Rebeka Mukenauer¹*, Lara Medved²*, Petra Hrast³*, Nada Rotovnik Kozjek4* Klinični znaki pomanjkanja vitamina B12 pri vegetarijanskih in veganskih dietah Clinical Signs of Vitamin B12 Deficiency in Vegetarian and Vegan Diets IZvLEČEK KLJUČNE BESEDE: vitamin B12, pomanjkanje, vegetarijanstvo, veganstvo, klinični primer, subakutna kombinirana degeneracija hrbtenjače, prehranska dopolnila Prevalenca in vpliv pomanjkanja vitamina B12 se skozi življenjska obdobja spreminjata in najbolj ogrožata razvoj zarodka, starostnike in posameznike z različnimi izločevalni- mi prehranskimi strategijami, predvsem vegetarijance in vegane. Specifični načini pre- hranjevanja so poleg staranja najpogostejši dejavnik, ki doprinese k razvoju kliničnih stanj, povezanih s pomanjkanjem vitamina B12. V prispevku na osnovi kliničnega primera raz- pravljamo o vplivu pomanjkanja vitamina B12 pri veganskem načinu prehranjevanja. Pomanjkanje vitamina B12 povzroča spremembe celične presnove in pripomore k funk- cionalnemu opešanju in razvoju bolezenskih stanj, povezanih s staranjem. Prepoznan je vpliv na kognitivno popuščanje, razvoj srčno-žilnih bolezni, bolezni kosti, krvi in živčnega sistema. Danes je vodilni razlog za hipovitaminozo B12 v malabsorpciji vitamina iz pre- bavil. Zaloge vitamina B12 se nahajajo v jetrih in po prekinitvi vnosa zadostujejo za pri- bližno tri do šest let. Po tem obdobju se pojavi pomanjkanje, ki se lahko odraža celo kot degeneracija hrbtenjače ali pancitopenija. Zaradi tega je izredno pomembna pravočasna prepoznava stanja pomanjkanja in primerno zdravljenje. aBSTRaCT KEY WORDS: vitamin B12, deficiency, vegetarianism, veganism, clinical case, subacute combined degeneration of the spinal cord, dietary supplements The prevalence and impact of vitamin B12 deficiency change through different life sta- ges. Vitamin B12 deficiency is most dangerous for embryonic development, for elderly people, and individuals with different nutritional strategies, especially vegetarians and vegans. In addition to aging, specific nutritional habits are the most common factor, which increases the risk of developing clinical conditions associated with a lack of vitamin B12. In this article, we discuss the impact of vitamin B12 deficiency in a vegan diet based on 1 Rebeka Mukenauer, štud. med., Medicinska fakulteta, Univerza v Ljubljani, Vrazov trg 2, 1000 Ljubljana; gregorc.rebeka@gmail.com 2 Lara Medved, štud. med., Medicinska fakulteta, Univerza v Ljubljani, Vrazov trg 2, 1000 Ljubljana ³ Petra Hrast, štud. med., Medicinska fakulteta, Univerza v Ljubljani, Vrazov trg 2, 1000 Ljubljana 4 Izr. prof. dr. Nada Rotovnik Kozjek, dr. med., Katedra za interno medicino, Medicinska fakulteta, Univerza v Ljubljani, Vrazov trg 2, 1000 Ljubljana; Enota za klinično prehrano, Onkološki inštitut Ljubljana, Zaloška cesta 2, 1000 Ljubljana * Avtorji si delijo mesto prvega avtorja. 227Med Razgl. 2021; 60 (2): 227–38 • Pregledni članek mr21_2_Mr10_2.qxd 21.6.2021 8:51 Page 227 a clinical case. A low intake of vitamin B12 causes changes in cellular metabolism and leads to functional weakening and the development of medical conditions associated with aging. The most commonly recognized are the impact on cognitive decline, the development of cardiovascular diseases, bone diseases, hematologic diseases and neurological disor- ders. Nowadays, the most common cause of vitamin B12 hypovitaminosis is the food- bound vitamin malabsorption in individuals. The amount of cobalamin stored in the liver is sufficient for approximately three to six years after dietary intake has been cut off. After that period, the deficit can appear as a degeneration of the spinal cord or pancytopenia. Vitamin B12 deficiency requires consistent diagnostics and adequate medical treatment. BIOKEMIJa IN FIZIOLOGIJa vITaMINa B12 Izraz vitamin B12 predstavlja skupino vodotopnih mikrohranil oz. oblik vitamina, ki jih človeško telo ni sposobno izgraditi. Ta skupina kobaltovih spojin ali kobala- minov vsebuje planarni obroč, v katerega je vezan posamezen kobaltov atom. Kobalt predstavlja funkcionalni del vitamina B12 in deluje kot encimski kofaktor v presnov- nih reakcijah, ki jih katalizira ta vitamin (4). Vitamin B12 spada med esencialna mikro- hranila, tako da je nujno uživanje zadostnega vnosa s hrano (dnevno vsaj 3 μg). Najdemo ga v hrani živalskega izvora, kot so rdeče meso, drobovina, ribe, jajca in mlečni izdel- ki (6–9). V 100 g kravjega mleka se nahaja 0,4–0,5 μg vitamina B12, 100 g drugih mle- čnih izdelkov vsebuje 3,6–4,2 μg, 100 g jajc pa 1,1–2,5 μg vitamina B12. Če upošteva- mo še izgube med kuhanjem in absorpcij- sko vrednost, te količine niso zadostne za zagotovitev priporočenega dnevnega vnosa vitamina B12. Najvišja tolerirana količina, zaužita s hrano ali prehranskimi dodatki, še ni bila določena, saj še ni zadovoljivih podatkov o toksičnosti tega vitamina (5). Vitamin B12 se zaradi kislega pH v želod- cu sprosti iz zaužite hrane in se z želodčno vezavno beljakovino R poveže v kompleks. Po vstopu v dvanajstnik se ta kompleks prebavi, vitamin B12 pa se veže na intrin- zični dejavnik, 50 kDa velik glikoprotein, ki nastaja v parietalnih celicah želodca in deluje kot prenašalna beljakovina za trans- 228 Rebeka Mukenauer, Lara Medved, Petra Hrast, Nada Rotovnik Kozjek Klinični znaki pomanjkanja … UvOD Prevalenca in vpliv pomanjkanja vitamina B12 se spreminjata skozi življenjska obdob- ja. Med najbolj ogrožene populacije spada- jo starostniki in nosečnice (1–3). Pomanjkanje vitamina B12 negativno vpliva na razvoj nevralne cevi in pripomore k razvoju priro- jene okvare. Ker k pomanjkanju vitamina B12 ključno doprinese starostno popuščanje delo- vanja prebavil, so specifični načini prehra- njevanja tako, poleg staranja, najpogostejši dejavnik, ki doprinese k razvoju kliničnih stanj, povezanih s pomanjkanjem vitamina B12 (4). Med sodobnimi trendi prehranje- vanja se vse bolj povečuje delež vegetari- jancev in veganov oz. ljudi, ki se odločijo iz svoje prehrane popolnoma izključiti izdelke živalskega izvora. Vzroki, ki jih za ta način prehranjevanja navajajo, so različni, od etičnih do ekoloških, mnogi posamezniki v ospredje postavljajo tudi skrb za lastno zdravje. Kljub temu da ima omenjen način prehranjevanja lahko potencialne koristi za zdravje posa- meznika, je nujno zavedanje, da je ob uvaja- nju sprememb na področju prehrane potreb- na zadostna mera znanja. Le na ta način lahko namreč nadomestimo potencialno zdravje ogrožajoča pomanjkanja in se jim učinkovi- to izognemo. Pomanjkanje vitamina B12 povzroča spremembe celične presnove in pri- pomore k funkcionalnemu opešanju in raz- voju bolezenskih stanj, povezanih s staranjem. Prepoznan je vpliv na kognitivno popuščanje, razvoj srčno-žilnih bolezni in bolezni kosti, krvi in živčnega sistema (5). mr21_2_Mr10_2.qxd 21.6.2021 8:51 Page 228 port vitamina B12 v celico. Novonastali kompleks nato potuje do distalnega ileuma, kjer se veže na receptorje na sluznici in se z receptorsko endocitozo privzame v muko- zne celice ileuma. Znotraj celice se intrin- zični faktor razgradi, vitamin B12 pa se veže na transportno beljakovino transkobala- min II, kompleks vitamina B12 in trans- kobalamina II pa nato vstopi v krvni obtok. Kompleks prevzamejo jetrne celice, celice kostnega mozga in drugih organov; razpo- lovni čas zaradi hitrega privzema znaša pri- bližno eno uro. V citosolu celice je vitamin B12 kot kofaktor udeležen v pretvorbi homocisteina v metionin, v mitohondrijih celice pa vitamin B12 sodeluje v pretvorbi metilmalonil-CoA v sukcinil-CoA. Po vsto- pu v celice se vitamin B12 shranjuje v jetrih, kjer sta shranjena približno 2 mg vitamina B12, še 2 mg pa se nahajata drugje v tele- su (7–10). Cianokobalamin je sintetična oblika vitamina B12 in ga najpogosteje najdemo v prehranskih dopolnilih in z vitaminom B12 obogatenih živilih. Biološko aktivni obliki vitamina B12, metilkobalamin in deoksiadenozilkobalamin, pa sta tesno vpleteni v celično presnovo in v telesu sodelujeta kot kofaktorja pri izgradnji DNA, maščobnih kislin in mielina. Metilkoba- lamin je kofaktor encima metionin sinta- za, ki je potreben za pretvorbo homo- cisteina v metionin. Disfunkcija reakcij metilacije je vpletena v pomanjkljivo celi- čno izgradnjo številnih drugih biološko aktivnih skupin, ki igrajo pomembno vlogo v uravnavanju izražanja genov in delova- nju beljakovin. V sklopu teh reakcij pride tudi do pretvorbe metil-tetrahidrofolata (metil-THF) v tetrahidrofolat (THF), ki je potreben za izgradnjo pirimidinov. Pri pomanjkanju vitamina B12 se homo- cistein ne more pretvoriti v metionin, torej se tudi metil-THF ne more pretvoriti v THF, kar vodi v kopičenje homocisteina. Posledice so zmanjšana tvorba pirimidinov in upočasnjena izgradnja DNA, kar vodi v megaloblastno anemijo. Hiperhomocis- teinemija je dejavnik tveganja za arterij- sko in vensko trombozo. Zmanjšana izgrad- nja metionina vodi v pomanjkanje holina, zaradi česar je motena presnova nevronov v perifernem in osrednjem živčnem siste- mu. Adenozilkobalamin je kofaktor encima metilamalonil-koencim A (CoA) mutaza, ki pretvori metilmalonil-CoA v sukcinil-CoA. Pri pomanjkanju vitamina B12 torej pride do kopičenja metilmalonil-CoA, kar spre- meni izgradnjo maščobnih kislin v živčnih celicah. To vodi v nastanek nefizioloških maščobnih kislin, ki se vgrajujejo v maš- čobe celičnih membran, kar privede do demielinizacije in propada aksonov peri- fernega in osrednjega živčnega sistema (7, 9, 11–13). Vitamin B12 je vključen tudi v izgrad- njo živčnih prenašalcev (dopamin, seroto- nin), zato njegovo pomanjkanje, skupaj z visokimi koncentracijami homocisteina, vodi v razvoj psihiatričnih simptomov. Homocistein je namreč v visokih koncen- tracijah toksičen za nevrone, saj prekomer- no aktivira receptorje N-metil-D-aspartata (angl. N-methyl-D-aspartate receptor, NMDA- -receptor) (7, 9, 11–13). Zaradi ključne vloge v celični presno- vi tako pomanjkanje vitamina B12 vodi do presnovnih motenj, ki s starostjo doprine- sejo k razvoju kognitivnega popuščanja, raz- voju srčno-žilnih obolenj, bolezni kosti, krvi in živčnega sistema. Pomanjkanje vita- mina B12 se pokaže šele po izpraznitvi vseh telesnih zalog, tj. od tri do šest let po pre- kinitvi vnosa ali absorbcije (6–11). Pomanjkanje vitamina B12 se lahko pojavi zaradi različnih vzrokov (tabela 1). Diagnostika pomanjkanja vitamina B12 – Schillingov test Schillingov test opravljamo pri bolnikih, pri katerih je prisotno pomanjkanje vita- mina B12. S tem želimo oceniti, ali je to posledica pomanjkanja intrinzičnega dejav- nika. 229Med Razgl. 2021; 60 (2): mr21_2_Mr10_2.qxd 21.6.2021 8:51 Page 229 Test je sestavljen iz štirih delov: • Schillingov test 1: Bolnik zaužije radio- aktivno označen vitamin B12, temu po eni do šestih urah sledi še injekcija neozna- čenega vitamina B12 v mišico. Nato meri- mo odstotek radioaktivno označenega vita- mina B12 v zbranem 24-urnem urinu. Ta odstotek je normalno večji od 9% vnese- ne količine. Pri bolniku z normalnim delo- vanjem ledvic nižja vrednost izločanja (pod 5 % vnesene količine) kaže na zmanj- šano absorpcijo vitamina B12 v črevesju. • Schillingov test 2: Opravimo ga v primeru zmanjšane vrednosti izločanja. Ponovimo Schillingov test 1, tokrat z radioaktivno označenim vitaminom B12, vezanim na prašičji intrinzični dejavnik. Če se pred- hodno zmanjšano izločanje sedaj izbolj- ša, je pomanjkanje vitamina B12 posle- dica pomanjkanja intrinzičnega dejavnika pri bolniku. • Schillingov test 3: Test ponovimo po dvotedenskem zdravljenju z antibiotiki. Če je izločanje sedaj izboljšano, je vzrok za slabo absorpcijo vitamina B12 razrast bakterij v črevesju. • Schillingov test 4: Dodatek pankreatičnih encimov izboljša absorpcijo vitamina B12 in izločanje v urinu, kar kaže na eksokrino pankreatično insuficienco (8, 11, 14, 15). 230 Rebeka Mukenauer, Lara Medved, Petra Hrast, Nada Rotovnik Kozjek Klinični znaki pomanjkanja … KLINIČNI PRIMER Klinični primer objavljamo z dovoljenjem bolnice in njene družinske zdravnice, ki nam je posredovala zapisane podatke. Bolnica je bila obravnavana v ambulanti družinske medicine Zdravstvenega doma Radovljica, nevrologa Splošne bolnišnice Jesenice in psihiatra Psihiatrične bolnišnice Begunje. Gospa, stara 41 let, zaposlena kot poslovodja, je prišla v ambulanto družinske medicine zaradi splošnega slabega počutja in občut- ka zaspanih nog. Opazila je težave z rav- notežjem, pri hoji po stopnicah navzdol in ni imela občutka pri speljevanju z avtom. Pojavilo se ji je mravljinčenje do spodnje- ga dela stegen. Zelo hitro se je utrudila. Težave so se ji začele pred pol leta in so se počasi stopnjevale. Pred tem je bila zdrava. Že nekaj let ni uživala hrane živalskega izvora – nič mesa, ne mlečnih izdelkov in jajc – bila je veganka. Ni jemala nobenih prehranskih dopolnil z vitaminom B12 ali injekcij hidroksokobalamina (OHB12) v mišico. Nevrološki pregled je pokazal okvaro globoke senzibilitete na spodnjih okončinah in mehke znake za možnost piramidne okvare na levi strani. Hematološke pre- iskave so pokazale makrocitno anemijo: levkociti 3,2 × 109/l (referenčne vrednosti: Tabela 1. Vzroki za pomanjkanje vitamina B12 (7, 9, 10). vzroki Primeri Avtoimunski vzroki perniciozna anemijaa, Sjögrenov sindrom Nizek vnos vitamina B12 vegani, vegetarijanci, alkoholiki, starejši ljudje Operacija pri pacientih po gastrektomiji ali resekciji črevesja Malabsorpcija atrofični gastritis, s Helicobacter Pylori povezan gastritis, Chronova bolezen, celiakijab, aklorhidrija, kronična pankreatična eksokrina insuficienca, razrast bakterij v tankem črevesju Zdravila oralni kontraceptivi, metformin, inhibitorji protonske črpalke, zaviralci histaminskega H2-receptorja, hormonska nadomestna terapija Genetski vzroki pomanjkanje transkobalamina II Drugi vzroki nosečnost, okužba gastrointestinalnega trakta s paraziti a Posledica pojava avtoprotiteles, ki so usmerjena proti parietalnim celicam želodca. Pomanjkanje intrinzičnega faktorja vodi v zmanjšano absorpcijo vitamina B12 v distalnem ileumu. b Vnetje črevesne stene vodi v moten privzem vitamina B12 v celice. mr21_2_Mr10_2.qxd 21.6.2021 8:51 Page 230 4–10 × 109/l), hemoglobin 119 g/l (referen- čne vrednosti: 120–160 g/l), povprečni volumen eritrocita (angl. mean corpuscular volume, MCV) 112 fl (referenčne vrednosti: 81–94 fl). Ostale vrednosti hemograma so bile v mejah normale, prav tako vrednosti folne kisline in elektrolitov v krvi. Naslednji mesec so se simptomi stop- njevali. Vrednost hemoglobina je padla na 113 g/l in MCV se je zvišal na 114 fl, vred- nost vitamina B12 v krvi je bila 111 pmol/l (referenčne vrednosti: 128–648 pmol/l). Odklonila je zdravljenje z nadomeščanjem vitamina B12 z injekcijami, ker je verjela, da je bila ena injekcija tega zdravila za njeno prijateljico smrtonosna. En mesec kasneje je tožila o bolečinah v nogah. Kljub opozorilu o posledicah po- manjkanja vitamina B12 ni sprejela pred- loga za zdravljenje z injekcijami. Čez 14 me- secev od prvega pregleda je v službi padla na trtico, imela zaradi tega hude bolečine v križu in še težje hodila. RTG lumbosakralne hrbtenice ni pokazal odstopanj. Bolečine v trtici so se postopoma umirjale, ostali simptomi so bili še vedno prisotni. Dve leti od prvega obiska zdravnika se je v službi dogovorila za polovični delovni čas, a tudi štiri delovne ure so bile zanjo pre- naporne. Poleg že prisotnih simptomov so se namreč pojavile težave s koncentracijo in spominom, imela je upočasnjene misli. Obljubila je, da bo začela uživati mlečne izdelke in da si bo priskrbela prehranske dodatke z vitamini skupine B. Zdravljenje z injekcijami je še vedno odklanjala. Čez dve leti in štiri mesece se je stanje stopnjevalo: otekali so ji gležnji, prisotni so bili znaki polinevropatije in pojavila se je ataksija hoje. Tudi vrednosti krvne slike so se poslabšale, kazale so na pancitopenijo in stopnjevanje makrocitne anemije: levkoci- ti 3,4 × 109/l, eritrociti 2,7 × 1012/l (referen- čne vrednosti: 4,2–6,3 × 1012/l), hemoglobin 106 g/l, hematokrit 0,31 (referenčne vred- nosti: 0,36–0,54), MCV 115 fl, povprečna količina hemoglobina v eritrocitu (angl. mean corpuscular hemoglobin, MCH) 40 pg (referenčne vrednosti: 26–32 pg). Ostale vrednosti in diferencialna krvna slika so bile v mejah normale. RTG lumbosakralne hrbtenice v dveh projekcijah in RTG trtice v stranski projekciji je pokazal, da so spod- nji trije trtični segmenti izraziteje anguli- rani navzpred, kar bi bilo lahko razvojno ali starejše stanje po poškodbi, intervertebral- ni prostori so bili ledveno primerno široki in simetrični, spinalni kanal ni bil videti zožen. Pristala je na zdravljenje z injekcijo 1 ml ampule OHB12 v mišico. Vrednosti hemograma en mesec po zdravljenju so se popravile, a še niso bile zadovoljive: levkociti 4,5 × 109/l, eritrociti 2,9×1012/l, hemoglobin 111g/l, MCV 112 fl in železo v krvi 11,6 μmol/l (referenčne vrednosti: 10,7–28,6 μmol/l). Izvid preiska- ve urina je bil v mejah normale. Izvid nevrološkega pregleda dve leti in pol od prvega obiska lečečega zdravnika je pokazal naslednja odstopanja: moč fleksije v levem kolku je bila oslabljena, levo stegno atrofično, levi patelarni refleks polikine- tičen, ahilova refleksa obojestransko neiz- vabljiva. Teste koordinacije s spodnjimi okončinami je bolnica izvedla blago dozi- metrično in na spodnjih okončinah ni zazna- la vibracij. Hodila je paretično in ataktično. Klinična slika je ustrezala subakutni kom- binirani degeneraciji hrbtenjače (angl. suba- cute combined degeneration of the spinal cord, SADC). Bolnica je isti mesec pristala na nadalj- nje zdravljenje z injekcijami OHB12, v ampu- lah po 1ml. Prva dva dni je prejela pol ampu- le na dan, naslednja dva dni po dve ampuli na dan. Po aplikaciji petih ampul vitamina B12 v roku štirih dni se je raven vitamina B12 v krvi zvišala na 147 pmol/l. Izvid elektro- miografije je na dan pete prejete ampule pokazal znake bolezni, ki je zajemala večje število živcev (aksonske polinevropatije), izražene na spodnjih okončinah: prizadeto je bilo motorično in senzorično nitje. Glede na polifazijo je šlo za znake popravljanja. Iz 231Med Razgl. 2021; 60 (2): mr21_2_Mr10_2.qxd 21.6.2021 8:51 Page 231 tujine je naročila tudi tablete z vitaminom B12. Naslednji mesec se ji je spomin izbolj- šal, hoja je bila manj nestabilna. Še vedno je bila upočasnjena. Prek meseca je preje- la še tri ampule OHB12; do tega trenutka je skupno prejela devet injekcij v mišico po 1ml OHB12. Ezofagogastroduodenoskopija ni pokazala odstopanj. Dva meseca kasneje so ji misli bolje tekle, še vedno je imela težave s spominom in zbranostjo. Gležnji ji niso več otekali. Izboljšalo se ji je ravnotežje. V zadnjem mesecu je začela s kolesarjenjem po rav- nem. Ni še zmogla hitrejše hoje ali hoje po stopnicah ter po neravnem terenu, ker je imela občutek trdih meč in težkih nog. Zjutraj je imela občutek omrtvelosti, ki je po razgibavanju izzvenel. Poskusila je s štiri- urnim delavnikom, vendar ga ni zmogla, zato je po štirih delovnih dneh ponovno šla v bolniški stalež. Zaradi pomanjkanja občut- ka v nogah še ni vozila avta. Nevrološki pre- gled je ponovno pokazal znake piramidne okvare na spodnjih okončinah, paretično in spastično hojo, senzibilitetni izpad za zbod- ljaj distalno od sredine goleni ter za vibra- cije na levi spodnji okončini. Psihiatrični pregled je potrdil anksiozno depresivno simptomatiko v sklopu prilagoditvene mot- nje. Želela je zdravljenje brez psihotropnih zdravil, zato se je vključila v program uče- nja obvladovanja stresnih, nevrotskih in čustvenih motenj. Tri leta po prvem obisku izbranega zdravnika oz. pet mesecev po zadnji preje- ti ampuli OHB12 ji je vrednost vitamina B12 v krvi ponovno padla na 86pmol/l, zato je prejela še pet injekcij OHB12 v mišico. Opustila je veganstvo. Naslednje pol leta se ji je stanje še naprej postopoma izboljševalo. Začela je telovaditi in se veliko gibati. Tri leta in pol po prvem pregledu MRI glave ni kazal odstopanj, prav tako nevrološki pregled. Raven vitamina B12 v krvi se je zvišala na 599 pmol/L. Vrnila se je v službo. Časovni pregled simptomov, znakov in odstopajočih laboratorijskih vrednosti hemoglobina, MCV in vitamina B12 glede na zdravljenje je prikazan v tabeli 2. POMaNJKaNJE vITaMINa B12 PRI PaCIENTIH Na vEGETaRIJaNSKI IN vEGaNSKI DIETI Klinični primer odraža kompleksno klinično sliko posameznika, ki se odloči za izključe- valni način prehranjevanja po tipu vegeta- rijanske ali veganske diete. V ospredju je nevrološka simptomatika, v ozadju pa šte- vilne klinične in socialne dileme. Pomanjkanje vitamina B12 pri tem načinu prehranjevanja se pojavlja pri tistih, ki dosledno sledijo vegetarijanski ali vegan- ski dieti in torej ne zaužijejo dovolj vitamina B12 s prehrano. Ob pojavu hematoloških, nevroloških in/ali psihiatričnih simpto- mov moramo pri bolniku, za katerega vemo, da ne uživa živalskih izdelkov, pomisliti na znižan vnos vitamina B12 (10). V literatu- ri se kot razlog za psihiatrične težave bol- nikov s hipovitaminozo B12 omenja njegova vloga pri izgradnji živčnih prenašalcev (serotonin, dopamin). Eden od razlogov naj bi bila tudi povišana koncentracija homo- cisteina, ki je nevrotoksičen in naj bi pre- komerno aktiviral NMDA-receptorje (11). Za ugotavljanje pomanjkanja vitamina B12 pri bolniku so pomembne anamneza, prehranska obravnava, klinična slika in laboratorijske preiskave. S prehransko obrav- navo želimo pridobiti predvsem podatke o bolnikovem preteklem in trenutnem nači- nu prehranjevanja ter podatke o verskih, eti- čnih in kulturnih zadržkih bolnika, ki so oblikovali njegove prehranjevalne navade. V prehranskem pregledu s kliničnim pre- gledom, meritvami sestave telesa in labo- ratorijskim pregledom določimo prehransko in presnovno stanje posameznika (16, 17). V klinični sliki ugotavljamo simptome in znake motenj hemopoeze (utrujenost, makrocitna anemija – povečan MCV, nizek 232 Rebeka Mukenauer, Lara Medved, Petra Hrast, Nada Rotovnik Kozjek Klinični znaki pomanjkanja … mr21_2_Mr10_2.qxd 21.6.2021 8:51 Page 232 233Med Razgl. 2021; 60 (2): št . Si m pt om i N ev ro lo šk i s ta tu s P si hi at ri čn i H bb M Cv c B 12 d Z dr av lje nj e m es ec ev a st at us (š t. a m pu l p o 1m l O H B 12 im .) 6 sp lo šn o sl ab o po ču tj e, u tr uj en os t, o bč ut ek z as pa ni h ok va ra g lo bo ke s en zi bi lit et e / 11 9 11 2 / / no g, t ež av e z  ra vn ot ež je m , n i i m el a ob ču tk a pr i h oj i na s po dn jih o ko nč in ah , m eh ki po s to pn ic ah n av zd ol in p ri sp el je va nj u z  av to m , zn ak i z a m ož no st p ira m id ne m ra vl jin če nj e no g do s po dn je ga d el a st eg en ok va re n a le vi s tr an i 7 st op nj ev an je / / 11 3 11 4 11 1 / 8 bo le či ne v  n og ah / / / / / / 20 bo le či ne v  t rt ic i z ar ad i p ad ca (p os to po m a iz zv en el e) , / / / / / / še b ol j o te že na h oj a 30 sl ab ša k on ce nt ra ci ja , p oz ab lji vo st , u po ča sn je ne m is li, / / / / / ne zm ož na z a de lo , p re ho d na v eg et ar ija ns ko d ie to 34 st op nj ev an je , o te ka nj e gl ež nj ev zn ak i p ol in ev ro pa ti je , a ta ks ija h oj e / 10 6 11 5 / 1 35 / / / 11 1 11 2 / 36 / kl in ič ni z na ki s ub ak ut ne k om bi - / / / 14 7 5 ni ra ne d eg en er ac ije h rb te nj ač e 37 ho ja m an j n es ta bi ln a, iz bo ljš ev an je s po m in a, / / / / / 3 še v ed no u po ča sn je na 39 m is li bo lje te kl e, g le žn ji ni so v eč o te ka li, iz bo ljš al o se je zn ak i p ira m id ne o kv ar e na s po dn jih an ks io zn o / / / / ra vn ot ež je , z ač el a s  ko le sa rje nj em p o ra vn em , n i z m og la ok on či na h, p ar et ič na in s pa st ič na de pr es iv na hi tr ej še h oj e al i h oj e po s to pn ic ah te r p o ne ra vn em te re nu , ho ja , s en zi bi lit et ni iz pa d za z bo dl ja j si m pt om at ik a ke r j e im el a ob ču te k tr di h m eč in t ež ki h no g, ju tr an ja di st al no o d sr ed i g ol en i i n za v ib ra ci je v  sk lo pu p ril ag o- ok or el os t, n i z m og la v oz it i a vt a, b ol ni šk i s ta le ž da lje na le vi s po dn ji ok on či ni di tv en e m ot nj e 42 op us ti la t ud i v eg et ar ija ns ko d ie to / / / / 86 5 48 si m pt om i i zz ve ne li, z ač el a te lo va di ti , z ak lju če k br ez o ds to pa nj / / / 59 9 / bo ln iš ke ga s ta le ža a  št ev ilo m es ec ev o d po ja va p rv ih s im pt om ov b ol ez ni ; b re fe re nč ne v re dn os ti : 1 20 –1 60 g/ l; c re fe re nč ne v re dn os ti : 8 1– 94 fl ; d re fe re nč ne v re dn os ti : 1 28 –6 48 pm ol /l Ta be la 2 .Č as ov ni p re gl ed s im pt om ov , z na ko v in o ds to pa jo či h la bo ra to rij sk ih v re dn os ti h em og lo bi na , p ov pr eč ne ga v ol um na e rit ro ci ta in v it am in a B 12 g le de n a zd ra vl je nj e. Š t.  – št ev ilo , H b  – he m og lo bi n, M CV  – p ov pr eč ni v ol um en e rit ro ci ta (a ng l. m ea n co rp us cu la r v ol um e) , O H B 12  – h id ro ks ok ob al am in , i m . – in tr am us ku la rn o. mr21_2_Mr10_2.qxd 21.6.2021 8:51 Page 233 hemoglobin, hipersegmentirani nevtro- filci, nevtropenija, trombocitopenija, pan- citopenija), nevrološke znake (periferna nevropatija, ataksija, parestezije udov, erektilna disfunkcija, urinska inkontinen- ca) in psihiatrične znake (depresija, mani- ja, delirij, psihoza). Bolnik lahko toži za utrujenostjo, glavoboli in slabim počutjem. Ti simptomi se pojavljajo v začetnem obdobju bolezenskih stanj (ki lahko traja zelo dolgo), so mnogokrat subtilni in pri- kriti zaradi simptomov stresne presnove. Laboratorijske preiskave, ki jih pri takem bolniku opravimo, so hemogram, bio- kemijske preiskave, ki omogočajo sprem- ljanje presnove, in določitev koncentracije serumskega vitamina B12 in feritina (7, 9, 10, 16). Ker so posledice pomanjkanja vitami- na B12 resne in v določeni meri nepovrat- ne, sta zgodnja diagnostika in zdravljenje nujni. V kliničnem primeru je opisana SADC, ki je napredujoča in ireverzibilna bolezen, če pomanjkanje prepozno zdravi- mo. SADC je posledica demielinizacije in izgube aksonov v hrbtenjači. Procesa pri- zadeneta predvsem posteriorne in lateral- ne svežnje hrbtenjačne beline in s tem kortikospinalne in spinocerebelarne proge, ki se v njih nahajajo. Pri bolnikih najdemo parestezije in šibkost distalnih delov udov, značilne so tudi težave s hojo in spastičnost spodnjih okončin. Bolezen lahko vodi v opti- čno atrofijo, cerebralno demielinizacijo z encefalopatijo in demenco, v najhujšem primeru lahko bolnika priklene na posteljo ali vodi v komo (18). Ob preventivi in zdravljenju posledic rastlinsko orientiranih načinov prehra- njevanja pa se odpirajo tudi etične, psiho- loške, sociološke in okoljske dileme, ki presegajo okvir tega članka. Omeniti velja, da je način prehranjevanja namreč veli- kokrat posledica osebnostnih značilnosti in vpliva okolja. Nedorečen je tudi dejan- ski vpliv pridelave različnih prehranskih virov (19). NaDOMEšČaNJE vITaMINa B12 Povprečni dnevni vnos vitamina B12 pri prebivalcih evropskih držav znaša med 4,2 μg in 8,6 μg, kar zadostuje priporoče- nemu dnevnemu vnosu vitamina B12 (tabe- la 3). Raziskave so pokazale nizko vrednost vitamina B12 v krvi pri vegetarijancih. Pomanjkanje vitamina B12 so v 18 razi- skavah različnih držav dokazali pri 11–90% starejših, pri 62 % nosečnic, 25–86 % otrok in pri 21–41 % mladostnikov, ki so sledili različnim vegetarijanskim načinom pre- hranjevanja. Ker se pomanjkanje vitamina B12 lahko pojavi tudi pri vegetarijancih, ki ne uživajo mesa, mlečne izdelke in jajca pa (ang. lacto-ovo-vegetarian, LOV), je uporaba prehranskih nadomestil vitamina B12 nujna ne glede na vrsto vegetarijanske oz. vegan- ske diete (5, 20, 21). Slednje kaže tudi dej- stvo, da predstavljena bolnica ob pojavu simptomov in znakov pomanjkanja vita- mina B12 stanja ni uspela zadovoljivo izboljšati s prehodom iz veganske na vege- tarijansko dieto. Ozdravela je šele po hkrat- nem temeljitem zdravljenju z vitaminom B12 im. in prehodu na običajno prehrano brez izločevalnih diet. Težave zaradi malabsorbcije so lahko zelo izrazite pri starejših zaradi popuščanja funkcije prebavil in razvoja funkcionalne malabsorbcije (4). Dodatno k zmanjšanemu vnosu virov vitamina B12 pri starejših doprinesejo še manjši vnos mesa zaradi težav z žvečenjem. Znižana koncentracija vitamina B12 v krvi bi lahko bila tudi eden izmed dejavnikov tveganja za pojav de- mence in psihiatričnih težav starostnikov. Pogostost podhranjenosti in sarkopenije s starostjo narašča, zato je pri starejših pri- poročljivo zvečati vnos beljakovin in ne obratno (23). Glede na evropsko demo- grafsko sliko predstavlja pomanjkanje vita- mina B12 skrito prehransko težavo starajoče se populacije. Zaradi številnih zdravstvenih nevar- nosti je za uravnoteženo in raznoliko vege- tarijansko prehrano smiselna profesionalna 234 Rebeka Mukenauer, Lara Medved, Petra Hrast, Nada Rotovnik Kozjek Klinični znaki pomanjkanja … mr21_2_Mr10_2.qxd 21.6.2021 8:51 Page 234 prehranska obravnava s strani kliničnega dietetika. Dodaten razlog za takšno obrav- navo je, da tudi zmanjšan vnos nekaterih drugih hranil pri rastlinsko naravnanem načinu prehranjevanja posredno vpliva na absorbcijo vitamina B12. Za zdaj še ni spre- jetega enotnega mednarodnega soglasja glede nadomeščanja vitamina B12 pri vege- tarijancih. Tega lahko vegetarijanci nado- meščajo s hrano rastlinskega izvora z doda- nim vitaminom B12, s prehranskimi dodatki ali z injekcijami v mišico. V nekaterih drža- vah je določenim prehranskim izdelkom dodan vitamin B12, npr. kosmičem ali moki. Kljub temu pa je dodana količina raznolika, zato uživanje tovrstnih izdelkov ne zago- tavlja zadostnega vnosa ob odsotnosti uži- vanja ostalih virov vitamina B12 (5). Prehranski dodatki z vitaminom B12 Privzeta količina ob enkratnem peroralnem odmerku vitamina B12 v vrednosti 50 μg, 500 μg in 1 mg je pri zdravih posameznikih 1,5 μg, 9,7 μg in 13 μg. Ob zaužitju tablete s 50 μg vitamina B12 se torej absorbirajo 3 % vitamina B12, tablete s 500 μg 2 % in tablete z 1 mg 1 %. Glede na te podatke je za dosego priporočenega dnevnega vnosa vitamina B12 pri odraslih in starejših veganih (3 μg) najenostavnejši način nado- meščanja shema: 2 tableti po 1mg tedensko. 235Med Razgl. 2021; 60 (2): Tabela 3. Referenčne vrednosti priporočenega vnosa B12 po starosti in spreminjanje le-teh skozi zadnjih 30 let – naraščanje priporočenega dnevnega vnosa vitamina B12 skozi leta (22). Kjer ni opredeljeno dru- gače, starost navajamo v letih. PDV navajamo v enoti µg/dan. PDV – priporočen dnevni vnos populacije, DH – Ministrstvo za zdravje Združenega kraljestva (angl. UK Department of Health), SCF – Znanstveni odbor za hrano (angl. Scientific Committee for Food), IOM – Inštitut za medicino nacionalne akademije za zna- nost (angl. US Institute of Medicine of the National Academy of Sciences), Afssa – Francoska agencija za hrano (fran. Agence française de sécurité sanitaire des aliments), NL – Nizozemski inštitut za javno zdrav- je (angl. Health Council of the Netherlands), SZO – Svetovna zdravstena organizacija, FAO – Organizacija Združenih narodov za prehrano in kmetijstvo (angl. Food and Agriculture Organization), NCM – Prehranski priročnik ameriške akademije za prehrano in dietetiko (angl. Nutrition Care Manual), D-A-CH – nemško govo- reče države (Deutschland–Austria–Confoederatio Helvetica). Organizacija DH SCF IOM afssa NL SZO/FaO NCM D-a-CH (leto izida smernic) (1991) (1993) (1998) (2001) (2003) (2004) (2014) (2015) Starosta 7–12 6–11 7–12 0–12 6–11 7–12 6–11 ≥ 4 in < 12 PDV 0,4 0,5 0,5 0,5 0,5 0,7 0,5 0,8 Starost 1–3 1–3 1–3 1–3 1–3 1–3 ≥ 1 in < 2 ≥ 1 in < 4 PDV 0,5 0,7 0,9 0,8 0,7 0,9 0,6 1,0 Starost 4–6 4–6 4–8 4–6 4–8 4–6 2–5 ≥ 4 in < 7 PDV 0,8 0,9 1,2 1,1 1,3 1,2 0,8 4,5 Starost 7–10 7–10 9–13 7–9 9–13 7–9 6–9 ≥ 7 in < 10 PDV 1,0 1,0 1,8 1,4 2,0 1,8 1,3 1,8 Starost 11–14 11–14 14–18 10–12 14–18 10–18 10–17 ≥10 in <13 PDV 1,2 1,3 2,4 1,9 2,8 2,4 2,0 2,0 Starost 15–18 15–17 / 13–15 / / / ≥13 in <19 PDV 1,5 1,4 2,3 3,0 Starost / / / 16–19 / / / / PDV 2.4 Starost ≥ 19 ≥ 19 ≥ 19 ≥ 20 ≥ 19 ≥ 19 ≥ 18 ≥ 19 PDV 1,5 1,4 2,4 2,4 2,8 2,4 2,0 3,0 a starost v mesecih mr21_2_Mr10_2.qxd 21.6.2021 8:51 Page 235 Priporočeni dnevni vnos vitamina B12 je v Sloveniji za odrasle, stare med 19 in 65 let in starejše od 65 let, 3,0 μg, za nosečni- ce do četrtega meseca nosečnosti 3,5 μg in za doječe matere 4 μg. Kljub uživanju vita- mina B12 s prehranskimi dodatki se lahko zgodi, da ne uspemo preprečiti zmanjšanja telesnih zalog omenjenega vitamina (5, 21, 23). Cianokobalamin je najpogostejša upo- rabljena oblika prehranskega dopolnila vitamina B12 zaradi visoke stabilnosti, nizke cene in varnosti. Pomembno je upo- števati, da je uporaba multivitaminskih pripravkov lahko neučinkovita, saj vita- min C in baker zavirata prenašalni sistem vitamina B12 preko transportnih beljako- vin. V slovenskih lekarnah in nekaterih dru- gih trgovinah so dostopne različne oblike vitamina B12 z različno koncentracijo: tablete, žvečljive tablete, podjezične table- te, pršilo, tekočina. Ni dokazane razlike med absorpcijo vitamina B12 podjezične table- te ali običajne tablete (5). Raziskave o uporabi rastlinske hrane, bogate z vitaminom B12 (morske alge, gobe in fermentirana hrana), so obetajo- če, a je trenutno še premalo raziskanega, poleg tega pridelava takšne hrane še ni poenotena. Obetajoča je uporaba zobne paste z dodanim vitaminom B12, kot alter- nativa moki z dodatkom tega mikrohranila, saj se s toplotno obdelavo vsebnost vita- mina zmanjša. Potrebnih je več raziskav o učinkih uporabe rastlinske hrane z doda- nim vitaminom B12 in prehranskih doda- tkov tega mikrohranila pri vegetarijanski in veganski dieti (5). Zdravljenje pomanjkanja vitamina B12 Pri posamezniku z ugotovljeno hipovita- minozo vitamina B12 je potrebna prehran- ska obravnava. Specifično pomanjkanje vitamina B12 zdravimo nadomestno z injek- cijami OHB12 ali cianokobalamina v miši- co. OHB12 se nekoliko močneje veže na plazemske beljakovine in se ga zato manj izloči s sečem (24). V prvem obdobju ozdravimo slabokrv- nost in napolnimo izpraznjene zaloge vita- mina B12 v telesu. Temu sledi vzdrževalno zdravljenje. V Sloveniji je na voljo OHB12 v odmerku 1 mg. Za prvo obdobje zdrav- ljenja priporočamo od pet do šest injekcij v presledku enega do dveh dni (npr. 1 mg trikrat tedensko za 14 dni). Bolniki z nevro- loškimi znaki naj prejemajo OHB12 vsak drugi dan najmanj tri tedne. Pri bolnikih brez nevroloških znakov nadaljujemo vzdrževalno zdravljenje v enakem odmerku vsake tri mesece, pri tistih z nevrološkimi znaki pa vsak drugi mesec (24). Počutje bolnikov se izboljša že po nekaj dneh. Učinek na spremembe v osrednjem živčevju je slabši. Delno izboljšanje se lahko pričakuje v prvih šestih mesecih. Število retikulocitov v krvi narašča do tretjega dne in doseže vrh približno sedmi dan (retikulocitna kriza). Za retikulociti začne naraščati koncentracija hemoglobina v krvi in doseže normalne vrednosti v petih do šestih tednih (24). Dokazali so, da je zdravljenje s tableta- mi, ki vsebujejo vitamin B12, enako učin- kovito kot injekcije v mišico. To je prednost, saj so injekcije dražje, za bolnika boleče, poleg tega pa se lahko pojavijo zapleti (5). Da je ob prisotni nevrološki simptoma- tiki za uspešno zdravljenje potrebno več- tedensko temeljito nadomeščanje vitamina B12, je razvidno tudi iz našega kliničnega primera. Bolnica je po zdravljenju pomanj- kanja vitamina B12 povsem ozdravela, kar je velik uspeh, saj je nevrološka simpto- matika, kot že omenjeno, pogosto le delno popravljiva ali celo nepovratna. Zanimivo bi bilo videti, če bi bili res enako uspešni tudi pri peroralnem zdravljenju. Vzdrževalno zdravljenje pri bolnici ni bilo potrebno, saj ni šlo za patofiziološko težavo, ampak le za nezadosten vnos vitamina B12 s pre- hrano zaradi veganske diete, ki jo je bolni- ca med zdravljenjem opustila. 236 Rebeka Mukenauer, Lara Medved, Petra Hrast, Nada Rotovnik Kozjek Klinični znaki pomanjkanja … mr21_2_Mr10_2.qxd 21.6.2021 8:51 Page 236 ZaKLJUČEK Trenutna priporočila za uravnoteženo prehrano narekujejo tako zmanjšanje porabe živil živalskega izvora, kakor tudi povečano uživanje rastlinskih izdelkov. Ob tem pa se je dobro zavedati, da je prehrano posamezni- ka treba dopolniti z individualnimi pres- novnimi potrebami. Pri popolni izključitvi mesa, mlečnih proizvodov in jajc namreč tvegamo pomanjkanje življenjsko nujnih snovi, med drugim vitamina B12. Posledično se lahko možen pozitivni indirektni učinek (vezan na povprečno nižji indeks telesne mase) med vegetarijanci in vegani izbrane prehrane popolnoma izniči. Vse to odraža predstavljen klinični primer. Bolnica se ni zavedala nevarnosti veganske diete za svoje zdravje, videla je le njene prednosti. Simp- tomi in znaki pomanjkanja vitamina B12 so ogrožajoči in se v primeru nenadomeščanja stopnjujejo. Tako lahko blagi splošni utru- jenosti sledijo med drugim bolečine, polinevropatija, makrocitna anemija, pan- citopenija, depresija, s konstantno depriva- cijo vitamina B12 pa celo subakutna kom- binirana degeneracija hrbtenjače, ki je praviloma nepovratna, če jo zdravimo pre- pozno. Naša bolnica je na nek način imela srečo, da je bilo tudi zdravljenje nevrološke simptomatike povsem uspešno, čeprav je z njim odlašala. Odločitev o spremembi prehrane naj bi bila zato premišljena in pod- krepljena s primernim znanjem. Glede na to, da jo običajno spremljajo etične dileme, tako na ravni zdravstvenega varstva in socialnega sistema, kot težav okoljskega vpliva prehranskih virov, lahko sklepamo, da bi bila najboljša rešitev individualna prehranska obravnava vsakega posamezni- ka, še preden se ta odloči za izločevalno dieto. Glede na to, da prehranska obravnava nemalokrat presega okvire klasične medi- cinske obravnave, bi bilo smiselno tudi vključevanje drugih strokovnjakov z zna- njem psihologije. Z dosledno obravnavo bi tako lažje in primerneje določili vire in vred- nosti vitamina B12, ki bi ga moral po- sameznik potencialno zaužiti, da doseže priporočen dnevni vnos in se na ta način izogne opisanim neželenim posledicam pomanjkanja vitamina B12. 237Med Razgl. 2021; 60 (2): mr21_2_Mr10_2.qxd 21.6.2021 8:51 Page 237 LITERaTURa 1. Dror DK, Allen LH. Effect of vitamin B12 deficiency on neurodevelopment in infants: Current knowledge and possible mechanisms. Nutr Rev. 2008; 66 (5): 250–5. 2. Thompson MD, Cole DE, Ray JG. Vitamin B-12 and neural tube defects: The Canadian experience. Am J Clin Nutr. 2009; 89 (2): 697–701. 3. Green R. Is it time for vitamin B-12 fortification? What are the questions? Am J Clin Nutr. 2009; 89 (2): 712S–6S. 4. Baik HW, Russell RM. Vitamin B12 deficiency in the elderly. Annu Rev Nutr. 1999; 19: 357–77. 5. Rizzo G, Lagana AS, Rapisarda AM, et al. Vitamin B12 among vegetarians: Status, assessment and supple- mentation. Nutrients. 2016; 8 (12): 767. 6. Kräutler B. Biochemistry of B12-cofactors in human metabolism. Subcell Biochem. 2012; 56: 323–46. 7. Šuput D. Anemije. In: Pirkmajer S. Temelji patološke fiziologije. Ljubljana: Medicinska fakulteta, Inštitut za patološko fiziologijo; 2019. p. 133–140. 8. Ankar A, Kumar A. Vitamin B12 deficiency. Statpearls [internet]. Treasure Island (FL): StatPearls Publishing; c2020 [citirano 2021 Mar 20]. Dosegljivo na: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK441923/ 9. Obeid R, Heil SG, Verhoeven MMA, et al. Vitamin B12 intake from animal foods, biomarkers, and health aspects. Front Nutr. 2019; 28 (6): 93. 10. Shipton MJ, Thachil J. Vitamin B12 deficiency - a 21st century perspective. Clin Med (Lond). 2015; 15 (2): 145–50. 11. Poddar R, Paul S. Homocysteine–NMDA receptor-mediated activation of extracellular signal-regulated kinase leads to neuronal cell death. J of Neurochem. 2009; 110 (3): 1095–106. 12. O’Leary F, Samman S. Vitamin B12 in health and disease. Nutrients. 2010; 2 (3): 299–316. 13. Jayaram N, Rao MG, Narasimha A, et al. Vitamin B12 levels and psychiatric symptomatology: A case series. J Neuropsychiatry Clin Neurosci. 2013; 25 (2): 150–2. 14. Ramphul K, Mejias SG. Schilling test. Statpearls [internet]. Treasure Island (FL): StatPearls Publishing; c2020 [citirano 2021 Mar 20]. Dosegljivo na: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK507784 15. Schich P, Nagalla S. What is the role of Schilling test in the diagnosis of megaloblastic anemia? [internet]. WebMD LLC; 2019 [citirano 2021 Mar 20]. Dosegljivo na: https://www.medscape.com/answers/204066-119219/ what-is-the-role-of-schilling-test-in-the-diagnosis-of-megaloblastic-anemia 16. Mlakar-Mastnak D, Kogovšek K, Rotovnik Kozjek N, et al. Klinična pot prehranske podpore na Onkološkem inštitutu Ljubljana. Ljubljana: Enota za klinično prehrano, Onkološki inštitut Ljubljana; 2016. 17. Cederholm T, Barazzoni R, Austin P, et al. ESPEN guidelines on definition and terminology of clinical nutrition. Clin Nutr. 2017; 36 (1): 49–64. 18. Lindsay KW, Bone I, Fuller G. Neurology and neurosurgery illustrated e-book. 5th ed. Elsevier Health Sciences; 2010. p. 543–4. 19. Van Kernebeek HRJ, Oosting SJ, Feskens EJM, et al. The effect of nutritional quality on comparing environmental impacts of human diets. J of Cleaner Product. 2014; 73: 88–99. 20. Pawlak R, Parrott SJ, Raj S, et al. How prevalent is vitamin B12 deficiency among vegetarians? Nutr Rev. 2013; 71 (2): 110–7. 21. IVZ: Referenčne vrednosti za vnos vitaminov in mineralov – tabelarična priporočila za otroke, mladostnike, odrasle in starejše [internet]. Inštitut za varovanje zdravja Republike Slovenije; 2013 [citirano 2021 Mar 20]. Dosegljivo na: https://www.nijz.si/sites/www.nijz.si/files/uploaded/referencne_vrednosti_za_vnos.pdf 22. EFSA NDA Panel. Scientific opinion on dietary reference values for cobalamin (vitamin B12). EFSA Journal. 2015; 13 (7): 4150–64. 23. Norman K, Klaus S. Veganism, aging and longevity: New insight into old concepts. Curr Opin Clin Nutr Metab Care. 2020; 23 (2): 145–50. 24. Zver S. Bolezni krvi in krvotvornih organov. In: Košnik M, Štajer D, Blinc A, et al. Interna medicina. Ljubljana: Medicinska fakulteta; 2018. p. 1099–247. Prispelo 29. 10. 2020 238 Rebeka Mukenauer, Lara Medved, Petra Hrast, Nada Rotovnik Kozjek Klinični znaki pomanjkanja … mr21_2_Mr10_2.qxd 21.6.2021 8:51 Page 238