 4. 2021). AZD1222 US Phase III trial met primary efficacy endpoint in Per.c6 cell lines; dostopno na https://www.gmp- preventing COVID-19 at interim analysis; dostopno na creativebiolabs.com/per-c6-cell-lines_74.htm (datum dostopa https://www.astrazeneca.com/media-centre/press- 5. 4. 2021). releases/2021/astrazeneca-us-vaccine-trial-met-primary- Covid vaccine: eu regulators approve johnson & johnson shot; endpoint.html (datum dostopa 19. 3. 2021). dostopno na https://www.dw.com/en/covid-vaccine-eu- COVID-19 Vaccine AstraZeneca: benefits still outweigh the risks regulators-approve-johnson-johnson-shot/a-56834858 (datum despite possible link to rare blood clots with low blood platelets dostopa 5. 4. 2021). | European Medicines Agency; dostopno na https://www.ema.europa.eu/en/news/covid-19-vaccine- Značilnosti cepiva astrazeneca-benefits-still-outweigh-risks-despite-possible-link- proizvajalca Gamaleya rare-blood-clots (datum dostopa 19. 3. 2021). COVID-19 and Sputnik V Vaccine; dostopno na https://www.researchgate.net/publication/344336325_COVID- E. Callaway. »Oxford Covid Vaccine Results Puzzle Scientists.« 19_and_Sputnik_V_Vaccine (datum dostopa 10. 4. 2021) Nature 2020, 588. D. Logunov in sod. »Safety and efficacy of an rAd26 and rAd5 Federal Health Officials Say AstraZeneca Vaccine Trial May Have vector-based heterologous prime-boost COVID-19 vaccine: an Relied on ‘Outdated Information’; dostopno na interim analysis of a randomised controlled phase 3 trial in https://www.nytimes.com/live/2021/03/22/world/covid- Russia.« The Lancet. 2021, 397. vaccine-coronavirus-cases (datum dostopa 19. 3. 2021). How Gamaleya’s Vaccine Works; dostopno na M. Voysey in sod. »Single https://www.nytimes.com/interactive/2021/health/gamaleya- Dose Administration, And The Influence Of The Timing covid-19-vaccine.html (datum dostopa 10. 4. 2021) Of The Booster Dose On Immunogenicity and Efficacy I. Jones in P. Roy. »Sputnik V COVID-19 vaccine candidate Of ChAdOx1 nCoV-19 (AZD1222) Vaccine.« SSRN Electron. J. appears safe and effective.« The Lancet. 2021, 8(4), e26. 2021. doi:10.2139/ssrn.3777268. N. Hilal, N. Melhem, F. El-Jardali. »K2P COVID-19 Series: A Closer Look at COVID-19 Vaccines: The Known, the Unknown, Značilnosti cepiva proizvajalca Johnson & Johnson / and the Uncertain.« Knowledge to Policy (K2P) Center, 2021. Janssen Phase III trial shows Sputnik V COVID-19 vaccine is 91.6 percent J. Custers, d. Kim in sod. »vaccines based on replication effective; dostopno na incompetent ad26 viral vectors: standardized template with key https://www.europeanpharmaceuticalreview.com/news/14159 considerations for a risk/benefit assessment.« vaccine 2020. 7/phase-iii-trial-shows-sputnik-v-covid-19-vaccine-is-91-6- 10.1016/j.vaccine.2020.09.018. percent-effective/ (datum dostopa 10. 4. 2021). L. Tostanoski, f. Wegman in sod . »ad26 vaccine protects against Russia’s Sputnik V COVID-19 Vaccine: How They Did It; sars-cov-2 severe clinical disease in hamsters.« nature medicine. dostopno na https://swarajyamag.com/science/russias-sputnik- 2020, 26, 1-7. v-covid-19-vaccine-how-they-did-it (Datum dostopa 10. 4. 2021) R. Bos, l. Rutten in sod. » ad26 vector-based covid-19 vaccine Russian SARS-CoV-2 vaccine; dostopno na encoding a prefusion-stabilized sars-cov-2 spike immunogen https://www.bmj.com/content/370/bmj.m3270 (datum induces potent humoral and cellular immune responses.« npj dostopa 10. 4. 2021) vaccine 2020, 28, 5-91. 39 Scientists question ‘strange’ data in Russian coronavirus vaccine https://covid19.trackvaccines.org/vaccines/5/#trial- trial after ‘unlikely’ patterns; dostopno na chictr2000034780 (datum dostopa 20. 4. 2021). https://www.cnbc.com/2020/09/10/scientists-question- Sinopharm’s COVID-19 vaccine 79% effective, seeks approval in russian-vaccine-trial-data-on-unlikely-patterns.html (datum China | Reuters; dostopno na dostopa 10. 4. 2021) https://www.reuters.com/article/us-health-coronavirus-china- Sputnik V vaccine has 91.6% efficacy against symptomatic vaccine/sinopharms-covid-19-vaccine-79-effective-seeks- Covid, Russian trial suggests; dostopno na approval-in-china-idUSKBN2940C8 (datum dostopa 20. 4. 2021). https://www.theguardian.com/society/2021/feb/02/sputnik-v- Sinovac: CoronaVac – COVID19 Vaccine Tracker; dostopno na vaccine-has-916-efficacy-against-symptomatic-covid-russian- https://covid19.trackvaccines.org/vaccines/7/#trial- trial-suggests (datum dostopa 10.4.2021) nct04651790 (datum dostopa 20. 4. 2021). Sputnik V. The First Registered COVID-19 Vaccine. Proven Y. Zhangv in sod. »Safety, tolerability, and immunogenicity of an Human Adenoviral Vector Technology; dostopno na inactivated SARS-CoV-2 vaccine in healthy adults aged 18–59 https://sputnikvaccine.com/about-vaccine/clinical-trials/ years: a randomised, double-blind, placebo-controlled, phase (datum dostopa 10. 4. 2021) 1/2 clinical trial.« Lancet Infect. Dis. 2021, 21(2), 181–192. The Russian Direct Investment Fund: RDIF, The Gamaleya National Center, AstraZeneca and R-Pharm sign an agreement to cooperate on COVID-19 vaccine development; dostopno na Značilnosti cepiva proizvajalca Bharat Biotech https://rdif.ru/Eng_fullNews/6220/ (datum dostopa B. Ganneru in sod. »Th1 skewed immune response of whole 10. 4. 2021). virion inactivated SARS CoV 2 vaccine and its safety evaluation.« iScience 2021, 24(4), 102298. Značilnosti cepiva proizvajalca CanSino Bharat Biotech,COVAXIN® - India’s First Indigenous COVID-19 Vaccine; dostopno na S. Wu in sod. »A single dose of an adenovirus-vectored vaccine https://www.bharatbiotech.com/covaxin.html (datum dostopa provides protection against SARS-CoV-2 challenge.« Nat. 20. 4. 2021) Commun. 2020. D. McMaster, M. Veremu in K. Jonas. »Inactivated COVID-19 N. Tatsis in H. C. J. Ertl. »Adenoviruses as vaccine vectors.« vaccine BBV152/COVAXIN effectively neutralizes recently Molecular Therapy 2004. emerged B 1.1.7 variant of SARS-CoV-2.« Int. Soc. Travel Med. H. Fausther-Bovendo in G. P. Kobinger »Pre-existing immunity 2020, 1–56. against Ad vectors: Humoral, cellular, and innate response, Fact sheet for vaccine recipients & caregivers restricted use in what’s important?« Human Vaccines and Immunotherapeutics emergency situation of covid-19 sars-cov-2 vaccine by bharat 2014. biotech; dostopno na F. C. Zhu in sod. »Immunogenicity and safety of a recombinant https://cdsco.gov.in/opencms/export/sites/CDSCO_WEB/en/bi adenovirus type-5-vectored COVID-19 vaccine in healthy adults otechver.pdf (datum dostopa 20. 4. 2021) aged 18 years or older: a randomised, double-blind, placebo-How Bharat Biotech’s Vaccine Works; dostopno na controlled, phase 2 trial.« Lancet 2020, 396, 479–488. https://www.nytimes.com/interactive/2021/health/bharat- biotech-covid-19-vaccine.html (datum dostopa 10. 4. 2021). Inaktivirana cepiva P. D. Yadav in sod. »Immunogenicity and protective efficacy of inactivated SARS-CoV-2 vaccine candidate, BBV152 in rhesus E. Callaway. The race for coronavirus vaccines: a graphical macaques.« Nat. Commun. 2021, 12(1), 1–11, 2021. guide. Nature 2020, 580, 576–577. S. Mohandas in sod. »Immunogenicity and protective efficacy of BBV152, whole virion inactivated SARS- CoV-2 vaccine Značilnosti cepiva proizvajalcev Sinopharm in Sinovac candidates in the Syrian hamster model.« i Science 2021, 24(2), 102054. Big Chile study finds Chinese vaccine slashes COVID deaths - ABC News; dostopno na https://abcnews.go.com/Health/wireStory/big-chile-study- Cepiva iz delov patogena finds-chinese-vaccine-slashes-covid-77120616 (datum dostopa E. Callaway. The race for coronavirus vaccines: a graphical 20. 4. 2021). guide. Nature 2020, 580, 576–577. CoronaVac – Wikipedia; dostopno na https://en.wikipedia.org/wiki/CoronaVac (datum dostopa 20. 4. 2021). Značilnosti cepiva proizvajalca Novavax H. Wang in sod. »Development of an Inactivated Vaccine C. Boutin: NIST Clarifies Structure of Prospective Vaccine for Candidate, BBIBP-CorV, with Potent Protection against SARS- Respiratory Virus | NIST; dostopno na CoV-2.« Cell 2020, 182(3), 713- 721.e9. https://www.nist.gov/news-events/news/2020/12/nist- clarifies-structure-prospective-vaccine-respiratory-virus (datum Principles of Vaccination; dostopno na dostopa 3. 5. 2021). https://www.cdc.gov/vaccines/pubs/pinkbook/prinvac.html (Datum dostopa 20. 4. 2021). C. Keech in sod. »Phase 1–2 Trial of a SARS-CoV-2 Recombinant Spike Protein Nanoparticle Vaccine.« N. Engl. J. Med. 2020, S. Xia in sod. »Safety and immunogenicity of an inactivated 383(24), 2320–2332. SARS-CoV-2 vaccine, BBIBP-CorV: a randomised, double-blind, placebo-controlled, phase 1/2 trial.« Lancet Infect. Dis. 2021, E. Mahase. »Covid-19: Moderna and Novavax vaccines to be 21(1), 39–51. tested in mixing vaccines trial.« BMJ 2021, 372, n971. Sinopharm (Beijing): BBIBP-CorV – COVID19 Vaccine Tracker; J. H. Tian in sod. »SARS-CoV-2 spike glycoprotein vaccine dostopno na candidate NVX-CoV2373 immunogenicity in baboons and protection in mice.« Nat. Commun. 2021, 12(1), 1–14. 40 J. M. Reimer in sod. »Matrix-MTM Adjuvant Induces Local Prevention of COVID-19; dostopno na Recruitment, Activation and Maturation of Central Immune https://www.clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT04780035?id=NCT Cells in Absence of Antigen.« PLoS One. 2012, 7(7), e41451. 04780035&draw=2&rank=1&load=cart (datum dostopa 4. 5. 2021) N. Formica in sod. »Evaluation of a SARS-CoV-2 Vaccine NVX- CoV2373 in Younger and Older Adults.« medRxiv 2021, str. Značilnosti cepiva proizvajalca VBI Vaccines 2021.02.26.21252482. A. C. Fluckiger in sod. »An enveloped virus-like particle vaccine Novavax Confirms High Levels of Efficacy Against Original and expressing a stabilized prefusion form of the SARS-CoV-2 spike Variant COVID-19 Strains in United Kingdom and South Africa protein elicits potent immunity after a single dose.« bioRxiv Trials | Novavax Inc. - IR Site; dostopno na 2021. https://ir.novavax.com/news-releases/news-release- CSO Preclinical Coronavirus Program Data; dostopno na details/novavax-confirms-high-levels-efficacy-against-original- https://1o976r1jw2eculmeoxz46ig6-wpengine.netdna- and-0 (datum dostopa 4. 5. 2021). ssl.com/wp-content/uploads/2020/08/August-2020-VBI-2900- Novavax Initiates Phase 2 Portion of Phase 1/2 Clinical Trial of Preclinical-Data-Announcement_Final.pdf (datum dostopa COVID-19 Vaccine | Novavax Inc. - IR Site; dostopno na 10. 5. 2021) https://ir.novavax.com/news-releases/news-release- VBI-2902 – Wikipedia, dostopno na details/novavax-initiates-phase-2-portion-phase-12-clinical- https://en.wikipedia.org/wiki/VBI-2902 (datum dostopa trial-covid (datum dostopa 4. 5. 2021). 5. 5. 2021) Phase 3 trial of Novavax investigational COVID-19 vaccine opens VBI-2902a - ClinicalTrials.gov, Safety, Tolerability, and | National Institutes of Health (NIH); dostopno na Immunogenicity of the COVID-19 Vaccine Candidate (VBI- https://www.nih.gov/news-events/news-releases/phase-3-trial- 2902a); dostopno na novavax-investigational-covid-19-vaccine-opens (datum https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT04773665 (datum dostopa 4. 5. 2021). dostopa 7. 5. 2021) Polysorbate 80 – Wikipedia; dostopno na VBIVACCINE - VBI Vaccines Announces Preclinical Coronavirus https://en.wikipedia.org/wiki/Polysorbate_80 (datum dostopa Program Data and Selection of Clinical Candidates with 3. 5. 2021). Potential as One-Dose Vaccines; dostopno na S. Bangaru in sod. »Structural analysis of full-length SARS-CoV-2 https://www.vbivaccines.com/press-releases/preclinical- spike protein from an advanced vaccine candidate.« Science. coronavirus-data-candidate-selection/ (datum dostopa 2020, 370(6520), 1089–1094. 7. 5. 2021) The Cold Truth about COVID-19 Vaccines; dostopno na VBIVACCINE – VBI Vaccines Announces Publication of Preclinical https://www.genengnews.com/news/the-cold-truth-about- and Challenge Study Data of its eVLP Vaccine Candidate Against covid-19-vaccines/ (datum dostopa 4. 5. 2021). COVID-19 (VBI-2902); dostopno na https://www.vbivaccines.com/press-releases/vbi-2902- Urgent global health needs addressed by Novavax; dostopno na preclinical-and-challenge-study-data/ (datum dostopa https://www.novavax.com/our-unique-technology (datum 6. 5. 2021) dostopa 3. 5. 2021). Uporabnost obstoječih cepiv proti novim variantam Značilnosti cepiva proizvajalca Vector virusa SARS-CoV-2 A. B. Ryzhikov in sod. »A single blind, placebo-controlled Brazilian, UK and South African variants; dostopno na randomized study of the safety, reactogenicity and https://www.bhf.org.uk/informationsupport/ heart-matters- immunogenicity of the ‘EpiVacCorona’ Vaccine for the prevention of COVID-19, in volunteers aged 18–60 years (phase magazine/news/coronavirus-and-your-health/covid- I–II).« Russ. J. Infect. Immun. 2021, 11(2), 283–296. variant#UKModerna (datum dostopa 25. 5. 2021) A. B. Ryzhikov in sod. »Immunogenicity and protectivity of the D. Connelly: Everything you need to know about COVID-19 peptide candidate vaccine against SARS-CoV-2.« Ann. Russ. vaccines. The Pharmaceutical Journal; dostopno na Acad. Med. Sci. 2021, 76(1), 5–19. https://pharmaceutical-journal.com/article/feature/everything- you-need-to-know-about-covid-19-vaccines (datum dostopa A. B. Ryzhikov in sod. »Peptide immunogens and vaccine 26. 5. 2021) composition against COVID-19 coronavirus infection using peptide immunogens.« Patent RU 2738081. 2020. Sledenje različicam SARS-CoV-2; dostopno na https://www.nlzoh.si/objave/sledenje-razlicicam-sars-cov-2-5/ EpiVacCorona – Wikipedia; dostopno na (datum dostopa 24. 5. 2021) https://en.wikipedia.org/wiki/EpiVacCorona (datum dostopa 5. 5. 2021). EpiVacCorona Vaccine – precision vaccinations; dostopno na Opuščena cepiva https://www.precisionvaccinations.com/vaccines/epivaccorona -vaccine (datum dostopa 4. 5. 2021) F. Tangy in H. Y. Naim. »Live attenuated measles vaccine as a potential multivalent pediatric vaccination vector.« Viral G. B. Fields. »Introduction to peptide synthesis.« Current Immunol. 2005, 18(2), 317–326. protocols in protein science 2002, 18, 18.1. IAVI Press release; dostopno na https://www.iavi.org/news- Study of the Safety, Reactogenicity and Immunogenicity of resources/press-releases/2021/merck-and-iavi-discontinue- "EpiVacCorona" Vaccine for the Prevention of COVID-19 development-of-covid-19-vaccine-candidate-v590 (datum (EpiVacCorona) Dostopno na dostopa 7. 4. 2021). https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT04527575 (datum dostopa 4. 5. 2021) Independent - Imperial College London; dostopno na https://www.independent.co.uk/news/health/covid-vaccine- Study of the Tolerability, Safety, Immunogenicity and variant-imperial-college-uk-b1792766.html (datum dostopa Preventive Efficacy of the EpiVacCorona Vaccine for the 6. 4. 2021). 41 Institut Pasteur Press release: dostopno na https://www.pasteur.fr/en/research-journal/press- documents/covid-19-progress-update-institut-pasteur-s- scientific-response-and-vaccine-candidate-research (datum dostopa 7. 4. 2021). M. E. Dieterle in sod. »A replication-competent vesicular stomatitis virus for studies of SARS-CoV-2 spike-mediated cell entry and its inhibition.« bioRxiv Prepr. Serv. Biol. 2020. Molecular clamp vaccines; dostopno na https://www.nature.com/articles/d42473-020-00504- 2?source=globalbiodefense&fbclid=IwAR2akaPqMNeVnHbnkKE ZIhg11d-bNQTI8xfM8KIT9dFNeLw6QNGXu5JGjEc (datum dostopa 6. 4. 2021). Precision vaccinations; dostopno na https://www.precisionvaccinations.com/vaccines/uq-csl-v451- vaccine (datum dostopa 6. 4. 2021). 42