Zbornik gozdarstva in lesarstva, Ljubljana, 37, 1991, s. 201-209 GDK 160.201:174.7 Picea abies (L) Karst.:892.62 KEMIJSKA ANALIZA TERPENOV IGLIC IN NJIHOVA ZASTOPANOST V VRETENIH PICEA ABIES (L) KARST. Vesna TIŠLER* Qaudia DEIGELE** Izvleček Avtorici prispevka opisujeta kvalitativno in kvantitativno določanje terpenov s pomočjo plinske kromatografije. Ekstrahirali sta smrekove iglice in proučevali sestavo njihovega eteričnega olja v cxlvisnosti od vretena, lege in starosti iglic. Ključne besede: iglica, vreteno, terpeni., analiza, Picea abies A CHEMICAL ANALYSIS OF TERPENES FOUND IN NORWAY SPRUCE NEEDLES - Picea abies (L) Karst. AND THEIR CONTENT IN WHORLS Vesna TIŠLER * Claudia DEIGELE ** Abstract The paper concerns qualitative and quantity determination of terpenes by means of gas cromatography. Nmway spruce needles were extracted and the chemical composition of their essential oil in correlation with the whorl, the position and age of needles was studied. Keywords: needle, whorl, terpenes, analysis, Picea abies. * dr., dipl. ing. kemije, Biotehniška fakulteta, Oddelek za lesarstvo, Ljubljana. ** dr., dipl. biol., Tehnična univerza Muenchen, Inštitut za botaniko, Muenchen, ZR Nemčija. 202 Zbornik gozdarstva in lesrstva, 37 1 UVOD Terpeni in njihovi derivati predstavljajo veliko skupino substanc, ki so zelo razširjene v rastlinskem in živalskem svetu. Do sedaj so jih izolirali že prek 4000 (1,2). Značilna je njihova zgradba, ki si jo lahko razložimo s povezavo dveh ali več izoprenskih (2-metil butadien) enot (3,4). Glede na njihovo število delimo terpene na monoterpene (2 enoti), seskviterpene (3 enote), diterpene ( 4) enote), triterpene ( 6 enot). Monoterpeni so glavna sestavina eteričnega olja iglavcev in spadajo med najvažnejše sekundarne snovi smreke. Imajo prijeten vonj, zaradi katerega prihaja do medsebojnega vpliva med drevesi in žuželkami (5). Posebej pomembno je fungicidno in insekticidno delovanje Picea- monoterpenov. Škodo, ki jo povzročajo insekti, omejujejo tako, da toksično vplivajo na zalego. Na splošno so monoterpeni hlapne reaktivne substance, ki emitirane iz rastlin reagirajo s kemijskimi snovmi onesnažene atmosfere, pri čemer se kot produkt reakcije velikokrat pojavlja ozon ( 6, 7). V naši raziskavi nas je zanimalo, kako so monoterpeni iglic razporejeni na različnih višinah smreke. Predpostavljali smo, da razporeditev ni enakomerna in neodvisna od vretena, na katerem je iglica. 2 MATERIALINMETODA Odvzem vejic Izbrali smo 55 let staro smreko, višine 17,5 m in prsne širine 71 cm. Rastla je na Pokljuki na nadmorski višini prek 1200 m, in sicer ob jasi v drugi vrsti zdravega avtohtonega gozda. Na 4. in 5. vretenu je bilo skupno 28 storžev. Drevo je imelo 20 vreten, od katerih je bilo pivih osem dobro olistenih. Iz vsakega drugega vretena smo odvzeli enoletne in dvoletne vejice, in sicer na sončni in senčni strani. Le na dvajsetem vretenu smo jih zaradi neolistenosti odvzeli le na senčni strani. Označene plastične vrečke z vejicami smo položili v hladilno posodo in jih, da ne bi terpeni hlapeli, prekrili s trdnim ogljikovim dioksidom. Ohlajene vzorce smo transportirali v laboratorij. Priprava iglic Za kemijsko analizo smo potrebovali iglice, ki jih je bilo potrebno odstraniti z vejic. Nabrane vzorce smo potapljali v tekočem dušiku, pri čemer so iglice odpadle. Spravili smo jih v predhodno označene platične posodice in jih uskladiščili v hladilnem prostoru pri-80°C. Ekstrakcija iglic Najbolj znana in komercialno uporabna je ekstrakcija iglic z vodno paro. V kondenzatu se ločita plast vode nad katero se naberejo eterična olja. Prednost te metode je, da vse težko hlapne komponente ostanejo v ekstrakcijski bučki in ne motijo nadaljnje identifikacije terpenov. Zaradi visoke temperature pa lahko pride do strukturnih sprememb nekaterih labilnih substanc, kar vodi do netočnega rezultata(3). 203 Tišler V., Deigele C.: Kemijska analiza terpenov iglic in njihova zastopanost ... V našem primeru smo izbrali kot ekstrakcijsko sredstvo pentan. To je šibko polarno organsko topilo, ki izloča terpene pri nizki temperaturi, vendar je njegova slabost v tem, da ekstrahira tudi slabo hlapne snovi, ki ne spadajo med monoterpene in motijo nadaljnjo analizo. Da bi se temu problemu izognili, smo vgradili v plinski kromatograf, ki je služil za identifikacijo substanc, stekleno predkolono, v kateri so se zadržale nehlapne snovi in tako niso ovirale kromatografske določitve. Za ekstrakcijo smo zatehtali 1 g iglic in jih zdrobili v teflonskem valju dismebratorja Braun Ag. Dobljeni prah smo prelili s 15 ml pentana, ki smo mu dodali 5 ml mešanice internih standardov d-2-karena in tridekana. Obeh internih standardov v smrekovih iglicah ni, imata pa podobne fizikalne in kemijske lastnosti kot ekstrahirani terpeni. o-2-karen smo uporabili za standardiziranje lahkohlapnih ogljikovodikov, tridekan pa za standardiziranje težje hlapnih substituiranih monoterpenov. Nato smo zmes prek noči stresali na stresalniku pri temperaturi 'flC. V nadaljevanju smo cca 5 ml pentana oddestilirali preko Vigreux kolone iz oddekantirane raztopine. Tako smo dosegli večjo koncentracijo terpenov v vzorcu, kar je bilo potrebno za kromatografsko analizo. Njihova prenizka koncentracija bi preprečevala natančno kvantitativno določitev. Pri koncentiranju terpeni niso izhajali, saj so njihova vrelišča v primerjavi z vreliščem pentana, ki znaša 36,5°C, bistveno višja. Tako pripravljene ekstrakte smo v označenih plastičnih posodicah shranjevali pri temperaturi -80°C. Pri de]u smo uporab]jali izredno čiste kemikalije. Kljub temu, da smo imeli na razpolago pentan z oznako p. a. smo ga zaradi morebitne nečistoče v laboratoriju prek Vigreux kolone ponovno predestilirali. Kromatografska anal.i7.a (GC) Uporabljali smo plinski kromatograf DANI 6500 z vgrajenim PTV (programmed thermal vaporiser) injekcijskim sistemom in plamensko-ionizacijskim FID detektorjem. S kromatografom je bil povezan integrator SHIMADZU Chromopac C-R3A Za kromatografsko ločitev terpenov smo uporabili dve različni kapilarni kvarčni koloni RSL300 oziroma DBl 7 in RSL200 firme Alltech dolžine 25 m, premera 0,25 mm. Polnjeni sta bili s polidifenilmetilsiloksanom različne polarnosti. Kot nosilni plin je služil helij s pretokom skozi kolono 2 mVmin. Zgorevalni plin je bila zmes kisika in vodika, pomožni plin je bil dušik. Tlaki posameznih plinov so znašali od 0,8 bara do 1 bara. Za določanje terpenov smo izdelali temperaturni program: temperatura čas 28°C 0,5 min zviševanje temperature po 30° /min do 80°C in vzdrževanje te temperature 4,0 min zviševanje temperature po 8°C/min do 250°C in vzdrževanje te temperature 15,5 min 20,0min 204 Zbornik gozdarstva in lesrstva, 37 Po injiciranju 1µ l vzorca smo PTV predkolono v 6 sekundah segreli na 250°C in s tem omogočili hiter prehod terpenov v kromatografsko kolono. Detektor smo v tem času ogreli na 280°C. Izračun količine terpenov v vzorcu je bil naslednji: FrxGsr Mr = F x SKP' /zatehta (g) ST M r ... količina terpena v g svežih iglic F r ... površina odklona terpena F sr ... površina odklona standarda Gsr ... zatehta standarda S KF ... korekturni faktor GrxFsr S FK = F T x Gsr Gr ... za tehta čistega terpena 3 REZULTATI V preglednicah 1 in 2 so prikazane absolutne in relativne količine 20 monoterpenov in seskviterpenov z 10 proučevanih vreten. Oznaki 1 in 2 pomenita sončno oz. senčno stran drew~sa. Obenem so podani rezultati analiz enoletnih in dvoletnih iglic. Kot vidimo, se kot glavne komponente tvorijo kamfen, a-pinen, mircen, limonen in bornilacetat. Ponavadi je nekatere terpene zaradi njihovih sorodnih lastnosti težko ločiti med seboj in nato identificirati. Nam je to uspelo z uporabo kromatografske kolone D817, s katero smo separirali limonen in 1,8-cineol kot tudi kafro in borneol. Z uporabo Wilcoxonovega preizkusa smo ugotovili, da ni signifikantnih razlik med zastopanostjo terpenov v iglicah s senčne in sonče strani kot tudi ne med rezultati analiz enoletnih in dvoletnih iglic, odvzetih na istem vretenu. Izjeme so a-pinen, P-pinen in neidentificiran seskviterpen ( odklon št. 2). Morda je vzrok za podobne rezultate razporeditve terpenov v iglicah s sončne in senčne strani posameznega vretena v tem, da je bil vrh drevesa lepo osvetljen,preostali del pa je bil osenčen zaradi sosednjih smrek, kar pomeni relativno izenačeno osvetlitev celotnega vretena. Popolnoma drugačno sliko dobimo, če govorimo o odvisnosti absolutnih vrednosti posameznih terpenov in vsote monoterpenov in seskviterpenov bd vretena. Prikazuje nam jo slika 1. Pri izdelavi diagramov smo upoštevali povprečno vrednost štirih meritev iz istega vretena, in sicer iglic s senčne in sončne strani ter enoletnih in dvoletnih. 2500 2000 1500 1000 500 o +--t---1,---,.--, o 5 10 15 20 1 - vsota monoterpenov 2 - vsota seskviterpenov 50 45 40 35 JO 25 20 15 10 5 o o 5 10 1 - a-terpineol 2-kafra 3-bomeol 4 - kamfenhidrat 15 20 205 TiJler V., Deigele C.: Kemijska analiza terpenov iglic in njihova zastopanost ... 250 200 150 100 50 0+--+----+---+--~ o 5 10 15 20 1-a-pinen 2 - bomilacetat 3-limonen 4 - 1,8-cineol 22 20 18 16 14 1 12 10 ~ 8 6 < 1 1 1 o 5 10 1 - longifolen 2 - i- -kariofilen 3 - a -humulen ,"'- --i 15 20 600 • 500 400 300 200 100 \~3 ~ o o 5 1-kamfen 2-mircen 1200 1000 800 600 400 200 ,o 15 -----0 .J__::;::=:::::::j:::=::==,::.:==c==, 20 O 5 10 15 20 1 - odklon št. 1 2 - odklon št. 2 Slika 1 Vsebnost terpenov v iglicah ( µg/g svežih iglic, ordinata) v odvisnosti od vretena ( abcisa) Že na prvi pogled opazimo bistveno več terpenov v vrhu drevesa kot v nižjih vretenih. Po vsej verjetnosti je ta pojav povezan z osenčenostjo. Pri večji osvetljenosti lahko natane 206 Zbornik gozdarstva in lesrstva, 37 več fosinteznih produktov (ATP, NADPH/H+ ), ki se lahko uporabijo pri sintezi terpenov. Pozornost vzbuja hitro padanje količine terpenov od drugega do četrtega vretena, za kar je možno naslednje tolmačenje: (1) Vpliv osenčenja: Le do drugega vretena je bila smreka neomejeno osončena. že pri četrtem vretenu je prihajalo do vpliva drugih dreves, ki so s svojimi vrhovi povzročala osenčenje proučevanega drevesa. (2) Vpliv položaja: Pri četrtem vretenu že lahko naletimo na iglice glavnih in stranskih poganjkov. Ker iglice stranskih poganjkov vsebujejo bistveno manj terpenov kot iglice glavnih, morda to dejstvo vpliva na dobljeni rezultat, čeprav se nanj ne smemo v veliki meri opirati. Pojavi, ki so jih zaznali pri klonih, namreč ne veljajo za drevesa, ki rastejo na prostem(3). Po nekaterih teorijah bi namreč morale iglice kasnejših poganjkov vsebovati celo več terpenov kot iglice glavnega poganjka, tako da bi se morala količina terpenov zviševati in ne, kot kažejo podatki, zniževati. Relativne deleže terpenov v odvisnosti od vretena prikazuje slika 2, kjer na prvem diagramu vidimo sestavo monoterpenov drugega vretena. Drugi diagram prikazuje povprešne relativne deleže od drugega do osmega vretena, tretji pa povprečno sestavo štirinajstega, šestnajstega, osemnajstega in dvajsetega vretena. triciklen /J-pinen felandren a-terpineol 2. vreteno a-pinen mircen komfenhidrat bornilacetat 2.-8. vreteno kamfen limonen borneol terpinilaceta t 14.-20. vreteno sabinen 1,8-cineol kafra Slika 2 Relativni deleži monoterpenov glede na celotno količino pri različnih vretenih Kot lahko razberemo iz sl. 2, se, z izjemo limonena in mircena, relativni deleži večine monoterpenov bistveno ne spreminjajo. Z vrha navzdol se nekoliko zveča količina borneola (iz 2,2% na 3, 1 % ) in zmanjša količina bomilacetata (iz 10, 7% na 7, 7% ). Deleža limonena in mircena se dopolnjujeta, tako da njuna vsota v vseh vretenih znaša ca 45%, pri čemer je delež limonena vedno večji. Slika 3 nam prikazuje, kako je vsota 207 Tišler V., Deigele C.: Kemijska analiza terpenov iglic in njihova zastopanost ... obeh terpenov konstantna in neodvisna od vretena, čeprav se moramo zavedati, da absolutna vrednost obeh komponent z višjim številom vretena upada. 50 30 % 25 20 15 10 5,+--t---+-t---+-~-t----r---,---, 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 Wirtel Slika 3 Relativni deleži limonena in mircena od celotne količine monoterpenov v odvisnosti od vretena. Vsaka točka je srednja vrednost štirih meritev ( obe strani, dve starosti iglic) Na drugem vretenu sta deleža limonena in mircena približno enaka, kasneje se delež mircena tako zniža, da je na dvajsetem vretenu šestkrat nižji od deleža limonena. če primerjamo formuli mircena in Jimonena (sl. 4), vidimo, da imamo opravka s povsem različnima strukturama. Piva je odprta veriga, druga monocikličen obroč. mircen limonen Slika 4 Strukturni formuli mircena in limonena(3) Zato lahko domnevamo, da v zgornjem, osončenem delu drevesa nastopa biokemijska sinteza mircena, medtem ko sinteza bolj kompliciranega cikličnega terpena še ni v celoti potekla. Z globino se zmanjšuje delež svetlobe; nastali mircen se lahko pretvori v druge produkte. 208 Zbornik gozdarstva in ksrstva, 37 že predhodne raziskave (3) so pokazale, da obstajajo kloni smreke z različnimi zastopanostmi terpenov v njihovih iglicah. Tako so klone uvrstili v tri skupine: v pni vsebujejo iglice veliko mircena (20- 35% ), v drugi skupini večji količini a-pinena (15%) in bornilacetata (20%) in v tretji skupini sorodne deleže bomilacetata (20% ), mircena (18%) in limonena (20% ). Nekateri kloni niso ustrezali nobeni od omenjenih skupin. Rezultatov raziskav o zastopanosti terpenov v iglicah klonov ponovno ne moremo primerjati z meritvami o zastopanosti terpenov v iglicah odrasle smreke, saj vidimo, da se vsebnost posameznega terpena lahko z oddaljenostjo od vrha drevesa bistveno spremeni. Na splošno bi za podrobno predstavo o zastopanosti terpenov v vretenih odraslih smrek potrebovali bistveno več podatkov. Morda bi tudi odrasle smreke, tako kot klone, lahko razdelili na posamezne razrede, v katere bi jih uvrstili glede na zastopanost terpenov v iglicah. Mogoče bi bila možna celo medsebojna povezava. 4 SKLEP Terpeni so lahko hlapne snovi, ki so v smrekovih iglicah. Iz njih smo jih ekstrahirali pri "flc s šibko polarnim organskim topilom pentanom. Njihovo kemijsko analizo smo izvršili s plinskim kromatografom in tako identificirali 15 monoterpenov in 5 seskviterpenov. Analizirali smo odraslo smreko s Pokljuke in na enajstih vretenih odvzeli vzorce enoletnih in dvoletnih iglic. Poleg tega smo proučevali iglice s senčne in sončne strani. Opravili smo 440 kromatografskih analiz in prišli do naslednjih ugotovitev: Od vrha drevesa navzdol se je količina terpenov v smrekovih iglicah zniževala, pri čemer je bilo znižanje med drugim in četrtim vretenom še posebej izrazito. Med sestavo terpenov iglic s sončne in senčne strani nismo opazili bistvenih razlik. Enaka ugotovitev velja za enoletne in dvoletne iglice. Vsota relativnih deležev limonena in mircenaje bila v iglicah vseh vreten približno enaka, čeprav se je delež mircena z naraščajočim številom vretena izredno znižal. Za splošne ugotovitve o zastopanosti terpenov v iglicah odraslih smrek bi bilo potrebno še veliko dodatnega raziskovalnega dela. Summaiy A CHEMICAL ANALYSIS OF TERPENES FOUND IN NORWAY SPRUCE NEEDLES - Picea abies (L.) Karst. AND THEIR CONTENT IN WHORLS Terpenes are volatile substances that are found in Nmway spruce needles. Extraction was preformed at flC with a weak polar organic solvent pentane. Terpenes thus obtained were chemically analyzed with a gas cromatograph, and 15 monoterpenes and 5 sesquiterpenes were identified. 209 Tiiler V., Deigele C.: Kemijska analiza terpenov iglic in njihova zastopanost ... A mature Nmway spruce from the Pokljuka region (Slovenia) was used for this purpose. Samples of one-year-old and two-year-old needles were taken from eleven whorls. Also, needles growing on the shady and sunny side were studied. 440 chromatographic analyses were performed. The results of the study can be summed up as follows. Terpene content was found to be on the decrease from the top of the tree downwards. The decrease from the second and the fourth. No significant difference was noticed between the chemical composition of terpenes found in needles growing on the sunny side and those on the shady side. The same was trne of one-year-old and two-year-old needles. The total relative amount of limonene and myrcene was approximately the same in the needles of ali whorls. However, the analysis revealed a sharp decrease in myrcene content depending upon an increasing number of whorls. To draw some general conclusions terpene content in the needles of a mature N orway spruce, much more research will be needed. Opomba: Prispevek predstavlja del jugoslovansko-zahodnonemškega raziskovalnega projekta z naslovom ''Terpene in Nadeln und Zweigen von Picea abies (L) Karst.", ki sta ga sofinancirali Biotehniška fakulteta, oddelek za lesarstvo iz Ljubljane, in Forschungszentrum J ulich GmbH v povezavi z Zveznim ministrstvom za raziskave in tehnologijo ZR Nemčije. REFERENCE FENGE~ D.; WEGENER, G.,1989. : Wood. Chemistry, Ultrastructure, Reactions. Walter de Gruyter, Berlin, New York, s. 184-192. LOHW ASSER, K., 1989. Monoterpene in Fichtennadeln: Zeitliche und Umweltbedingte Beeinflussung der Terpenkonzentration. TU Muenchen, s. 1-9. MERK, L,1988. Monoterpene in Nadeln der Picea abies (L.) Karst.. Dissertation, Muenchen. HACHEY, J. M., SIMARD, S.,1987. Extraction and analysis of the essential oil of the needles and twigs of white spruce Picea glauca (Moench) Voss. Joumal of Wood Chemistry and Technology, 7, 3, s. 333-341. HARBORNE, J. B.,1987. Chemical signals in the ecosystem. Annals of Botany, 60, 4, s. 39-57. DIMITRIADES, B.,1981. The role of natural organics in photochemical air pollution. Joumal of the Air Pollution Control Association, 33, 3, s. 229-235. ATKINSON, R., ASCHIMANN, S. M., WINER, A M.; PITTS, J..N.,1985. Kinetics and atmospheric implications of gasphase reactions of NO3 radicals with a series of monoterpenes and related organics at 294 + 2K. Environ. Sci. Technol., 19, s. 159-163. ' :l . j A . 1 1 .:·j l TABELA 1: Absolutne količine terpenov (µg/g svežih iglic} v smrekovih iglicah v odv Stran 1 : sončna; stran 2: senčna. Leto 1 988, 1989. 1 l vreteno 2 4 6 l stran 2 1 2 2 ·1 leto 1988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 1989 ~ :~ =~:. triciklen 25 21 34 21 17 20 14 17 16 17 17 14 a-pinen 217 146 27 2 154 135 143 122 11 9 109 126 116 105 kamfen 243 206 332, 202 154 195 140 163 139 174 1 53 137 sabinen 42 23 54 22 16 20 13 16 13 18 1 5 14 ! B-pinen 136 21 148 36 51 19 1 5 13 15 1 5 19 11 i mircen 678 371 953 383 177 258 179 203 1 51 232 173 199 l ·l limonen 589 472 754 459 283 389 229 346 244 387 250 335 : 1 ~ 1,8-cineol 309 156 402 175 89 127 95 98 70 11 2 84 86 B-felandren 18 8 22 8 5 7 4 5 4 6 5 5 kafra 51 39 44 25 23 30 14 1 7 18 23 20 20 borneol 50 41 45 26 29 39 16 20 27 35 23 26 l ' kamfenhidrat 46 38 61 36 22 31 19 24 18 29 22 22 a-terpineol 58 32 72 27 17 26 1 2 1 7 14 23 1 6 17 bornilacetat 200 181 371 228 11 6 172 129 168 95 147 135 11 7 terpinilacetat 25 20 43 27 15 20 17 22 12 18 16 16 I monoterpenov 2687 1775 3607 1829 1147 1496 1018 1248 945 1362 1064 1124 .. l ' ! longifolen 21 1 3 24 13 10 12 8 10 9 1 1 8 9 -r-kariofilen 17 23 23 24 16 22 19 20 1 5 18 1 7 1 7 a-humulen 14 22 1 9 5 21 20 19 19 15 1 7 16 14 odklon št. 49 65 73 62 47 65 39 51 38 45 39 31 odklon št. 2 1067 1070 1312 980 528 1012 518 703 517 671 593 184 ;- E seskiviterpenov 1168 1193 1451 1084 622 1131 603 803 594 /bl 673 255 1 "J idvisnosti od vretena. 7 8 10 12 2 2 2 2 1988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 17 16 14 14 14 1 5 1 5 18 1 O 1 3 1 2 1 2 1 3 1 2 1 O 5 6 122 11 O 11 O 1 08 107 109 11 3 125 81 95 90 91 93 88 77 49 55 169 153 141 142 135 144 148 1 71 97 130 108 11 7 123 11 9 97 54 59 16 1 5 1 5 1 5 13 1 5 14 1 6 9 1 3 11 12 1 2 11 1 O 6 6 16 11 1 7 13 14 10 16 1 3 9 1 O 14 1 O 13 13 9 5 4 181 197 193 226 152 185 173 2 11 85 138 106 131 126 139 85 b6 51 323 353 276 3 61 250 339 274 376 195 306 201 259 230 287 206 164 158 96 95 90 99 75 129 85 104 56 60 63 103 7 1 71 62 38 37 5 5 5 5 5 5 5 5 3 4 4 4 4 4 3 2 2 27 24 25 23 1 9 20 26 28 13 19 1 7 18 1 9 17 18 11 1 O • 35 32 30 30 27 29 30 36 19 • 29 20 24 26 26 26 17 14 1 26 25 24 24 20 22 23 27 13 20 1 6 18 18 18 1 6 1 O 9: 1 9 18 1 7 19 1 5 19 17 21 1 O 16 1 3 14 14 14 1 2 8 7 120 124 106 11 7 103 11 7 11 2 138 69 99 81 90 80 83 57 35 34 14 1 6 14 16 1 2 17 1 3 17 10 14 1 O 1 3 1 2 13 9 7 7 1186 1194 1077 1212 961 117 5 1064 1306 679 986 766 916 854 915 697 467 459 1 O 1 O 9 10 8 10 8 10 7 1 O 7 ') ,, 9 7 5 5 ., .J 16 19 1 5 18 14 20 1 6 20 11 1 E 11 1 4 14 1 7 1 1 1 O 8 16 18 15 1 6 1 ,1 19 1 5 1 9 1 1 1 G 11 1 3 14 1 6 1 1 10 9 ' 39 43 33 39 37 45 36 51 26 39 26 33 30 38 22 13 13 594 652 440 635 486 736 467 823 32G 657 363 556 432 5 7 O 361 32'.J 225 675 742 512 718 559 830 542 923 381 738 413 624 498 650 412 363 2GD1 ~ t t: f } 14 16 18 20 2 2 1 2 2 ,988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 1989 6 5 13 9 7 5 7 6 6 7 7 5 5 3 55 51 102 70 59 47 60 54 52 43 57 46 48 38 59 51 1 21 87 65 53 70 59 51 42 63 45 46 35 6 6 12 8 7 5 7 6 5 4 7 5 5 4 4 7 56 9 6 4 7 5 5 6 6 4 4 4 51 53 114 96 36 36 57 54 24 27 29 27 21 21 158 176 241 235 177 169 152 160 154 150 176 155 123 130 37 72 68 51 43 33 43 36 30 21 43 . 29 26 20 2 8 3 2 2 3 2 2 2 2 10 7 20 13 12 8 12 9 6 4 1 2 8 6 4 14 1 2 26 19 20 15 17 1 5 13 9 19 14 1 O 7 9 8 18 13 10 8 11 9 6 4 1 O 7 6 4 7 7 14 11 9 7 9 7 6 4 9 6 5 4 34 33 83 65 39 33 47 40 28 24 30 25 27 23 7 6 1 O 9 8 6 7 6 7 6 7 4 6 5 459 499 906 698 500 431 509 468 393 351 477 382 340 302 5 4 9 7 5 4 5 4 4 4 5 4 4 3 8 ) 13 1 2 -3 ll 7 7 7 a ;., 5 6 6 u v 9 8 14 11 o 6 9 9 3 8 8 4 7 6 J 13 15 32 26 14 11 1 9 17 1 2 1 7 1 5 7 9 1 O 225 252 42~ 366 232 172 276 233 166 131 1 97 48 138 154 2G,J 290 492 422 2f t3 1 !) 9 316 320 197 218 233 63 164 179 ~ i ~ ' , č 1 i ·1 -J ' ' TABELA 2: Relativne količine terpenov (v% glede na celokupno količino terpenov) v smr Stran 1: sončna; stran 2 senčna. Leto 1988, 1989 vreteno 2 4 6 stran 2 2 2 leto 1988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 1 989 1988 1989 1988 1989 198 triciklen 0,9 1 , 2 1 , O 1 , 2 1 ,4 1 , 4 1 , 4 1 , 3 1 , 7 1 , 3 1 , 6 1 , 3 1 , a-pinen 8 , 1 8,2 7, 5 8,4 11 , 3 9,6 1 2 , O 9,6 11 , 6 9 , 2 1 O, 9 9,3 1 O, kamfen 9, 1 11 , 6 9,2 11 , 1 13,4 1 3, O 13 , 8 13, 5 14, 9 1 2 , 5 14,3 12,3 14, sabinen 1 , 6 1 , 3 1 , 5 1 , 2 1 , 4 1 , 3 1 , 3 1 , 3 1 , 4 1 , 3 1 , 4 1 , 3 1 • B-pinen 5, 1 1 , 2 4, 1 2,0 4,4 1 , 3 1 , 5 1 , O 1 , 6 1 , 1 1 , 8 1 • O 1 • mircen 25,2 20,9 26,5 20,9 15,9 17 , 1 17 , 5 16,3 16,0 1 7 , O 16,2 1 7 , 7 1 5, limonen 21 , 8 26,6 20,9 25,0 24,7 26,0 22,6 27,9 25,6 29,4 23,6 29,8 27 , 1,8-cineol 11 , 5 8,8 11 , 1 9,5 7 ,8 8,5 9,3 7 ,8 7 , 6 8,2 7 , 9 7 , 6 8, B-felandren 0,7 0,4 0,6 0,5 o.s 0,5 0,4 0,4 0,5 0,4 0,5 0,4 o, kafra 1 , 9 2,2 1 , 2 1 , 4 2,0 2,0 1 , 4 1 , 4 2,0 2, O 1 , 8 1 , 8 2. borneol 1 , 9 2,3 1 , 2 1 , 3 2, 5 2,6 1 , 5 1 , 6 2, 3 2 , 5 2,2 2,3 3. kamfenhidrat 1 , 7 2, 1 1 , 7 2,0 1 , 9 2 , 1 1 , 8 0,9 1 , 9 2 , 1 2, 1 1 , 9 2. a-terpineol 2,2 1 , 8 2,0 1 , 5 1 , 5 1 , 8 1 , 2 1 , 4 1 , 5 1 , 7 1 , 5 1 , 5 1 • bornilacetat 7,4 1 O, 2 10,3 12,5 1 O, O 11 , 4 12 , 6 13 , 8 1 O , 1 1 O , O 1 2 , 7 1 O ,4 1 O , terpinilacetat 0,9 1 , 2 1 , 2 1 , 5 1 , 3 1 , 4 1 , 7 1 , 8 1 , 3 1 , 3 1 , 5 1 , 4 1 •. longifolen 1 , 8 1 , 1 1 , 7 1 , 2 1 , 6 1 , 1 1 , 4 1 , 2 1 , 4 1 , 4 1 , 2 3, 5 1 , : T-kariofilen 1 , 5 1 , 9 1 , 6 2,2 2,6 1 , 9 3 , 1 2,5 2,5 2,4 2,5 6,6 2, 1 a-humulen 1 , 2 1 ,8 1 , 3 0,5 3, 3 1 .a 3 , 1 2,4 2,6 2,2 2,4 5,6 2,' odklon št. 1 4,2 5,4 5,0 5,7 7,6 5,7 6,5 6,4 6,5 5,8 5,7 12 , 2 s, t odklon št. 2 91 , 3 89,8 90,4 90,4 84,9 89,5 85,9 87,5 87,0 88,2 88,2 7 2, 1 8 7 , ~ , smrekovih iglicah v odvisnosti od vretena. 7 8 10 12 2 2 ,, 2 '- 1988 1989 1988 1989 1988 1989 1988 1983 1988 1939 1988 1939 1938 1939 1933 1939 19 ~8 1 , 5 1 , 3 1 , 3 1 , 2 1 , 4 1 , 3 1 , 4 1 , 4 1 , 5 1 , 3 1 , 6 1 , 3 1 , 6 1 , 3 1 , 4 1 , 1 1 , 4 10,3 9, 2 10,2 3,9 1 1 • l 9,3 10,6 9,6 1 2 , O 9,6 11 , 7 1 O, O 10,3 9,6 11 , O 1 O, 5 1 2 , 1 14,2 12.8 1 3 , 1 11 , 7 14,0 12,2 13 , 9 13 , 1 14,4 1 3 , 2 14, 1 12,8 14,4 13,0 13 , 9 11 , 5 12,9 1 , 4 1 , 3 1 , 4 1 , 2 1 , 3 1 , 2 1 , 4 1 , 3 1 , 4 1 , 3 1 , 4 1 , 3 1 , 4 1 , 2 1 , 4 1 , 2 1 , 4 1 , 4 0,9 1 , 6 1 , 1 1 , 4 0,9 1 , 5 1 , O 1 , 4 1 , 1 1 , 8 1 , 1 1 , 6 1 , 5 1 , 3 1 , 1 0,9 1 5, 2 16,5 17 ,8 18,7 1 5, 9 1 5, 9 16,3 1 6 , 1 1 2, 5 14,0 13,8 14,3 14,8 1 5 • 1 1 2, 2 1 2 , 1 11 , 1 27, O 29,5 25,7 29,6 2 6 , 1 28,9 25,9 28,7 28, 5 30,9 26,3 28, 1 27,0 31 , 4 29,5 3 5, 1 34,0 8, 1 8,0 8,4 8, 1 7,8 10,9 7, 9 8,0 7, 9 8,2 8,2 11 , 3 8,3 7,8 8,8 8, 1 8,0 0,5 0,4 0,5 0,4 0,5 0,4 0,5 0,4 0,5 0,4 0,5 0,4 o,s 0,5 0,5 0,5 0,4 2,2 2,0 2,3 1 , 9 2,0 1 , 9 2,4 2, 1 1 , 9 1 , 9 2,2 2,0 2,2 1 , 9 2,6 2,4 2,2 3,0 2,7 2,8 2,5 2,8 2,5 2,8 2,7 2,9 2,9 2,7 2,6 3, 1 2,9 3, 7 3,6 3 , 1 2,2 2 ~ 1 2,2 2,0 2,2 1 , 9 2, 1 2 , 1 2,0 2 , 1 2,0 2,0 2, 1 1 , 9 2,3 2,0 2,0 1 , 6 1 , 5 1 , 6 1 , 6 1 , 5 1 , 6 1 , 6 1 , 6 1 , 5 1 , 6 1 , 6 1 , 6 1 , 6 1 , 5 1 , 8 1 , 6 1 , 6 10,2 10,4 9,8 9,7 1 O, 7 9,9 10,5 10,6 10,2 1 O, 1 10,7 9,8 9,3 9,0 8,2 7,6 7,4 1 , 2 1 , 4 1 , 3 1 , 4 1 , 3 1 , 2 1 , 2 1 , 3 1 , 4 1 , 4 1 , 4 1 , 4 1 , 3 1 , 4 1 , 4 1 , 5 1 , 5 1 , 5 1 , 3 1 , 7 1 , 4 1 , 4 1 , 1 1 , 5 1 , 1 1 , 8 1 , 3 1 , 7 1 , 2 1 , 5 1 , 3 1 , 6 1 , 4 1 , 8 2,4 2,5 3,0 2,5 2,6 2,4 2,9 2,2 2,8 2,2 2,7 2,3 2,7 2,6 2,6 2,6 3 , 2 2,4 2,4 2, 9 2 ,3 2,5 2,3 2,9 2, 1 2,9 2,2 2,7 2,2 2,9 2,6 2,6 2,7 3,5 5,8 5,8 5,4 5,4 6,6 5,5 6,6 5,6 6,3 5,2 6,0 5,3 6, 1 5,8 5,3 5, 1 5, 1 87,9 88,0 87, O 38,4 86,9 88,7 86, 1 89,0 86,2 89, 1 86,9 89,0 86,8 87 ,7 87, 9 88,2 86,4 14 16 18 20 2 2 2 2 9:18 1989 1933 1989 19JJ 198 9 1980 1939 193'.3 1939 1988 1989 19GJ 1989 1983 1989 1 1 4 1 , O 1 , 4 1 , 3 1 , 4 1 , 2 1 • 4 1 , 2 1 , 5 1 , 9 1 , 4 1 , 2 1 , 4 1 , 1 2, 1 10,2 11 , 2 10,0 11 ,8 10,9 11 , 7 11 , 5 13 , 2 12,4 12,0 1 2 , 1 14, 1 12,5 2,9 1 O, 1 13,4 12,5 13, 6 12,2 13,8 12,6 12,9 11 , 9 13,2 11 • 6 13 , 6 11 , 6 1 , 4 1 , 1 1 , 3 1 , 2 1 , 4 1 , 3 1 ,4 1 , 3 1 , 4 1 , 1 1 , 5 1 , 2 1 , 4 1 , 2 o.9 1 , 3 6,2 1 , 3 1 , 2 1 , O 1 , 4 1 , 1 1 , 2 1 , 7 1 , 2 1 , 1 1 , 3 1 , 2 1 , 1 11 , 6 1 2 , 6 13 ,8 7, 2 8,5 11 , 3 11 , 5 6,2 7 ,6 6,2 7, 2 6, 1 7,0 4,0 35,5 26,8 33,4 35,3 39,2 29,8 34, 1 39,4 42,7 36,6 40,6 36,7 43,0 8,0 14,4 7,5 7, 4 8, 7 7 , 7 8,5 7,7 7,7 6,0 9, 1 7,7 7,5 6,8 0,4 0,8 0,4 0,5 0,4 0,5 0,4 0,5 0,4 o.s 2,2 1 , 4 2,2 1 , 9 2,3 1 , 9 2,3 2,0 1 , 5 1 , 1 2,4 2,0 1 , 9 1 , 3 3 , 1 2,5 2,8 2,8 4,0 3,4 3,4 3, 2 3,2 2,5 4, 1 3,7 2,8 2,6 2,0. 1 , 6 2,0 1 , 9 2, 1 1 , 9 2,2 2,0 1 , 6 1 , 2 2, 1 2,0 1 , 8 1 , 4 1 , 6 1 , 4 1 , 5 1 , 5 1 , 7 1 , 5 1 , 7 1 , 5 1 , 4 1 , 1 1 , 9 1 , 5 1 , 4 1 , 3 ~.4 6,6 9,2 9,3 7,3 7,6 9,2 8,5 7 , 1 7,0 6,3 6,6 7,8 7,5 1 , 5 1 , 3 1 , 1 1 ,3 t , 5 1 , 3 1 ,4 1 , 4 1 , 7 1 , 8 1 , 5 1 , 1 1 , 7 1 , 5 1 , 8 1 , 5 1 , 9 1 , 6 2,0 2,0 1 , 6 1 , 4 2, 1 1 , 8 2, t 5,2 2,4 1 , 8 3, 2 2,8 2,7 2,9 3,0 3,2 2,6 2,3 3,6 3,6 3,4 7,6 3,6 3 , 1 3,5 2,8 2,8 2,6 3,6 3, 1 2,7 2,9 4, 1 3,8 3,7 5,6 4, 1 3,2 5, 1 6,0 6,5 6,2 5,6 5,6 5,9 5,4 6 , 1 7, 7 6,5 10,6 5,3 5,7 6,4 86,9 86, 1 86,7 85,8 86, 1 87,2 88,0 84 , 1 8 3 , 1 84,3 71 , O 84,6 86,2